d-二聚体的临床应用及研究进展

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1、专家简介胡娟主任、教授、主任技师,医学硕士、管理学博士、研究生导师，在法国、美国、日本等国家留学和授课，美国芝加哥大学和法国巴黎大学客座教授。全军检验专委会病原组副主任委员全军医用标准物质专委会常务委员全军检验医学专业委员会常务委员成都军区临床医学检验中心主任成都军区检验专业委员会主任委员四川省医学检测专业委会主任委员四川省食品和药品监督管理局专家实验医学的发展向两极分化大型、高效率、自动化仪器、快速度、高通量、系列化模块式组合流水线工作站（Automaton）PC、LIS-高精密度实验室计算机管理-高精确性数据传送系统-高效率化诊疗依据小型、简单化、报告即时性、快节奏

2、、低要求、个体化仪器体积小缩短周转时间（Point-of-caretesting）急诊、门诊、手术、监护、床旁服务、非诊疗依据基础医学临床医学预防医学生物医学信息技术工程技术飞速发展促进、支撑实验医学快速进步先进实验技术现代分析仪器实验室临　床病　因　分　析治疗方　案矛盾大为突出之间桥梁急需检验医师完成分析数据信息诊断临床型科研型POC医护其他D-D概述检测方法临床应用研究进展PlasminD-Dimer现代检验医学用先进的技术方法，为临床提供早期诊断治疗和评估监测的依据。循证医学EBM证据：诊断、治疗、评估、监测、预防等。因此：检验医学的重要任务之一1、提供新的理论2

3、、发现新的证据3、建立新的方法研究、生产、整合技术应用于临床不断完善和进步的过程！特点1︰新的分析技术和研究目标需要多学科—基础、临床、预防、统计等医学多部门—行政管理、知识产权、监管机构多技术—工程学、信息学、卫生学、环境是一项系统工程支撑下完成的工作特点2︰应用领域不断扩展生物芯片疾病预防（耳聋）药物开发个体治疗（差异）疾病预防（优生）疾病预防（耳聋）国家安全太空探索农业育种环境监测食品安全特点3：参考体系的建立，是我们必须应对新的变革和跃迁。溯源传递，国家参考品，参考实验室，准确、通用。检验医学为临床提供的检测结果﹙简单概括﹚分为四种：1、未知物质的未知功能2、未

4、知物质的已知功能3、已知物质的已知功能4、已知物质的未知功能3、D-二聚体一、D-二聚体的概述内源凝血外源凝血凝血酶交联的纤维蛋白降解产物(FbDPs）交联的纤维蛋白纤维蛋白原降解产物(FgDPs)纤维蛋白原纤溶酶纤维蛋白的单体FPA、FPBFXIIIa凝血酶血浆D—D含量变化鉴别指标体内凝血状态原发性与继发性纤溶ELISA免疫渗透法乳胶凝集法D-D测定方法10种方法全自动血凝检测仪半自动血凝检测仪免疫比浊免疫荧光二、测定方法的原理A.乳胶凝集法被检血浆中D-二聚体与包被在乳胶颗粒上的单克隆抗体相作用，产生絮状沉淀反应。方法经典︰1983年Rylatt、1986年Elm

5、s、第一株DD单克隆抗体第一次吸附在乳胶颗粒上B.ELISA采用2个针对D-二聚体的单抗建立的,以抗原为中心，2种抗体夹心法，并加入辣根过氧化酶的底物以作显色反应1983年Rylatt和Elms建立了双抗夹心ELISAC.免疫渗滤法﹙挪威﹚将抗DD单克隆抗体包被于测试卡上,血浆由加样孔加入,膜中抗体捕获标本中的DD,洗涤后加入胶体金标记的DD单克隆抗体,与被捕获的DD分子结合而显红色,其显色程度与含DD量成正比,经标准卡比对或用专门检测计测量可定量测定DD含量。㈠三种方法不同的特点乳胶凝集试验简便快捷,适用于急诊检验。只能定性，半定量，敏感性低。常用于S查，半定量结果不

6、理想。ELISA法敏感精确、速度比较快，可定量分析,常用于成批检测。但操作繁琐、要求较高，不能满足急诊检验需要。胶体金免疫渗滤试验则结合了上述2种方法的优势,简单、快速、特异性好，能定量、单个标本均可随时检测。满足急诊检验需要。㈡不同方法的特点1、全自动和半自动血凝检测仪,使D—D检测结果更加精密、准确，特异，具良好的线性关系。但不适合对D—D过高的样本直接检测！会出现阴性结果2.在仪器上有必要设置预稀释程序及预稀释标准曲线、编程时设定两个D—D实验程序，增加一个生理盐水试剂位。荧光抗体检测法法国梅里埃公司VIDASDD在VIDA免疫分析仪进行，是在酶免疫法基础上与荧光

7、检测相结合，利用现成的单剂量试剂和分析仪中储存的校准系统，对单份样本进行检测。VIDASDD是目前研究最多的检测技术，敏感性高，与经典的ELISA有很好的一致性。对DVT的敏感性和NPV分别是96≈9995≈99相比较缺点为︰速度慢，抽血后离心15分钟，用纸条吸入血浆后，所有步骤由仪器完成，大约35分钟。适合单人检测，不适合大样本。日本SysmexCA-1500全自动血凝仪日本SysmexCA-500半自动血凝仪德国BE公司RackRatar自动血凝仪美国BeckmanCoulter7000全自动生化仪意大利亚特斯全自动酶免分析仪三、D-