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《微生物法检测乳中抗生素残留及假阳性产生的原因_李延华》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、分析与检测微生物法检测乳中抗生素残留及假阳性产生的原因李延华张兰威王伟君(东北农业大学食品学院,哈尔滨,150030)摘要介绍了乳中抗生素残留检测的常用微生物法:氯化三苯四氮唑法、纸片法、活性试验法、试剂盒方法,并从乳本身因素、外来因素2个角度分析实际检测过程中引起假阳性结果的原因,为乳中抗生素检测提供理论参考。关键词抗生素,微生物检测,假阳性原料乳中残留抗生素影响乳制品加工,降低食品是有一定特异性,如:Bacilluscereus对四环素类敏[1~3]安全,危害人体健康,同时也影响乳制品的进出感,Basillussubtilis对氨基糖苷类敏感,Kocuriavar
2、口贸易。我国原料乳及乳制品中抗生素残留严重,对ians对大环内酯类,Bacillusstearothermophilus对磺[7]乳中抗生素的检测是我国乳品加工中至为关注的问胺类和内酰胺类敏感,是目前抗生素检测最常用题。的方法。目前,乳中抗生素残留的检测方法大致分三类:2乳中抗生素常用微生物检测法介绍生物测定法(微生物测定法、放射受体测定法)、免疫法(放射免疫法、荧光免疫法、酶联免疫法)、理化分析国内外当前检测乳中抗生素最常使用微生物方[4~6]法(波谱法、色谱及联用技术)。不同方法各有优法,不同微生物检测法所用的微生物种类不同,反应缺点,而对于原料乳供销者来说,知道是否有抗生
3、素的灵敏度、特异性、检测限也不同。自1950年代,微残留即可做出是否出售或收购及如何处理的判断,所生物方法广泛使用并不断优化,还开发出方便简单的以传统上微生物受阻法(MIT)一直应用于大批乳样试剂盒。检测。21氯化三苯四氮唑法但由于乳组分的多样性、抗生素在动物体内代谢1955年提出氯化三苯四氮唑法,是日本1950年的复杂性,以及检测方法的特异性等原因,微生物检代检测牛乳中青霉素残留的法定方法,我国1955年测法经常出现假阳性和假阴性结果,尤其是假阳性结4月1日生效为法定标准,目前我国的食品标准GB/[1]果。本文叙述了当前常用的几种微生物检测法,对T4789272003中还规
4、定采用该法。实际检测过程中常出现的假阳性现象进行分析,为乳原理[8]:当乳中加入嗜热链球菌以后,如果乳中中抗生素的检测提供理论参考。无抗生素,嗜热链球菌就生长繁殖,在新陈代谢中进1微生物检测法原理及应用特点行生物氧化,其脱出的氢可以和加在乳中的氧化型TTC结合成为还原型TTC,氧化型TTC是无色的,微生物检测法(MIT)根据抗生素对微生物的生还原型TTC是红色,所以可使乳变红色。相反,如果理机能及代谢的抑制作用来定性或定量确定样品中乳中存在抗生素,嗜热链球菌就不能生长繁殖,没有的抗微生物药物残留。通常在被检测乳样中培养对氢释放,TTC不被还原,仍为无色,乳汁也无色,检测抗生素敏感的
5、微生物,如果样品中没有抗生素存在,时间35~4h。由于微生物的生长可以观察到培养基变混浊、不透明特点:设备简单、费用低,但灵敏度低、易假阳性,或由于微生物产酸导致指示剂颜色变化;如果有抗生在检测青霉素和氯霉素上敏感度与枯草杆菌纸片法素或其他抑菌物质存在则会观察到培养基上有抑菌大致相等,但对链霉素不太敏感,对新霉素根本不敏圈形成或培养基仍旧透明,或没有颜色变化。感,消毒剂可干扰试验。我国目前广泛使用此方法。这类检测方法可靠性高、操作简单、费用低,经过22管碟法若干小时的培养过程方能观察到结果,另一显著特点1944年由Foster和Woodruff创建,用含有敏感第一作者:硕士研究
6、生。菌的琼脂做成平皿,上放小管(现在常用牛津杯),管收稿日期:2005-04-27,改回日期:2005-07-08中放已知抗生素标准液和未知试样液,经培养后,抗2005年第31卷第8期(总第212期)93食品与发酵工业FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES生素标准液周围琼脂不长细菌,即为抑菌圈,如试样0005U/mL,本法可根据抑菌圈直径定量测定。液周围也出现抑菌圈表示含有抗生素,当时所用菌种特点:枯草杆菌纸片法检测的结果易出现假阳为枯草杆菌。同年由Schmich和Moyer用金黄色葡性,为了确定阳性物质是否为青霉素(或内酰胺类)萄球菌代替,并发现抑菌圈大
7、小与琼脂厚度成反比。引起的,对加热后的乳样用青霉素酶处理,以灭活乳1954年,MeeWes和Mlosevic又发现,青霉素产生的样中的青霉素,然后再行检测,检测限可达001IU/抑菌圈随着培养时间的延长而增大,随着琼脂的增厚mL;嗜热脂肪杆菌脂肪纸片法不仅用于检测乳中而减小,不含有青霉素的原料乳有时也能抑制金黄色内酰胺类抗生素,并能暗示是否存在其他抑菌物质,葡萄球菌,故改进为采用藤黄八迭球菌(Sarcina如磺胺类、四环素类等,检测限可达0008U
