Smad3基因剔除致骨关节炎小鼠血清蛋白质组双向凝胶电泳分析

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1、!"卷#期生物工程学报’()*!"+(*#$%%$年&月!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12,-).$%%$!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!"#$!基因剔除致骨关节炎小鼠血清蛋白质组双向凝胶电泳分析!!"$$$!郝振明杨晓应万涛王杰钱小红黄翠芬（!军事医学科学院生物工程研究所发育和疾病遗传学研究室北京!%%%&!）（$军事医学科学院国家生物医学分析中心北京!%%"2%）摘要34+51基因剔除导致小鼠骨关节炎。为了进一步深入研究34+51基因缺失导致骨关节炎形成的分子机制

2、，寻找骨关节炎发生早期的分子变化。用双向电泳技术结合肽质量指纹谱技术对34+51基因剔除小鼠和野生型小鼠血清蛋白质组进行了初步分析。对其中&个表达差异蛋白质进行了鉴定，并探讨了所鉴定蛋白质与骨关节炎发生的关系。为揭示36781介导的5BC/!信号在骨骼发育中的重要作用提供了线索。关键词基因剔除，DE3F1，$/F7，GEC中图分类号H2!文献标识码3文章编号!%%%/1%4（!$%%$）%#/%#2$/%2骨关节炎（IJK6(9LKML:K:J）又称退行性骨关节病，分装于灭菌的离心管中，R&%S冻存。是一种最常见的非炎性滑膜关节病。骨关节炎以退"#$小鼠血清中蛋白质浓度的定量行性关节软

3、骨缺失伴随着关节软骨异常修复及软骨用%T0N的+9U)溶液对小鼠血清做2%倍稀释，［!］下骨重建为特征，它的发生与年龄密切相关，4%N用G:6L@6公司的VU3/$%%蛋白质分析试剂盒测定蛋O0%N的42岁以上的人均患有各种程度的关节炎。白质浓度。用酶联检测仪在#0$<8和41%<8双波骨关节炎的发展会导致关节僵硬、疼痛以至最后失长测定吸光值。两种基因型小鼠血清蛋白质各取去功能。骨关节炎发现时关节已发生了几乎是不可2%%"=用于双向电泳。逆转的显著退变且至今尚无有效的治疗方法，因此"#!小鼠血清的双向电泳研究骨关节炎的致病机制对于该病的早期诊断、预"#!#"第一向固相WX梯度等电聚焦：

4、分别取YPY%9"P%9"防及治疗具有重要的意义。34+51、34+51基因型小鼠血清!%T1"Q、34+51基因剔除导致关节软骨丧失了对5BC/!0T&"Q，含蛋白质总量均为2%%"=，用386LJM98GM9L/信号的反应，引起软骨细胞分化异常，结果产生与人89@:9V:(K6@M公司的等电聚焦设备ZGBWM(L，胶条WX类骨关节炎相似的退行性病变［$，1］。为了研究范围为线性1O!%，!"@8，采用胶内泡涨方法，样品和泡涨液（尿素"8()PQ，UX3GD$N，痕量溴酚蓝）共34+51基因剔除后血清中蛋白质表达谱的变化，我们用双向电泳技术结合肽质量指纹谱技术对34+5112%"Q。

5、其中各加还原剂F55至$%88()PQ，ZGB基因剔除小鼠血清进行了初步分析，以期找出差异A-[[6L至%T2N。等电聚焦条件如表!。表"%&’()*+等电聚焦系统中固相干胶条%,-参数表达的蛋白质并进行研究。这些蛋白质可能为骨关./012"%,-(/+/3242+5*6733*0717829+:54+7(节炎的诊断和治疗提供有益的线索。78%&’()*+%,-5:5423"材料和方法’()K/M(-LJDK6W-L9K:(

6、O10日龄34+51%9"P%9"小鼠及其同窝野生]6M.L9K:(<1%!"%4DK6W/

7、4/!%/41"0201&；7/89:)：;9<=>?<:@*A8:*9@*@