丙戊酸诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化中对oct-4的影响

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1、学校代码10459学号或申请号上o;么12•峙屮密级a-Fr邶州k%硕士学位论文丙戊酸诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化中对Oct-4的影响作者姓名：靳久增导师姓名：刘宇学科门类:医学专业名称：神经病学培养院系：郑州大学第一附属医院完成时间：2015年3月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研宄所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担

2、。学位论文作者：曰期:年左月；^曰学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以釆用影印、缩印或者其他复制竽段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：^母日期《年左月g

3、日AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterEffectofvalproicacidonOct-4inRatbonemarrowmesenchymalstemcellsduringdifferentiationIntoneuronlikecellsByJiuzengJinsupervisor:LuLiuProf.neurologyTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMarch2015摘要丙戊酸诱导骨

4、髓间充质干细胞向神经样细胞分化中对Oct-4的影响硕士研究生:靳久增导师:刘宇郑州大学第一附属医院神经内科郑州450052摘要骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)是一种来源于骨髓的具有多向分化潜能的成体干细胞，它具有的特点包括：多向分化和自我更新的特性，骨髓间充质干细胞在一定的条件和刺激因子作用下，可以分化为神经元样细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、心肌细胞等。但是有关骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的调控机制的研究尚未取得突破性进展。有关研究实验表明，丙戊酸作为组蛋白

5、去乙酰化酶抑制剂，其能够抑制肿瘤细胞生长和干细胞分化，本研究实验应用组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸作为诱导剂，探索大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的过程中对Oct-4的影响。目的探讨丙戊酸诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成神经样细胞分化过程中对OCT-4的影响。方法体外分离SD大鼠骨髓间充质干细胞，将其分为两组：对照组，不加丙戊酸，细胞加入预诱导液（含1μmol/Lβ-ME，10%FBS的DMEM/F12）培养24小时，然后换诱导液（含200μmol/LBHA,2%DMSO的DMEM/F12）诱导5小时。实验I摘要组，诱导前12小

6、时，在细胞培养液中加入丙戊酸。用倒置相差显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学法检测NSE、GFAP、Oct-4蛋白的表达。Westernblot检测细胞内NSE及GFAP蛋白OCT4的表达。结果倒置显微镜下可以观察到骨髓间质干细胞呈纺锤状、椭圆形，诱导后出现突出，向周围伸出明显突起，呈现神经细胞样形态，并且实验组的细胞突起数量和长度多于对照组；Westernblot检测结果实验组的NSE、GFAP蛋白表达高于对照组，Oct-4蛋白的表达实验组高于对照组。结论丙戊酸能够具有诱导骨髓间充质干细胞分化成神经样细胞的能力，并且其增强了Oc

7、t-4在BMSCs体外定向诱导分化中的表达。关键词：丙戊酸；骨髓间充质干细胞(BMSCs)；Oct-4IIAbstractEffectofvalproicacidonOct-4inRatbonemarrowmesenchymalstemcellintoneuronlikecellduringdifferentiation.AbstractObjectiveToexploreeffectofValproicAcidonOct-4inRatbonemarrowmesenchymalstemcellsintoneuronlikece

8、llsduringdifferentiation.MethodsTheBMSCswereseparatedfromrat'sbonemarrowandculturedinvitro.Experimentgroupsweredividedintoexperimentalgrou