雌激素对SAMP8小鼠学习记忆及海马CA1区神经元的影响

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1、中文摘要雌激素对SAMP8小鼠学习记忆及海马CAl区神经元的影响摘要目的：应用SAMP8小鼠为研究对象，观察去卵巢及雌激素补充治疗对SAMP8小鼠学习记忆、海马神经元的影响以及对海马nNOS阳性神经元的作用。探讨雌激素改善学习记忆能力的机制，为雌激素补充治疗提供实验依据。方法：选用6月龄雌性SAMP8小鼠45只，随机分为假手术组(SHAM组)，去卵巢组(ovx组)an去卵巢+雌激素组(OVX+E组)3组各15只，另外再选取SAMRl(R1组)雌性小鼠15只作为SAMP8小鼠的同源正常对照组。SHAM组、R1组在暴露双侧卵巢后即缝合伤口，OVX组和OVX+E组行双侧卵巢切除术。术后OVX+

2、E组每3天肌注一次苯甲酸雌二醇5p∥只，其余各组均肌注等量的无菌芝麻油，共持续3个月。1．Morris水迷宫试验：给药结束后，将小鼠在水迷宫中适应环境1天。试验在每天上午进行。首先定位航行试验：将Morris水迷宫均分为4个象限，平台放入其中1个象限中。小鼠分别自4个象限面向池壁入水，视频采集系统跟踪并记录找到平台所需的时间。在第6天撤掉平台进行空间探索试验，记录小鼠120s内跨越平台的次数。2．透射电镜标本制备、观察：小鼠给予6％水合氯醛腹腔注射麻醉，经左心室．升主动脉插管，同时剪开右心耳，用生理盐水快速冲洗，用2％多聚甲醛．2％戊二醛混合固定液常中文摘要生理盐水快速冲洗，用2％多聚甲

3、醛．2％戊二醛混合固定液常规灌注固定，持续1h，取鼠脑海马CAl区组织块放入固定液中，经1％锇酸固定1．5h(4。C)、常规脱水、100％丙酮脱水、包埋液包埋、半薄切片定位锥体细胞层、超薄切片、重金属电子染色后用H．7500型透射电镜观察海马CAl区细胞超微结构并拍照。3．HE染色、免疫组化的观察：小鼠给予6％水合氯醛腹腔注射麻醉，经左心室．升主动脉插管，同时剪开右心耳，用生理盐水冲洗，4％多聚甲醛灌注lh。自上丘至视交叉节段取脑组织，制备二套石蜡切片，分别用于HE染色，抗nNOS免疫组化染色。4．流式细胞仪检测：将小鼠断头取脑，迅速于冰盘上剥离海马组织，于4℃70％乙醇中固定。采用网搓

4、法制备单细胞悬液，抗nNOS多克隆抗体孵育，流式细胞仪进行检测。结果：1．Morris水迷宫试验结果：定位航行试验：OVX组与SHAM组和OVX+E组相比明显延长(PO．05)，空间探索试验：OVX组的游泳轨迹主要呈随机分布状态，SHAM组和OVX+E组的游泳轨迹主要集中在原平台象限区域，且OVX组跨越平台次数少于SHAM组和OVX+E组，差别有统计学意义(PO．05)。2．HE染色观察结果：OVX组：CAl区细胞层次排列絮乱，细胞间隙增大，细胞数量明显

5、减少，大量锥体细胞空泡变及浓染。OVX+E组：CAl区细胞层次排列尚规整，细中文摘要胞间隙增大不明显，少量锥体细胞浓染。SHAM组：CAl区锥体细胞病变情况与OVX+E组基本相同。R1组：CAl锥体细胞层次清楚，排列整齐紧密均匀，细胞结构完整，核仁清晰可见。·3．透射电镜观察结果：OVX组：CAl区大部分锥体细胞核膜结构模糊不清，染色质边集以及大量脂褐素颗粒沉积，线粒体肿胀明显。OVX+E组：CAl区多数锥体细胞结构较完整，核仁明显，染色质分布均匀，线粒体大小及形态正常，个别细胞可见核膜双层结构不清晰和染色质边际现象以及少量脂褐素颗粒沉积。SHAM组与OVX+E组情况基本一致。R1组：C

6、Al区锥体细胞结构完整，核膜双层结构清晰可见，核仁明显，染色质分布均匀，胞质粗面内质网、高尔基体和核糖体等细胞器结构完好，线粒体大小及形态正常。4．免疫组化试验观察结果：OVX组阳性神经元数量及光密度值明显低于SHAM组和OVX+E组(P0．05)。5．流式细胞术检测结果：流式细胞术检测nNOSFI值结果表明，OVX组低于SHAM组和OVX+E组，差别有统计学意义(PO．05)。结论：1．SAMP8小鼠去卵巢后，雌激素的缺乏导致学习记忆能力下降；雌激素补充治疗

7、能减轻内源性雌激素下降对学习记忆功能的损害，改善学习记忆能力。2．SAMP8小鼠去卵巢后，雌激素缺乏导致海马神经元中文摘要排列疏松紊乱、细胞肿胀变性，细胞数目减少，超微结构受损；雌激素补充治疗能改善病理损伤，减少神经元的丢失。3．SAMP8小鼠去卵巢后，雌激素缺乏导致海马·CAl区nNOS阳性神经元减少；雌激素补充治疗能增加nNOS阳性神经元的表达。小鼠关键词：雌激素；海马；nNOS阿尔茨海默病；SAMP8英文摘要Effectsof