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时间:2019-06-23
《《目的基因分离克隆》PPT课件》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、1.目的基因分离克隆一目的基因的化学合成特点:3’→5’合成,合成长度<200bp过程:推出基因序列后,用DNA合成仪合成作用:合成引物二PCR合成目的基因定义:分离纯化出的目的片段用PCR仪扩增(详见主要技术)引物设计原则长度:15-30bp退火温度:序列:少相似,防错配引物3’末端:避免为A(易错配)CG含量:40%-60%※未知序列时:用近缘生物对应片段参考RT-PCR间接合成:以mRNA为模板逆转录出cDNA,再以cDNA为模板PCR※cDNA:定义:以mRNA为模板逆转录合成的无内含子单链环状D
2、NA特点:无内含子、单链环状,逆转录酶属于DNA聚合酶,需引物三基因文库分离目的基因基因组文库的建立:cDNA文库的建立:四基因图位克隆染色体步移法:染色体登陆:※本章总结
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