2017_2018学年高中生物专题5dna和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增dna片段优化练习

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1、课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段一、选择题1．关于PCR的说法，不正确的是(　　)A．PCR是体外复制DNA的技术B．PCR过程中只需要一个模板DNA、两个引物分子、大量脱氧核苷酸原料C．TaqDNA聚合酶是一种热稳定的DNA聚合酶D．PCR利用的是DNA双链复制原理解析：PCR技术是一种在体外迅速扩增DNA片段的技术；PCR过程除需要DNA分子双链作为模板、两种引物分子、大量脱氧核苷酸原料外，还需要酶等条件；TaqDNA聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶；PCR技术的原理和DNA的复制原理是一样的，都是半保留复制。答案：B2．PCR技术控制DNA的解聚与结合是利用了DNA的(　　)A．特异性

2、　　　　　　　B．稳定性C．热变性D．多样性解析：DNA分子在80～100℃的温度范围内变性，双链解开成单链；当温度缓慢降低时，又能重新结合形成双链。答案：C3．PCR实验中用到微量离心管、缓冲液和蒸馏水，使用前必须进行的关键步骤是(　　)A．反复洗涤B．用酒精擦洗C．高压灭菌D．在－20℃保存解析：在PCR实验中，为了避免外源DNA等因素的污染，微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。同时也不能忽视其他操作步骤，如缓冲液和酶应该分装成小份，并且在－20℃保存。答案：C4．标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(　　)A．92℃、55℃、

3、72℃B．72℃、55℃、92℃C．55℃、92℃、72℃D．80℃、55℃、72℃解析：当温度上升到90℃以上(90～96℃)时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，称之为复性；当温度上升到72℃左右(70～75℃)时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在TaqDNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。答案：A5．如图所示为DNA变性和复性示意图，相关说法正确的是(　　)A．向左的过程为加热(80～100℃)变性的过程B．向右的过程是DNA双链迅速制冷复性C．变性与在生物体内解旋过程的实

4、质相同D．图中左侧DNA片段共有4个游离的磷酸基团、4个3′端解析：DNA体外的变性和体内的解旋，其实质是相同的，都是使氢键断裂，DNA双螺旋打开，只是体内解旋需要解旋酶，体外变性需高温条件。答案：C6．符合PCR反应条件的一项是(　　)①稳定的缓冲液环境　②DNA模板　③合成引物　④四种脱氧核苷酸　⑤TaqDNA聚合酶　⑥DNA解旋酶　⑦限制性核酸内切酶　⑧温控设备A．①②③④⑤⑥B．①②③④⑤⑥⑦⑧C．③④⑤⑥⑦⑧D．①②③④⑤⑧解析：PCR反应模拟生物细胞内DNA复制的条件，只是不需要解旋酶，也不需要基因工程的工具酶(限制性核酸内切酶)。答案：D7．PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪

5、器，它调控不同温度的目的是(　　)①95℃使DNA分子变性，失去生物活性②95℃使DNA分子变性，解开螺旋③55℃使DNA分子开始复制、延伸④55℃使DNA分子的两条单链分别与两种引物相结合⑤72℃使DNA分子开始复制、延伸⑥72℃使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性A．①③⑤B．②③⑤C．②④⑤D．②④⑥解析：PCR技术在温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋变为单链；当系统温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当系统温度上升到72℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、G、C、T)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。答案：C8．如图

6、表示PCR扩增的产物，请分析它是哪次循环的产物(　　)A．第一次循环B．第二次循环C．第三次循环D．第四次循环解析：在PCR反应中以引物为标记，第一次循环时，以加入的DNA为模板，两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合，并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以，形成的每个子代DNA中只有一种引物。从第二次循环开始，第一次产生的DNA分子又可作为模板参与反应，形成的DNA分子中，只有两个仅一端含有引物，其他DNA分子两端都含有引物。答案：A9．PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，下列说法不正确的是(　　)A．PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三

7、步B．PCR所用的解旋酶和DNA聚合酶都具有耐高温的特性C．延伸的温度大于复性的温度，而小于变性的温度D．PCR技术可用于基因诊断、判断亲缘关系等解析：PCR技术需要耐高温的DNA聚合酶，不需要解旋酶。答案：B10．关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法，正确的是(　　)A．TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发现的B．DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列C．TaqDNA聚合酶必须在每次高温变性处