氨茶碱对哮喘气道树突状细胞的作用机制及其临床意义的研究

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1、南京医科大学硕士学位论文氨茶碱对哮喘气道树突状细胞的作用机制及其临床意义的研究姓名：顾晓燕申请学位级别：硕士专业：呼吸内科指导教师：殷凯生20030401南京医科大学硕士学位论文中文摘要I目的ll研究不同浓度氨茶碱对哮喘小鼠气道树突状细胞(DC)的分布、密度的影响。2研究小剂量氨荼碱对粉尘螨诱导的哮喘小鼠气道炎症及树突状细胞(DC)的作用。3研究氨茶碱对人树突状细胞表面人类白细胞抗原．DR、CD83和CD80表达及白细胞介素．10分泌的影响，以进一步探讨小剂量氨茶碱治疗哮喘的作用机制。【方法】1BALB／c小鼠50只随机分为5组：①对照组，②哮喘组，④低剂量(20mg／kg)氨茶碱治疗

2、组，④中剂量(30mg／kg)氨茶碱治疗组，⑤高剂量(40mg／kg)氨茶碱治疗组。应用透射电镜及免疫组化间接法观察DC形态并检测小鼠气道DC密度。2BALB／c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组和氨茶碱(20mg／kg)治疗组。以临床常见变应原粉尘螨建立哮喘小鼠模型，采用免疫组织化学间接法及计算机图像分析方法比较各组小鼠气道DC的分布及密度改变，并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数，并用酶联免疫吸附法测定BALF申IL．5浓度。3通过粒细胞．巨噬细胞集落刺激因子(GM．CSF)、IL．4和肿瘤坏死因子“(TNF．d)体外共同培养体系，从人外周血单个核

3、细胞中获得DC，用流式细胞仪分析氨茶碱对DC细胞表面HLA．DR、CD83和CD80表达的影响，ELISA法测定IL．10浓度。、(【结果】1正常小鼠NLDC．145+DC主要分布于气管、支气管、肺泡、脏层胸膜及气管周围相关淋巴组织和血管周围，形成防御性DC网络。哮喘小鼠气道NLDC．145+DC密度(1720土130个／mm2)较正常对照组(600±20+／mm2)明显增多Q<0．02)，经过氨茶碱治疗后，低剂量茶碱组小鼠气道DC密度(8244-35个／ram2)较哮喘对照组明显下降(p<0．01)，而中剂量氨茶碱治疗组小鼠气道DC密度(15824-150个南京医科大学硕士学位论文／

4、mm21和高剂量氨荼碱治疗组小鼠气道DC密度(1684±167／卜／mm2)与哮喘对照组比无显著变化(p>0．05)，哮喘组及低剂量氨茶碱治疗组小鼠气道DC的分布与正常对照组相比无明显变化。2粉尘螨诱发哮喘后小鼠BALF中EOS计数[(3．29±1．38)x106／L]、IL一5水平[(25±5)pg／m1]均较正常组EOS计数[(0．05±0．01)x106／L]、IL一5水平[(6±3)pg／m1],显-著升高(P值分别<0．05和<0．01)，小鼠气道DC密度(1542±28个／mm2上皮面积)与正常组小鼠气道DC密度(600±20个／mm2上皮面积)比较差异有显著性(P<0．0

5、1)。小鼠经小剂量氨茶碱处理后气道DC密度、BALF中EOS计数和IL．5水平与哮喘组比较差异均具有显著，l!k(P值均<0．05)。3小剂量氨茶碱能上调DC表面CD83、CD80的表达，而下调HLA．DR的表达和抑制白细胞介素．10的分泌。∥【结论1l小剂量氨茶础抑制嗜酸性粒细胞为主的气道炎症、下调气道DC密度，但不影响DC在肺内的分布。2小剂量氨茶碱可能通过抑制DC表面HLA．DR表面分子的表达和白细胞介素．10的分泌而发挥其抗炎和免疫调节功能。【关键词J氨茶碱；哮喘；树突状细胞；粉尘螨；嗜酸性粒细胞：白细胞介素-5；人类白细胞抗原．DR；白细胞介素．102南京医科大学硕士学位论文

6、ABSTRACT[Objectives]1．ToinvestigatetheeffectofAminophylline。treatmentwiththreedifferentconcentrationonthedistributionanddensityofairwayintraepithelialdendriticCellsinmurineasthmamodels．2．ToinvestigatetheeffectoflowdoseofAminophyllineonairwayinflammationinducedbydermatophagoidesfarinaeandthedistr

7、ibutionanddensityofairwayintraepithelialdendriticcell(DC)inmurineasthmamodels．3．ToinvestigatetheeffectofAminophyllineontheexpressionsofHLA．DR．CD83．CD80andtheproductionofIL-10inhumandendriticcells．【Methods】1．FiftyBALB／cmousew