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《一种新型聚乙二醇化重组人生长激素的制备及性质考察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第27卷第10期沈阳药科大学学报Vol27No102010年10月JournalofShenyangPharmaceuticalUniversityOc.t2010p767文章编号:10062858(2010)10084405一种新型聚乙二醇化重组人生长激素的制备及性质考察1,222221郭凝,杨仲璠,王俊玲,吴彦卓,徐明波,张景海(1沈阳药科大学生命科学与生物制药学院,辽宁沈阳110016;2北京双鹭药业股份有限公司,北京100041)摘要:目的制备一种新型聚乙二醇化重组人生长激
2、素(PEG(rhGH)2),并对其理化性质及药理作4用进行研究。方法以分子质量为210u的聚乙二醇二丙醛(PEG(ALD)2)对重组人生长激素(rhGH)进行修饰,采用SephacrylS200凝胶过滤色谱、QSepharoseFF离子交换色谱对修饰产物进行分离纯化,SDSPAGE鉴定各组分,通过SECHPLC、IEF、MALDITOFMS等方法对目标产物进行分析,并采用去脑垂体大鼠模型研究其体内生物活性与长效作用。结果获得了一种新型聚乙二醇化重组人生长激素(PEG(rhGH)2)。其纯度质量分数
3、达到97%以上,等电点为527,分子质量为46610u。与未修饰的rhGH相比,PEG(rhGH)2具有高效、长效的促进机体生长的药理作用。结论新型聚乙二醇化重组人生长激素PEG(rhGH)2是一种具有开发前景的长效蛋白质药物,值得进一步深入研究。关键词:重组人生长激素;聚乙二醇二丙醛;化学修饰;纯化;长效中图分类号:Q575文献标志码:A[6]人生长激素(humangrowthhormone,hGH)是二醇。末端醛基与蛋白以CN键相连,在体[7]人脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的重要激素,具有内稳定
4、性好,不发生水解;可以通过在PEG两促进人体生长发育和维持组织器官功能的生物功端连接同样的蛋白质药物来制备复合物,药物的能,临床主要用于治疗儿童的身材矮小症,同时也分子质量显著增大,延长半衰期,而且有助于提高[1-2][8]广泛用于损伤、严重烧伤的手术及后续治疗。该蛋白质药物的体内活性。虽然rhGH临床应用广泛,但由于其在体内的半衰期作者利用PEG(ALD)2修饰rhGH,通过适当短,需要每日注射,限制其广泛使用。解决这一问题的修饰反应条件及纯化方法,获得了一种新型聚目前较为理想的方法是用聚乙二醇(polyeth
5、ylene乙二醇化重组人生长激素(PEG(rhGH)2),并对[3-4]glyco,lPEG)对其进行分子修饰。其理化性质及药理作用进行了初步研究,为该物最早有关PEG修饰rhGH的文献报道源自美质的进一步研究和评价奠定了基础。[5]国Genentech公司的研究,后来相继有一些关1仪器与材料于用PEG的衍生物对rhGH进行化学修饰的报道,虽然所使用的方法和PEG的衍生物不同,但8823B紫外检测仪(北京宾达英创科技有限结果都不甚理想。主要存在的问题是:在形成公司),Model111MiNiIEFcell(美
6、国BioRAD公PEG化rhGH时所用的某些连接键可能在体内水司),DYY6B稳压稳流电泳仪(北京市六一仪器解断裂,造成稳定性差;PEG的结合使rhGH的生厂),Agilent1100高效液相色谱仪(美国Agilent公物活性降低,需要增加剂量来补偿;生产工艺复司),TSKGELG3000SWxL色谱柱(78mm300杂,质量难以控制,难以大规模生产。mm,5m)(日本TOSOH公司),TS-8脱色摇床聚乙二醇二丙醛(PEG(ALD)2)是在PEG(江苏海门其林医用仪器厂),SephacrylS20
7、0、Q链的两端各有1个丙醛基,属于同端基遥爪聚乙SepharoseFF(美国GE公司)。收稿日期:20100308基金项目:国家重大科技专项基金资助项目(2008ZX09401)作者简介:郭凝(1986),女(汉族),黑龙江伊春人,硕士研究生,Emailguoningfriend@163.com;吴彦卓(1972),男(汉族),黑龙江庆安人,副研究员,博士,主要从事基因工程药物研究,Te.l01088799570,Emailyanzhuowu@163.com;张景海(1962),男(汉族),辽宁丹东
8、人,教授,博士,主要从事生物化学药物研究,Tel.02423986431,Emailjinghaizhang2000@yahoo.com.cn。第10期郭凝等:一种新型聚乙二醇化重组人生长激素的制备及性质考察845聚乙二醇二丙醛(PEG(ALD)2,分子质量SephacrylS200色谱柱,这一步的纯化主要除掉4210u,北京键凯科技有限公司),
