《微生物检验》课件

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时间:2019-06-20

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1、其他革兰阴性杆菌第十章其他革兰阴性杆菌嗜血杆菌属鲍特菌属布鲁菌属巴斯特菌属弗朗西斯菌属第一节嗜血杆菌属(Haemophilus)返回分类嗜血杆菌属(Haemophilus)隶属于巴斯德菌科,嗜血杆菌属流感嗜血杆菌(H.influenzae)副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae)溶血嗜血杆菌(H.haemolyticus)副溶血嗜血杆菌(H.parahaemolyticus)克雷嗜血杆菌(H.ducreyi)埃及嗜血杆菌(H.aegyptius)嗜沫嗜血杆菌(H.aphrophilus)副嗜沫嗜血杆菌(H.paraphrophilus)迟缓嗜血杆菌(H.segn

2、is)临床意义菌种常栖部位及所致疾病流感嗜血杆菌原发化脓性感染及继发性感染,包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等。副流感嗜血杆菌口腔及阴道正常菌群,偶尔可引起心内膜炎、尿道炎。溶血嗜血杆菌鼻咽部正常菌群,常引起儿童上呼吸道感染。副溶血嗜血杆菌口腔、咽部正常菌群,偶可引起咽炎、化脓性口腔炎和心内膜炎杜克雷嗜血杆菌软下疳,为性传播病菌。常引起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。埃及嗜血杆菌急性亚急性结膜炎、儿童巴西紫癜热嗜沫嗜血杆菌咽部正常菌群、牙菌斑中常见菌、偶致心内膜炎和脑脓肿副嗜沫嗜血杆菌咽部及阴道正常菌群,偶可引起亚急性细菌性心内膜炎、败血症、甲沟炎、、脑脓肿

3、、脑膜炎。几种主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病生物学特性革兰阴性短小球杆菌呈双球形或短丝状或多形性无芽孢、无鞭毛有荚膜微生物检验检验程序标本采集抗原检测及核酸检测分离培养与鉴定药物敏感试验标本采集原则在疾病早期采取标本,立即送检。在取标本时以肉汤湿润,防止干燥。对心内膜炎、患者取血液标本。痰液标本,应洗涤、消化,再接种。DNA探针杂交(快速检测)血液脑脊液脓汁痰分离培养(巧克力琼脂)涂片、镜检荚膜肿胀试验(初步报告)标记抗体检测抗原涂片、荚膜肿胀试验(初步报告)菌落形态、卫星现象、血清学现象报告结果嗜血杆菌的检验程序增菌培养分离培养培养条件:需要X、V因子营养要求高生长温度

4、为35℃血琼脂平板培养基巧克力琼脂培养基菌落特征:巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落流感嗜血杆菌巧克力琼脂养基菌落鉴定培养需要X、V因子菌落形态卫星现象卫星现象(satellitephenomenon)嗜血杆菌因子β溶血发酵XV葡萄糖蔗糖乳糖甘露醇木糖触酶CO2生长ONPG流感嗜血杆菌++-+---D+--副流感嗜血杆菌-+-++-+-DDD溶血嗜血杆菌++++---D+--副溶血嗜血杆菌-++++---+--注:D为不同结果嗜血杆菌属中种的特征药物敏感试验药敏试验:K-B法培养基:HTM质控菌株:(ATCC49247)需常规检测β-内酰胺酶耐药机制是:1.由质粒介导的TE

5、M-1型2.由染色体介导的PBP的改变3.对氯霉素、四环素耐药与R质粒相关第二节鲍特菌属(Bordetella)返回分类百日咳鲍特菌(B.pertussis)副百日咳鲍特菌(B.parapertussis)支气管鲍特菌(B.branchiseptica)鸟鲍特菌(B.avium)欣氏鲍特菌(B.hinzii)霍氏鲍特菌(B.holmesii)临床意义是百日咳的致病菌一年四季均可发病,冬春季多发,小儿多于成人传播途径:飞沫传染源:病人潜伏期:1~2周致病因素:百日咳毒素(PT)、丝状血细胞凝集素(FHA)腺嘌呤环酶毒素(ACT)、气管细胞毒素、皮肤坏死毒素临床表现:1.卡他

6、期:1~2周,明显卡他症状,传染性强,感染标本培养阳性率高2.痉挛期:1~4周,阵发性剧烈咳嗽,直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止3.恢复期:1~2周,阵咳减轻,渐趋停止生物学特性革兰阴性短小杆菌无芽孢,有荚膜支气管鲍特菌、鸟鲍特菌有鞭毛专性需氧,最适温度35℃,最适pH6.8~7.0百日咳鲍特菌革兰染色3种鲍特菌抗原因子种特异因子其它因子百日咳鲍特菌12、3、4、5、6、7副百日咳鲍特菌148、9、11、7支气管炎鲍特菌128、9、10、11、7微生物检验检验程序分离鉴定与培养标本直接检查凝集反应标本直接检查(革兰染色)DFA抗原检出核酸检测分离培养血清学诊断,ELISA等可

7、疑菌落菌落观察镜检生化反应DFA核酸检测鲍特菌检验程序鲍金琼脂等分离培养与鉴定在CCBA琼脂平版上形成光滑、有光泽、水银样的菌落百日咳鲍特菌在CCBA培养基的菌落动力氧化酶脲酶枸橼酸盐利用硝酸盐还原百日咳鲍特菌-+---副百日咳鲍特菌--++-支气管炎鲍特菌+++++鸟鲍特菌++---欣氏鲍特菌++-+-霍氏鲍特菌-----6种鲍特菌生化特征标本直接检测抗原、抗体检测采用ELISA检测①直接荧光抗体检测②单克隆抗体检测③核酸检测抗体检测:IgM及IgA,其中IgA在感染早期出现,不受接种疫苗干扰,有利于早期诊断药物敏感试验及结

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