番茄内生放线菌S73及其抗枯萎病活性物质的研究

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1、中山大学硕士学位论文番茄内生放线菌S73及其抗枯萎病活性物质的研究姓名：黄胜泉申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：周世宁2003.5.15黄胜泉中山大学硕士论文中文摘要本论文对一椿可菇抗梭彩穗萎病瘸舔滚——尖孢镰刀落静番蕊内生放线藩$73进行了研究。f7运用形态攀及16SrDNA序列分析的方法对内生放线菌$73进行了菌种鉴寇，结莱表裙该放线菌的形态特征、遗莽特征、生理象纯特征均与癔薅链霉蓉相吻合，且该放线菌的16SrDNA中的669bp核苷酸序列与链霉菌属的疮痂链霉楚(Streptomyces．scabies)肖100％的撩似性，因此可确定该放线麓为疮癫链霉藩(S．sca

2、bies)。通过对$73的生长和抗枯萎病物质的产生条件研究发现，该内嫩放线菌在七秘不弼的培赛藻中摇瓶培养10d后发现，在玉米耪荧氨粉培莽基巾产生最高的抗捂萎病病藏鼙活性，撺懿轰径这2lmm。而餍藏线蘑发酵塘养藜霹使$73发酵的生物量达到最大，达8．Img／ml。并发现使用PDB培养基及S培养基时可捻测戮较弱尖獭镰刀菌，两傻用高氏一号、离氏二号培赛基瓣发酵液捶提扬中均采检测到抗炎撒镰刀菌活髓。手通过氮源利用的正交试验和碳源及培养条件的单因子试验发现，$73在以麓萄耱为碳源辩，莹体生长鳋及抗桔萎瘸瘸原菌活性均缀意。丽氮源熬正交发酵条件实验发瑗以l％黄豆粉、l％玉米粉、0．1％蛋自腺

3、及0．1％酵母鬻为配比的黄嫒粉粉玉米粉培养基时发酵产物的尖孢镰刀菌最大，墩适产活性产物的培养漫凄为26℃。对发酵产物遴行分离纯化，最后得到矮抗尖孢镰刀菌活性的片状臼色结晶体，测其熔点为I17—119。C。对该物质进行红外光谱、紫外光谱、质谱及核磁共援氯谱等分析鼷苜穆出该锈矮：分子爨为281，酝较类纯合物，分子式为C16HzTN03。／”l另对该物质的稳定性及抗菌谱做了初步的了解，发现该物质对热，酸性环境及紫井线有较强抗蛙，孬对辕瞧巧境不稳定。徼抗菠谬实验发现该携矮薅缨菌类无抑制活能，而对茄丝核藩、绿色木霉、棉炭疽菌等植物病原真菌有抑制活性。，{』关键运：内擞放线蓥．番蒺凌生萤，

4、尖稳镰刀蔻绉萎瘸薹墼塞!垄查鲎璧主笙墨———————————————一StudiesoilEndophyticActinomycete$73IsolatedfromTomatoesandProductionofit'santi·fungalMetaboliteMajor：MicrobiologyName：HuangShengquanSupervisor：ProfessorZhouShiningABSTRACTAstrainofStreptomyces，designatedas$73，whichproducesmetabolitewithresistancetowiLtpatho

5、genfungus(Fusariumoxysproum)，wasStudied．Accordingtoitsculturemorphological，physiological，biochemicalcharacteristicsandanalysisofthe16SrDNA，strain$73wasidentifiedasStreptomycesscabies．Thestudiesonthegrowthofstrain$73andtheproductionconditionsofanti—Fusariumoxysproummetabolitebystrain$73exhibi

6、tedthatthehighestanti—Fusariumoxysproumactivitywasobservedwhenculturedincorn—soybeanpowderculturemedium．Whenasculturedinactinomycetefermentationmedium，thestrain$73reachedthehighestbiomass．Surprisinglytheextractof$73fermentationbrothdidn’tshowanti—fibsariumoxysproumactivitywhenculturedintheGa

7、o’SNo1；№2andSculturemedium．醣utilizationexperimentsofnitrogensourcesandcarbonsources，itWaSfoundthatthestrain$73showedhighbiomassandthe黄胜泉中山大学硕士论文highestanti—Fusariumoxysproumactivitywhenglucosewassuppliedascarbonsourceinthemediumcontaining1％soybeanp