《微生物检验》PPT课件

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1、不发酵革兰阴性杆菌不发酵革兰阴性杆菌概念:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌。不发酵革兰阴性杆菌假单胞菌属(Pseudomonas)产碱杆菌属(Alcaligenes)不动杆菌属(Acinetobacter)莫拉菌属(Moraxella)无色杆菌属(Achromobacter)金氏杆菌属(Kingella)黄杆菌属(Flavobacterium)艾肯菌属(Eikenella)土壤杆菌属(Agrobacterium)黄单胞菌属(Xanthomonas)丛毛单胞菌属(Comamonas)常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定试验

2、假单胞菌属无色杆菌属黄杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属丛毛菌属莫拉菌属氧化酶+++/--+++/-O/F试验O/-OOO/----动力+/-+/-+/--++-注:+:90%以上阳性;-10%以下的阳性;+/-:约70%为阳性;O:为氧化。不发酵革兰阴性杆菌非发酵菌嗜麦芽窄食单胞菌葡萄糖产酸无色杆菌属土壤杆菌属假单胞菌属动力+OXOX-不动杆菌属+葡萄糖产酸黄色素摩拉氏菌属黄杆菌属---++端鞭毛-+-++产碱杆菌属尿素-+常见不发酵菌的鉴定双岐索引第一节假单胞菌属(Pseudomonas)一、概述1.分类2.临床意义3.微生物特性4.微生物检验(1)检验程序(2)鉴定(3

3、)药物敏感性试验(AntibacterialSusceptibilityTest)1.分类假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定rRNA同源群有关的种一群需氧、不发酵葡萄糖无芽胞,有鞭毛氧化酶阳性的革兰阴性杆菌多为条件致病菌2.临床意义假单胞菌属分布广泛,人类不发酵菌感染中,假单胞菌占70%~80%,主要为铜绿假单胞菌,其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌等3.微生物特性革兰阴性、无芽胞、专性需氧有端鞭毛或丛鞭毛生长温度范围广,最适生长温度为35℃产生各种水溶性色素:绿脓素、脓玉红素、荧光素、脓褐素对理化因素耐受性较强,对多种抗生素耐药4.微生物检验检

4、验程序鉴定药物敏感性试验按NCCLS(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards)推荐,分为4组:A,B,C,D二、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)1.临床意义:铜绿假单胞菌在自然界分布较为广泛,因此很容易污染器械而造成感染机会致病机制粘附素:粘附结构成分多糖似荚膜物质毒素内毒素:LPS毒力因子外毒素:A阻止真核细胞蛋白质合成S干扰吞噬杀菌作用绿脓素:具有氧化还原活性,催化超氧化物和过氧化氢产生有毒基团酶类弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶(Las-A)降解弹性锌金属蛋白酶(Las-B)蛋白磷脂酶C:分解脂质和卵磷脂,

5、损伤组织细胞2.生物学特性革兰阴性,长短不一单鞭毛生长温度25~42℃氧化酶阳性还原硝酸盐、分解尿素、精氨酸酶阳性(1)分离培养与鉴定:标本可接种于血琼脂平板培养基和选择性培养基鉴定根据镜下特征、菌落形态、生化反应等3.微生物检验(检验程序)铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)血平板上毛玻璃样,金属光泽,生姜味可产生多种色素:荧光素与绿脓素铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)绿脓素铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)(2)抗原检测:血清学分型、噬菌体分型(3)核酸检测:质粒指纹图分析、脉冲场凝胶电泳分析(PFGEpulsedfieldgelelectrop

6、horesis)、基因芯片、PCR技术、16SrDNA分型鉴定技术铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)检验结果分析与报告:诊断一定要与临床表现相结合治疗过程中,3-4天后重复药敏测试耐药机制:①产酶:金属酶,OXA酶②外膜蛋白的改变(Outermembraneproteins,OMP)为主要机制③主动泵出机制:对喹诺酮类,MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-Oprj④整合子:1类,3类铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)三、马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌属于rRNA第II群鼻疽病与类鼻疽病的病原体2004年NCCLs称为可能成为生物恐怖的细

7、菌马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌两菌均人兽共患病原菌人类感染是经伤口、粘膜、呼吸道急性患者可有高热、衰竭等全身症状肺鼻疽病、皮肤鼻疽病、内脏脓肿、菌血症、脓毒血症临床意义生物学特性革兰阴性杆菌无芽胞、无荚膜伪马勒鼻伯克霍尔德菌一端有丛鞭毛(1~4根),4℃不能生长马勒鼻伯克霍尔德菌无鞭毛无动力,42℃不生长微生物检验分离培养与鉴定需氧菌生长温度35℃普通培养基、血琼脂、麦康凯生化鉴定荧光直接法染色镜检,可快速诊断四、嗜麦芽窄食单胞菌属于假单胞菌科的rRNA同源群Ⅴ嗜麦芽窄食单胞菌(S.maltophilia)和S.africana分类临床意义为

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