补阳还五汤诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化

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1、补阳还五汤诱导大鼠骨髓问充质干细胞向神经样细胞分化1TheadultratMSCscanbeculturedandproliferatedinvitro．TheratMSCs(rMSCs)prolifertatedtwicein3days；2Within1hourafterinduction，someoftheMSCsassumedneuronalmorphology．Afterinductionfor5hours，alargenumberofresponsivecellsexhibitedtypicalneuronal

2、morphology：clustersofMSCs·derivedneuronsofvaryingmorphologiesformcomplexnetwork；3Inthesham-operatedgroupsevendaysaftermodel，therewasasmallamountofNSE，GFAPdifferentiationinbraintissue．InModelgroup，NSE，GFAPdifferentiationwaslesstoo，andcomparedwiththeshamgroup，there

3、wasnosignificantdifference(P>0．05)．InTransplantiongroup，NSE，GFAPdifferentiationincreasedsignificantly,transplantationgroupandshamsurgerygroup，modelgroupcomparedtoaverysignificantdifference(尸

4、FAPsignificantlyincreased，withthesham—operatedgroup，modelgroupcomparedsignificantdifference(P

5、tbraindifierentiateintoneuron．1ikecellsandglialcells，theyhavecertainrepairingeffectonontheischemicinjury；3BuyanghuanWUDecoctioncanprolongthelivingtimeofMSC-derivedneuron．1ikecellsinvitro．KeyWords：Mesenchymalstemcell；Transplant；Cerebralischemia；Neuron-likecells；Bu

6、yanghuanWUDecoction．4．前言缺血性脑血管病是当今社会威胁人类健康的主要疾病，在疾病死亡率中排第3位，干细胞移植治疗是最近新兴起的有可能成为最有希望的缺血性脑血管病的治疗方法与手段⋯。骨髓间充质干细胞(bonemarrowstromalstemcells，BMSCs)具有跨胚层分化潜能，其在适宜条件下分化为神经细胞的结论肯定乜’31。BMSCs移植被认为是保护脑缺血损伤的有效手段，目前的相关研究报道渐多，但是有关中医药在BMSCs移植入体内后影响BMSCs保护脑缺血损伤作用的报道不多，有关中药复方在体内

7、的研究报道更为少见。益气活血方治疗缺血性脑血管疾病，其疗效的确切性勿庸质疑，中医认识到缺血性中风的发病是在气血阴阳亏虚的基础上，风、火、痰、瘀等多种因素影响人体，导致脏腑功能失调、气血逆乱于脑，脑脉痹阻、脑髓神机失用而产生的。气虚血瘀证是常见证型，益气活血法是治疗缺血性中风病的基本治法，补阳还五汤是益气活血法的代表方剂。本实验在大鼠脑缺血再灌注损伤模型的基础上，通过尾静脉移植MSCs到大鼠体内，应用益气活血方治疗后，通过观察MSCs表达神经元标记物一神经元特异性烯醇化酶(NSE)及表达胶质细胞标记物一胶质细胞酸性纤维蛋白

8、(GFAP)，探讨益气活血方联合MSCs移植对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及机制，为中药复方联合干细胞移植治疗神经系统的临床应用奠定实验基础。补阳还五汤诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化材料与方法1实验材料1．1主要试剂DMEM培养基GibcoBRL公司胎牛血清Hyclone公司淋巴细胞分离液。上海恒信公司胰蛋