不同高温胁迫条件下的坛紫菜中植物激素分析

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1、第41卷第10期水产学报Vol.41,No.102017年10月JOURNALOFFISHERIESOFCHINAOct.,2017文章编号:1000-0615(2017)10-1578-10DOI:10.11964/jfc.20161010573不同高温胁迫条件下的坛紫菜中植物激素分析宋悦，崔晓山，陈娟娟，杨锐*，严小军(宁波大学海洋学院，浙江宁波315211)摘要：为了研究高温胁迫条件下内源性植物激素的变化趋势与坛紫菜在高温耐受性之间的相互关系，实验以在宁波象山采集的“浙东1号”坛紫菜叶状体为样

2、品，以液相色—谱质谱联用的选择离子模式作为分析手段，系统地分析了高温胁迫条件下，坛紫菜中11种植物激素含量的变化。结果显示，在高温胁迫环境中共检测出7种植物激素，分别为异戊烯腺苷、异戊烯腺嘌呤、反式玉米素核苷、吲哚乙酸、茉莉酸甲酯、水杨酸和茉莉酸。在20、25、28和35°C下，茉莉酸和茉莉酸甲酯的含量随着刺激温度的上升而升高；吲哚乙酸、反式玉米素核苷、异戊烯腺苷和异戊烯腺嘌呤在高温组中的含量要明显低于对照组，呈现下降的趋势。以28°C作为胁迫温度，在不同胁迫时间下，吲哚乙酸、反式玉米素核苷、异戊烯

3、腺苷和异戊烯腺嘌呤的含量随着胁迫时间的延长而降低；水杨酸和茉莉酸甲酯的含量随着胁迫时间的延长而上升；茉莉酸的含量先升高后下降。在恢复培养过程中，水杨酸、茉莉酸、吲哚乙酸和茉莉酸甲酯的含量均呈现下降、升高又下降的变化趋势，而反式玉米素核苷、异戊烯腺苷和异戊烯腺嘌呤的含量则随着恢复培养过程的进行而逐渐下降。高温胁迫下，坛紫菜在促进生长类激素和胁迫抑制类激素的共同调控下进行胁迫防御，维持自身生长。然而，坛紫菜的防御能力有限，且高温胁迫引起的藻体自损伤可能难以修复。关键词:坛紫菜；高温胁迫；植物激素；液质联

4、用中图分类号:Q945.78；S968.43+1文献标志码:A紫菜是目前世界上人工培养经济价值最高非生物的伤害后，植物激素在植物启动防御反的一类海藻，每年创造大量产值[1]。坛紫菜应的过程中也发挥着巨大的作用[11-13]。植物受到(Pyropiahaitanensis)是我国紫菜的2个主要栽培种逆境胁迫时，体内的激素发生变化，通过影响之一，是闽浙沿海海水养殖的主要对象，其产植物的生理生化活动来产生抵御胁迫的能力[14-15]。量占全国紫菜总产量的75%以上[2-3]。近年来随着植物激素不仅存在于高

5、等植物中，在低等的海全球气候变暖，每年9—10月，福建、浙江海域洋藻类中也具有多种生理作用,如调节藻体的生都会发生大幅度高温回暖及无风微浪天气，水长和组织器官分化，并在藻类逆境胁迫响应等温过高致使紫菜幼苗或成菜烂菜，造成坛紫菜过程中起着重要的作用[16-17]。针对藻类植物激素大面积欠收，部分地区甚至绝收，给养殖户造的种类及调控机制的研究虽然没有高等植物深成了巨额经济损失[4]。入，然而逆境条件下内源激素的变化与海藻的许多植物体内的内源激素调控着其自身代耐受性之间的相互关系也受到研究者越来越多谢的很

6、多方面[5-10]。当受到病原体侵染、害虫及的关注。其中，水杨酸、茉莉酸和吲哚乙酸等在动物的啃咬、干旱、温度及盐度胁迫等生物和海藻的逆境胁迫防御中均发挥着重要的作用[18-20]。收稿日期：2016-10-12修回日期：2017-03-17资助项目：国家星火计划项目(2015GA701027)；浙江省自然科学基金(LY17D060002)；浙江省科技厅公益项目(分析测试)(2016C37090)；宁波大学王宽诚幸福基金通信作者：杨锐，E-mail：yangrui@nbu.edu.cnhttp://w

7、ww.scxuebao.cn10期宋悦，等：不同高温胁迫条件下的坛紫菜中植物激素分析1579因此，研究高温胁迫条件下坛紫菜中植物激素箱保存，冷冻干燥后用液氮研磨。种类及含量的变化，有助于深入了解紫菜对胁迫1.3激素分析条件进行适应和应激的生理过程及机制。准确称取紫菜样品干燥粉末1g于50mL离心本研究以坛紫菜“浙东1号”为对象，分析不管中，加入10mL乙腈∶水∶甲酸(80∶19∶1)，同胁迫温度、时间以及恢复培养过程中常见植振荡1min，冰浴超声20min，置于–20°C过夜提物激素种类和含量的变化

8、，根据不同高温胁迫取16h，4°C下10000r/min离心10min，上清液转下植物激素响应的综合分析，探究高温胁迫下至旋蒸瓶，残渣再用10mL的乙腈∶水∶甲酸坛紫菜可能的激素调控机制，为提高产量、种(80∶19∶1)提取2次(振荡1min，冰浴超声20min，质培育和规模化养殖提供理论依据。–20°C提取20min，4°C离心10min)。合并上清液1材料与方法于旋蒸瓶中，旋转蒸发至干。加1mL含有10mmol/L乙酸铵的甲醇∶水∶乙酸(90∶10∶0.05)复溶