《血液分析仪器》ppt课件

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1、第十二章血液分析仪器广州医学院化学教研室制作:张超副教授E-mail:chao-zh@163.com血液分析仪器是临床实验室最常用的分析仪器,包括:血细胞分析仪血液凝固分析仪血液流变学分析仪第一节血细胞分析仪一、血细胞分析仪(Bloodcellanalyzer,BCA)指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液学自动分析仪(AHA)。ABCC代表早期的低档次BCA,AHA外延过大。◘历史手工计数仪器简单计数两分群三分群五分群五分群+网织红20世纪40年代末,电阻抗法微

2、粒子计数专利50年代,CoulterModelA型用于临床60年代,测定参数达7项70年代,全血细胞计数(CBC)80年代,双通道、白细胞2~3分群、五分群90年代以来,多功能、多参数、流水线二、血细胞分析仪分型1.按自动化程度半自动血细胞分析仪全自动血细胞分析仪血细胞分析工作站血细胞分析流水线2.按检测原理电容型血细胞分析仪光电型血细胞分析仪激光型血细胞分析仪电阻抗型血细胞分析仪联合检测型血细胞分析仪干式离心分层型血细胞分析仪无创型血细胞分析仪3.按对白细胞分类的水平两分群血细胞分析仪三分群血细胞分析仪五分群血细胞分析仪“

3、五分群+网织红”血细胞分析仪嗜酸性细胞淋巴细胞单核细胞中性粒细胞血小板嗜碱性细胞三、电阻抗法血细胞分析仪基本原理①电阻值R:血细胞电解质溶液(稀释液)>②细胞通过仪器微孔时:阻抗R↗仪器产生脉冲信号③根据脉冲信号进行血细胞计数和体积测定。贝克曼库尔特AC·Tdiff2TM三分类血细胞分析仪这可要记住哦!1.白细胞的检测Lymon%=×100%ALAL+AM+AGMono%=×100%AMAL+AM+AGGran%=×100%AGAL+AM+AGLMGAMALAGREL.No.R1R2R3R43590160450f1淋巴细胞单

4、核细胞粒细胞三分群细胞分析仪:Three-partDifferentialBCA2.红细胞和血小板的检测红细胞和血小板共用一个小孔管,正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限,血小板计数准确容易CPU对血小板和红细胞分布图进行判断2.红细胞和血小板的检测异常人红细胞体积和血小板体积间界限不清!四、联合检测型血细胞分析仪的检测原理主要体现在白细胞分类,实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是:均使用鞘流技术。前鞘流后鞘流检测窗1.容量、电导、光散射检测技术(VCS)(Volum

5、e、conductivity、lightscatter)1987年美国BECKMANCOULTER公司发明VCS光散射电导性电阻抗体积(volume,V)电阻抗原理测定细胞体积和数量电导性(conductivity,C)高频电磁探针,测量细胞内部结构,包括细胞核、细胞浆的比例及细胞内的化学成分。光散射(scatter,S)细胞内粗颗粒的光散射强度要比细颗粒更强2.光散射与细胞化学联合检测技术Bayer公司生产ADVIA120血细胞分析仪。这类仪器是应用激光散射与过氧化物酶染色技术对白细胞进行分类计数。仪器有四个通道:血红蛋白

6、测量通道血红细胞/血小板测量通道嗜碱性粒细胞测量通道过氧化物酶测量(细胞分类)通道高角度前向散射光:细胞核及颗粒的信息低角度前向散射光:细胞大小的信息结合细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数。染色剂:过氧化氢、1-氯-1-萘酚胞浆固定剂:甲醛基本原理是:基于细胞大小、折射率、核形、核浆比值、以及颗粒性质等,均可影响不同角度下的散射光强度不同白细胞在以上几个方面完全一致的几率很小,从而对白细胞进行分类4.电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术,通过4个不同的检测系统对白

7、细胞、幼稚细胞进行分类和计数。嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统淋巴、单核和粒细胞检测系统幼稚细胞检测系统Sysmex生产的NE-8000血细胞分析仪。白细胞分类散射图联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一个细胞,综合分析实验数据,从而得出较为准确的白细胞“五分群”结果。五、网织红细胞检测原理网织红细胞中嗜碱性物质RNA,在活体状态下与特殊的荧光染料结合。荧光强度与RNA含量成正比。用流式细胞术检测网织红细胞大小和RNA含量及血红蛋白的含量细胞与试剂反应前后的变化反应前反应后血细胞分

8、析仪网织红细胞成熟度分类荧光(RNA)强度ReticulocytesPLTRBC高荧光强度低荧光强度低荧光强度WBC前向散射光(细胞大小)六、血红蛋白测定原理除干式、无创型外,各型BCA对血红蛋白测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关

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1、第十二章血液分析仪器广州医学院化学教研室制作:张超副教授E-mail:chao-zh@163.com血液分析仪器是临床实验室最常用的分析仪器,包括:血细胞分析仪血液凝固分析仪血液流变学分析仪第一节血细胞分析仪一、血细胞分析仪(Bloodcellanalyzer,BCA)指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液学自动分析仪(AHA)。ABCC代表早期的低档次BCA,AHA外延过大。◘历史手工计数仪器简单计数两分群三分群五分群五分群+网织红20世纪40年代末,电阻抗法微

2、粒子计数专利50年代,CoulterModelA型用于临床60年代,测定参数达7项70年代,全血细胞计数(CBC)80年代,双通道、白细胞2~3分群、五分群90年代以来,多功能、多参数、流水线二、血细胞分析仪分型1.按自动化程度半自动血细胞分析仪全自动血细胞分析仪血细胞分析工作站血细胞分析流水线2.按检测原理电容型血细胞分析仪光电型血细胞分析仪激光型血细胞分析仪电阻抗型血细胞分析仪联合检测型血细胞分析仪干式离心分层型血细胞分析仪无创型血细胞分析仪3.按对白细胞分类的水平两分群血细胞分析仪三分群血细胞分析仪五分群血细胞分析仪“

3、五分群+网织红”血细胞分析仪嗜酸性细胞淋巴细胞单核细胞中性粒细胞血小板嗜碱性细胞三、电阻抗法血细胞分析仪基本原理①电阻值R:血细胞电解质溶液(稀释液)>②细胞通过仪器微孔时:阻抗R↗仪器产生脉冲信号③根据脉冲信号进行血细胞计数和体积测定。贝克曼库尔特AC·Tdiff2TM三分类血细胞分析仪这可要记住哦!1.白细胞的检测Lymon%=×100%ALAL+AM+AGMono%=×100%AMAL+AM+AGGran%=×100%AGAL+AM+AGLMGAMALAGREL.No.R1R2R3R43590160450f1淋巴细胞单

4、核细胞粒细胞三分群细胞分析仪:Three-partDifferentialBCA2.红细胞和血小板的检测红细胞和血小板共用一个小孔管,正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限,血小板计数准确容易CPU对血小板和红细胞分布图进行判断2.红细胞和血小板的检测异常人红细胞体积和血小板体积间界限不清!四、联合检测型血细胞分析仪的检测原理主要体现在白细胞分类,实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是:均使用鞘流技术。前鞘流后鞘流检测窗1.容量、电导、光散射检测技术(VCS)(Volum

5、e、conductivity、lightscatter)1987年美国BECKMANCOULTER公司发明VCS光散射电导性电阻抗体积(volume,V)电阻抗原理测定细胞体积和数量电导性(conductivity,C)高频电磁探针,测量细胞内部结构,包括细胞核、细胞浆的比例及细胞内的化学成分。光散射(scatter,S)细胞内粗颗粒的光散射强度要比细颗粒更强2.光散射与细胞化学联合检测技术Bayer公司生产ADVIA120血细胞分析仪。这类仪器是应用激光散射与过氧化物酶染色技术对白细胞进行分类计数。仪器有四个通道:血红蛋白

6、测量通道血红细胞/血小板测量通道嗜碱性粒细胞测量通道过氧化物酶测量(细胞分类)通道高角度前向散射光:细胞核及颗粒的信息低角度前向散射光:细胞大小的信息结合细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数。染色剂:过氧化氢、1-氯-1-萘酚胞浆固定剂:甲醛基本原理是:基于细胞大小、折射率、核形、核浆比值、以及颗粒性质等,均可影响不同角度下的散射光强度不同白细胞在以上几个方面完全一致的几率很小,从而对白细胞进行分类4.电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术,通过4个不同的检测系统对白

7、细胞、幼稚细胞进行分类和计数。嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统淋巴、单核和粒细胞检测系统幼稚细胞检测系统Sysmex生产的NE-8000血细胞分析仪。白细胞分类散射图联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一个细胞,综合分析实验数据,从而得出较为准确的白细胞“五分群”结果。五、网织红细胞检测原理网织红细胞中嗜碱性物质RNA,在活体状态下与特殊的荧光染料结合。荧光强度与RNA含量成正比。用流式细胞术检测网织红细胞大小和RNA含量及血红蛋白的含量细胞与试剂反应前后的变化反应前反应后血细胞分

8、析仪网织红细胞成熟度分类荧光(RNA)强度ReticulocytesPLTRBC高荧光强度低荧光强度低荧光强度WBC前向散射光(细胞大小)六、血红蛋白测定原理除干式、无创型外,各型BCA对血红蛋白测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关

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