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《三氯乙烯对脂质体膜通透性的影响及其破膜效应》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、.第3卷第3期Vol3No生物物理学报1987。月ACTABIOPHYSICASINICASePt1987年三氯乙烯对脂质体膜通透性的影响及其破膜效应张志鸿唐莉刘宏志(复旦大学生物物理教研室)摘要本文通过测定脂质体膜对水的通透性及脂质体对被包裹血红蛋白的释放率,研究了三氯乙烯对脂质体的作用.观察到在低浓度时,三氯乙烯能增加蛋卵磷脂脂质体的通透性,随着浓度的增加有破膜释放的效应。引言,:;。rrest【2,近几年人们对脂质体膜H相的非双分子层结构予以相当的关注川Fo等用“‘一:。PNMR波谱法证实了三氯乙烯能引起蛋卵磷脂(EPC)脂质体的Hl相的产生本文据此、。
2、进一步研究这种膜结构变化对膜通透性对脂质体内包裹分子释放特性等的影响材料和方法、一试剂。。EPC系上海禽蛋二厂产品二豆落酞磷脂酞胆碱(DMPc)购自Sigma公司红细胞,。。。系健康人的代浆红细胞来自上海市中心血站三氯乙烯(AR)为北京化工厂产品、二膜对水分子通透性的测定「3’。,先制备EPc的多层脂质体当在脂质体悬浮液中加入蔗糖高渗液时脂质体即发生。。收缩依据体积收缩速率可比较膜对水分子的相对通透性我们采用一套微机实时处理系「‘,。测,统进行测定和记录定三氯乙烯效应时先使药物和脂质体充分搅拌混合后作用n,。3omi再作测定、三膜对Hb释放率的洲定e‘”,。,
3、按Szbeni等方法从人红细胞中提取Hb并制备包裹Hb的脂质体取3ml悬浮液加15,,,,入拌l不同浓度三氯乙烯的乙醇溶液室温下振荡30垃in然后24000xg离心smin得,。ron.,上清液称为溶液(i)沉淀中加入TitX一00(终浓度008%)60oC水浴温育,。nsmin呈透明称为溶液(2)测定溶液(1)与溶液(2)在414m波长处的光密度。.:、.。:。:..:。.,..2(0D)(OD)膜对Hb的释放率定义为(OD)/〔(OD)+(OD)〕、四光做射的侧定。,用光散射强度的参数能灵敏地检测悬浮液中脂质体大小的变化实验中于2ml脂质体268生物物理学
4、报198了年。悬浮液中注入1。川不同浓度的三氯乙烯乙醇溶液在日立850型荧光分光光度计久=40n。。,处测定散射强度样品室经改装后能使样品杯中悬浮液始终处于磁力搅拌的状态而且配。有循环水以控制样品杯温度结果和讨论、一三级乙漪对脂质休腆的水通透性的彩响,一般v‘“’,渗透收缩时用脂质体体积收缩速率来比较膜对水的通透性..__d(l/A)/dt_1△A,二匕~~口一。。1/A—A—△t,。。。,式中A是光密度A是渗透收缩起始的光密度图1是测定结果可见随着三氯乙烯浓,。:,度的增加EPC膜的通透性也增大当三氯乙烯/EPC>41(克分子比)时脂质体的渗,一“”。‘“,
5、,透收缩现象消失表明膜已有泄漏的孔道或破裂用制备大型脂质体的方法我。们在相差显微镜下确实看到高浓度三氯乙烯时脂质体的碎片·甲一。一。。.eetotoroeteneFig1Efffriehlhvlont五ewaterpermeabilityofEpcrooroeenem01oso.OTlh王Lhyl左PC(ol加)1iPmesTemPeraturewas24C、二三抓乙烯对包襄Hb脂质体的Hb释放效应。,脂质体对Hb的包裹率定义为Hb被包入脂质体内部水相的百分率本实验中对EPCDMPC,3。3%、脂质体及脂质体包裹率分别为.。,21%Hb的包裹量(Hb(g)/磷
6、脂(g))对NT刁户尸们。。c叨欲习一.,.。EpC脂质体为22对pMpC为09单纯脂质,Hb的体及加乙醇的对照组同样实验条件下对4。2。,释放率分别为3.4%及%三氯乙烯作用后,。则大大促进了Hb的释放结果见图2图中纵Hb,即轴表示的净释放率去除溶剂(乙醇)效。,,应的释放率可见对于EPC脂质体三氯乙烯EPC:l,;,1/超过5时释放量急剧增加而当约15,。之后达最大释放Hb最大释放未达100%的一‘r王·,、‘oth‘d个原因可能是Hb和膜磷脂极性头部的相互作用一丫众言呈%舌挥〔7]Fig.2Effeetoftriehloroet五ylene为了探明通透性
7、增加及破膜释放Hb是否完全onteemoonreeaseoh五glbilfEPC,,,·是由于H相形成的结果我们用DMPC脂质体作1iPosomesandDMpCliP000mos()。DMPC“”O,resPeetively了对比实验分子的两条尾巴皆是饱和()第3期三氯乙烯对脂质体膜通透性的影响及其破膜效应26。,,::。,的烃链按照其分子堆积特性难以形成H相川但Hb的释放实验表明较低浓度._(48:1)一二氯乙烯作用后,同样能引起DMPCHb的释放,EPc脂质体内而且效应还较的大(图。,:2)结合这些事实可以提出这样的解释当疏水性的三氯乙烯小分子进入膜的疏
8、水区,、、,域时使DMPC脂质体双分子
