黄芩苷的提取和分离纯化

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1、专业资料姓名：黄冰专业：药化学号：2111140006黄芩中黄芩苷的提取和精制一、实验目的1掌握从黄芩中提取、精制黄芩苷的原理、方法及操作要点。2掌握黄芩苷的结构鉴定原理及方法。二、实验原理黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物,具有一定的脂溶性,所以在提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液作为提取液。黄芩苷为葡萄糖醛酸苷,具有弱酸性,其可在碱性溶液中溶解,形成钠盐,在提取液中加酸酸化，使黄芩苷游离析出。利用黄芩苷能溶于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质word完美格式专业资料分离，进行精制。本实验选用了60%乙醇回流提取，酸沉、碱溶、酸沉的方法进行精制

2、，并对精制品进行了简单的定性鉴别，没有对照品，所以没做定量实验。三、实验材料与仪器材料：黄芩干燥根，硅胶G薄层层析板仪器：UV2550紫外可见分光光度计（日本岛津），Spectrum100傅立叶红外光谱仪，旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），LXJ-Ⅱ离心沉淀机（上海医用分析仪器厂），200g摇摆式高速中药粉碎机，电子天平，循环水式真空泵，抽滤装置，圆底烧瓶（500ml），水浴锅，冷凝管，索氏提取器，层析缸试剂：2mol/L盐酸，60%乙醇，10%氢氧化钠，乙酸乙酯，甲醇，甲酸四、实验步骤1黄芩苷的提取将黄芩干燥根粉碎，称取粗粉100g，装入1L的圆

3、底烧瓶，加入4倍量即400ml的60%乙醇，搅拌均匀，90℃回流提取1h。提取完进行抽滤，将滤渣倒入圆底烧瓶中，加300ml60%乙醇继续回流30min，重复上一步再回流30min。合并3次滤液，65℃减压浓缩至无醇味，将水液水浴加热到80℃word完美格式专业资料，用2mol/L的盐酸调PH至1~2，保温30min，室温静置12h，沉淀，2000r/min离心2min，弃上清，向沉淀中加10倍水量即700ml，搅拌均匀，加10%氢氧化钠调PH至7，静置1h，2000r/min离心2min，弃沉淀，将上清液加热至40℃，搅拌均匀，加入等体积即700

4、ml的60%乙醇，静置1h，2000r/min离心2min，弃沉淀，将上清液水浴加热至80℃，用2mol/L的盐酸调PH至1~2，保温30min，室温静置1h，沉淀，离心，弃上清液，得粗黄芩苷湿重43g。2黄芩苷的精制向粗黄芩苷中加入7倍水量即300ml，水浴加热至70℃，10%氢氧化钠调PH至7，完全溶解后，用2mol/L的盐酸调PH至6，加乙醇至含醇量70%，未出现明显沉淀，所以没过滤，用2mol/L的盐酸调PH至1~2，70℃保温20min，静置过夜。次日，沉淀很少，又80℃保温30min，离心，弃上清，得精制品，向圆底烧瓶中加入约60倍量甲

5、醇，将精制品装入索氏提取器的滤纸中，加热回流至提取液颜色很浅，趁热抽滤，滤液减压浓缩一半，冷却，静置，结晶析出，静置30min，过滤，甲醇洗涤，得黄芩苷再精制品。用40倍量甲醇加热回流溶解，重复上述步骤可得黄芩苷重结晶。3黄芩苷的薄层层析吸附剂：硅胶G薄层层析板，厚0.25~0.3mm展开剂：乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水（7：2：0.5：0.5v/v/v）word完美格式专业资料样品配成合适浓度的甲醇液，用点样毛细管点样，每点一次要等到干了才能点下次，点样斑点直径不大于2mm。层析缸用展开剂饱和20min后，将点样板垂直放入层析缸，上行展开，展层完毕后

6、，取出，晾干，放在254nm紫外灯下观察。4黄芩苷的紫外吸收图谱取少量黄芩苷重结晶样品于50ml容量瓶中，加甲醇溶解至颜色微黄，用紫外分光光度计在200-400nm进行紫外扫描。5黄芩苷的红外吸收图谱精确称取0.100g的溴化钾，压片测红外作为背景，再精确称取0.100g的溴化钾，加入极少量样品一起研成细粉，压片，测红外吸收图谱。四、实验结果1黄芩苷得率(％)=M／M0x100％式中：M一所得黄芩苷精品重量M0一提取时用黄芩的重量本实验中M为0.132g，M0为100g，所以收率为0.132%。2薄层层析word完美格式专业资料3紫外光谱word完

7、美格式专业资料由下图可知在200-400nm内最大吸收波长为278nm，与文献中（上图）的标准品的最大吸收波长一致。4红外光谱word完美格式专业资料黄芩苷红外图谱3339cm-1，宽峰：-OH伸缩振动3030cm-1左右：苯环=CH伸缩振动2900cm-1：C-H伸缩振动1611、1575、1478、1450cm-1:苯环骨架振动word完美格式专业资料1736cm-1：C=O伸缩振动（葡萄糖醛酸）1667cm-1：C=O伸缩振动（吡喃酮环）1363cm-1：C-O伸缩振动1078cm-1:C-O-C的对称和不对称伸缩振动900~690cm-1多

8、个吸收峰：苯环取代四、讨论1由薄层板上的斑点可以看出虽然得到了一个比较明显的斑点，结合紫外图谱应该是黄芩苷，但是斑点上方有