东海乌参蛋白肽的酶法制取及精制研究

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1、分类号：密级：单位代码：!鳗35学号：211三Q32洳≯j、暗硕士学位论文中文论文题目英文论文题目墨地盘Q坠宝翌幽垒至堑宝麴￡堂坠窑鲤．refutingofAcaudinaleucoproctaproteinpeptide．．．．．．．．提交日期至Q!垒生!且东海乌参蛋白肽的酶法制取及精制研究⑧jIIIIIIIIlUnllllllllllllIIIY2508653论文作者签名：二幸童日晦，一—一指导教师签名：论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4：委员5：．

2、堕皇塑壅盘豸垄重生砖五如答辩日期：型；·弓浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝鎏盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：童奄夸签字日期：驯争年今月乡日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解滥望盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁

3、盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权滥婆盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：。蓄前鸯签字日期：2u，争年乡月乡日浙江大学硕上学位论文致谢值此论文完结之时，我要由衷地向各位老师和同学表达无法言喻的深深谢意!没有他(她)们在我学习、工作、生活上给予的长期关心与支持，将不可能有今天这一值得铭记的时刻的到来。感谢导师冯凤琴教授在学习和研究过程中给予我的谆谆教诲和悉心指导。本论文是在导师冯凤琴教

4、授的悉心指导下完成的。从论文的选题、原料收集、试验设计到论文的撰写无不凝结着导师的心血和汗水。在两年半的研究生学习生涯中，导师渊博的知识、敏锐的洞察力、严谨热忱的工作作风令我受益匪浅，终生难忘，并将是我终身学习的榜样。在此，对导师冯凤琴教授两年多来对我学习和生活的关心和教育致以真挚的感谢和崇高的敬意!在本课题的研究中，受到了许多老师和同学的关心与帮助。感谢张希师姐、蔡海莺师兄、陶雪、韦伟、余立意、杨明、曹茜、余立意、李杨、李阳等实验室同学在实验过程中对我的帮助和生活上关心。非常感谢我的父母及家人对我读研期间的默默支持与

5、关心，是他们给予了我最大的勇气与毅力，使我在凼难与挫折面前坚定信念，祝福他们健康如意!最后，向论文评阅人和答辩委员会的所有专家、教授致以最衷心的感谢11童静静二零一四年一月于紫金港浙江大学硕士学位论文摘要摘要东海乌参(学名：白肛海地瓜Acaudinaleucoprocta)，营养价值与药用价值与北方刺参类似，蛋白质含量高，氨基酸种类丰富，脂肪含量低，是一种优质蛋白质资源，但致密坚硬的体表污垢层使得东海乌参中铅、砷等有害重金属严重超标，腥味重，难去除，阻碍了东海乌参的深度开发利用。针对此难题，本课题组进行了下列研究：利用

6、外源酶和有机酸结合除去重金属的东海乌参，通过表层微生物发酵法进行整体脱腥，进一步利用自溶与蛋白酶解技术获得高得率的东海乌参蛋白肽，并进行了东海乌参蛋白肽精制研究。表层微生物发酵法脱腥的结果显示：添加不同浓度的安琪酵母和面包酵母进行24h培养后，东海乌参的腥味物质均有不同程度的减少，其中，对腥味贡献较大的饱和醛的含量均减少了50％以上，壬醛和庚醛在添加107面包酵母的东海乌参中均未检出，说明脱腥效果良好。经单因素和多因素试验，得到的东海乌参蛋白肽酶解制备的优化工艺为：在p衅10、温度50℃条件下自溶3h，再加复合蛋白酶0

7、．4％(以新鲜东海鸟参干物质计)，在酶解温度60℃，底物浓度6％，进行90mm酶解。在此优化条件下，多肽得率为52．63％，产物中多肽含量(以干物质计)为0．6168g／lg干物质；经测定，酶解制得的东海鸟参蛋白肽的分子量集中在200．1000Da，为低聚肽，具有较好的吸收性：在乌参蛋白肽粉末中还含有2．87％的多糖及O．026％的皂苷；该制品羟基自由基清除率、超氧自由基清除率、ACE抑制活性的IC50(半数清除率或半抑制浓度)依次分别为10．994mg／mL、23．085mg／mL和O．423mg／mL；在DH}7时

8、．乌参蛋白肽溶解性最高，为99％，沸水浴30min对其溶解性影响不大。选用脱腥效果较好的DIl3型阳离子交换树脂进行了脱腥研究，得到的优化工艺为：pH=7，树脂添加量为6％，接触时间为1．5h，接触温度为35℃。优化工艺条件下，东海鸟参的酶解液中壬醛、己醛、庚醛含量依次从1．18％降低到0．62％，10．5％降低到5．12％，0．