毕业论文--一株黑蛋巢真菌的培养及其代谢产物研究

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1、中文摘要粪生黑蛋巢菌（Cyathusstercoreus(Schw.)deToni）是四川黑蛋巢菌（GyromitraxinjiangensisCao,FanetLiusp.nov.）的一个分支，属于黑蛋巢菌属真菌（Cyathus）。以前的报道大多针对黑蛋巢菌属别的种真菌，而本文研究的这种粪生黑蛋巢菌次生代谢产物的相关研究报道较少，因此有很大的研究空间。本实验以这种粪生黑蛋巢菌为实验材料，对其进行固体发酵培养，提取得到丙酮粗提物，根据TLC薄层色谱跟踪分析，通过硅胶，凝胶，和反相柱层析等色谱分离方法，分离

2、特异性化合物。通过质谱，1H-NMR、13C-NMR、DEPT等核磁共振这些波谱手段，对分离纯化得到的单体化合物，进行结构鉴定。最后我们从这种粪生黑蛋巢菌的丙酮粗提物中分离到2种化合物，通过波谱研究技术并参考相关文献和数据库，鉴定这两种化合物分别是：麦角甾醇和2-non-1-enyl-1H-quinolin-4-one，这两种已知化合物在这种粪生黑蛋巢菌中是首次被分离得到。关键词：粪生黑蛋巢真菌，代谢产物，培养提取，色谱分离，波谱鉴定ABSTRACTCyathusstercoreus(Schw.)DeTo

3、niisabranchofGyromitraxinjiangensisCao,FanetLiusp.NovwhichbelongingtothegenusCyathus.Itlookslikeablackbirdwithblackeggsnest,andiswidelydistributedinourcountry.Inthisexperiment,thefermentedCyathuswasusedastheexperimentalmaterial,andthecrudeacetoneextractfr

4、omsolidfermentationmediawasharvestedforfurtherisolation.CombinedwithTLCthinlayerchromatography，thespecificcompoundscanbetracedandseparatedbythemeansofchromatographicmethodssuchassilicagelcolumn,reversed-phaseRp-C18columnandSephadexLH-20.Thepurecompoundswe

5、reelucidatedbymeansofspectroscopictechniquesincludingmassspectrometryaswellasnuclearmagneticresonance（1H-NMR、13C-NMR、DEPT）.Finally,weisolatedtwocompoundsfromthecrudeacetoneextractoftheCyathus.Thecompoundswereidentifiedbyspectroscopyandtherelatedliterature

6、anddatabase.Thetwocompoundswere:ergosteroland2-non-1-enyl-1H-quinolin-4-one,anditisthefirsttimethatthesetwocompoundshavebeenisolatedfromthisCyathus.Keywords:Cyathus,secondarymetabolite,extractionandseparation,structureidentification目录前言1第一节黑蛋巢菌及其次生代谢产物的研究

7、现状1第二节论文研究背景6第三节论文研究思路与方法6第一章一株黑蛋巢真菌的培养发酵9第一节相关材料9第二节实验方法9第三节实验结果10第二章黑蛋巢真菌发酵产物的提取11第一节相关材料11第二节实验方法11第三节结果分析12第三章黑蛋巢真菌丙酮粗提物的分离纯化13第一节相关材料13第二节实验方法13第三节结果分析17第四章分离化合物的结构鉴定结果18第一节化合物D-1结构鉴定结果18第二节化合物D-2结构鉴定结果19第五章结果与讨论21第一节实验结果21第二节讨论21致谢23参考文献24前言第一节黑蛋巢菌及

8、其次生代谢产物的研究现状1.1黑蛋巢菌的研究现状。真菌是菌物中类别最多的一类，也是形态差异最大的一类。根据统计，世界上可能有15000种真菌，可供食用的约2000种，这之中有药用价值的约650种(RaiMetal.2005)。而其种类的多样性，决定了其代谢产物的多样性，而化合物的多样性决定了其生物活性多样性。目前已经有多种具有生物活性的化合物例如生物碱，萜类，甾醇，多糖等从真菌中被发现，它们具有抗炎，抗肿瘤，抗衰老等生理功效(