实验五从番茄酱中提取番茄红素和beta胡萝卜素

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1、实验五：从番茄酱中提取番茄红素和-胡萝卜素实验目的学习从固体中萃取有机化合物的方法学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理。学习点样，展开和计算Rf值的方法天然产物中有机成分的提取方法浸取法：选用合适的溶剂，根据相似相溶原理，直接把溶剂加到固体样品上加热回流提取，本次试验就用的是此法。平时熬中药也是使用该方法。用水煮中药就是把中药的有效成分提取出来。水蒸汽蒸馏法：天然动植物中含有一些较易挥发的成分。利用水蒸汽可以把这些物质蒸出提取。天然的很多香料的提取（如橙油的提取）就是用的此法。连续提取法：原理同第一种方法，但是使用了一种特殊的装置—索氏提取器。使用少量的溶剂

2、能重复用来浸取达到浓缩的目的。如：茶叶种咖啡因的提取就是用此法。加热回流装置图两种化合物的结构本实验中薄板层析的爬板色谱法包括薄层法、柱色谱、纸色谱、气相色谱和液相色谱，本学期只作薄层色谱。色谱法是分离和鉴定有机化合物的常用方法。原理：利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解度不同，即在两相间中分配系数的不同而使各组分分开。特点：时间短，分离效果好，需要样品量少。适用于在较高温度下容易发生化学变化的化合物。1.薄层色谱法事先准备：用铅笔和尺子轻轻画出起始线和终止线；点样：用直径1mm的平头毛细管点取提取物，先在废纸上点一下（快速），然后在起始线线上少量多次地点样（保

3、证一定浓度，一般需要50次以上）。待溶剂挥发以后，轻放到装好展开剂的展开缸内，不要让展开剂溅起或倾斜。展开（爬板）：当展开剂爬到终止线时，停止爬行，取出。因为-胡萝卜素（黄点）易挥发，所以要尽快画出黄点的位置；Rf值的计算：分离效果好时Rf应为0.15~0.7意义：定性鉴定，监测化学反应等。点样：再薄板一端10mm（下）及另一端5mm（上）处用铅笔轻轻画一道痕迹，用直径小于1mm的毛细管（平口）点样，点样时样点一定要小，可重复再一点上点几次，使样品点小而又有一定的浓度，一块板上可以点两点；展开剂的选择：根据样品的极性而定，极性大的化合物可选用极性较大的展开剂。为

4、达到较好的分离效果，可用混合溶剂。做多次展开后可确定一合适的配比。展开时，至溶剂前沿离板顶5mm停止。显示方法：A)有色化合物可直接观察；B)无色的，用显色剂显色，如碘熏法；紫外光显色，用硅胶GF254，有样品点的位置再紫外灯光照射下发暗。Rf值计算公式：Rf=溶剂的最高浓度中心溶剂前沿至原点中心的距离。注意事项本次实验使用95％乙醇和石油醚提取。两种混合后用NaCl水溶液洗涤。乙醇主要进入水相，建议水相不要弃去。点样时在一块板上点两点：一为有机相，一为水相。观察比较有何不同。展开剂的配比一定要控制为石油醚:丙酮=9:1。否则分离效果不太好。同时可以做一个比较，

5、采用12:1。在混合展开剂中丙酮的极性大于石油醚，因此如果丙酮含量增大，极性增大，使得分离效果很差。如果增加石油醚的含量，使展开剂的极性变小，分离效果较好观察：如果红点紧追黄点，且Rf>0.75，则要增加石油醚的用量如达到12:1。注意事项（II）番茄红素为红色，-胡萝卜素为黄色，展开后的薄板放置一段时间后，样品颜色褪去。因为-胡萝卜素极易氧化，故在提取和展开过程中，注意不要敞开口，要用瓶盖盖住。番茄红素的双键比-胡萝卜素的双键多，因此番茄红素的极性大，在爬板时爬得慢，在下面。-胡萝卜素的极性小，爬得快，且易氧化。展开缸用后不要用水洗！薄板展开后临摹在实验

6、报告上，板用后洗干净放回窗台上地塑料筐内。要求在实验报告临摹一块走好的薄板—最理想的，如果第一块走的很好的话，就不用再走其他的板了。薄层层析在有机化学中的应用薄层层析在有机化学中有好多种用途，主要如下：1证实两个化合物相等；2测定混合物中组分的数目；3决定适用于柱层析分离用的溶剂；4监控柱层析分离；5检查柱层析、结晶或萃取所达到的分离的有效度；6监控一个反应的进程。薄层层析（TLC）的优缺点优点：只需使用少量物料，物料不浪费。用许多种显示法中，可以检测出少于十分之一微克（10-7克）的物料；另一方面，也可使用多达1mg的样品，使用尺寸大（边长9英寸），涂层相对较厚

7、（大于500微米）的制备性大板，往往一次就可能分离0.2~0.5g物料。主要缺点是不能用于挥发性的物料，因为它们会从板上挥发掉。薄层层析可以证实两个猜想等同的化合物事实上确实等同。只需将两个化合物并排地点在一块板上，然后将板展开。如果两个化合物在板上移动同样的距离，即有同一Rf值，它们就有可能是等同的。如果斑点的位置不一样，则这两个化合物肯定是不同的。重要的是将两个化合物点在同一块板上。薄层层析法可以用于证实一个化合物究竟是单纯物质还是混合物。不论板在展开时用何种溶剂，单纯的物质总是只给出一个点。另一方面，若用各种溶剂对一个混合物进行实验时，该混合物中组分的数目就

8、可以被确定