srbsdv在水稻原生质体内的复制与表达

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1、分类号：Ｓ４３５１１．丨．４９单位代码：１０３８９密级：学号：１１２０２０４０１９福建农林大学项士学位论文ＳＲＢＳＤＶ在水稻原生质体内的复制与表达学科门类：农学一级学科名称：植物保护二级学科名称：植物病理学研究方向：植物病毒学与分子生物学研究生：吴锦鸿指导教师：吴祖建研究员张洁讲师二—完成时间：０五年四月ｔ．Ｉ．．＇？－．‘分类号：Ｓ４３５．ｌｌ１．４９单位代码：１０３８９密级：学号：１１２０２０４０１９福建农林大学硕士学位论文ＳＲＢＳＤＶ在水稻原生质体内的复制与表达学科门类：农学

2、一级学科名称：植物保护二级学科名称：植物病理学研究方向：植物病毒学与分子生物学研究生：吴锦鸿指导教师：吴祖建研究员张洁讲师二—０完成时间：五年四月＇ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒｓＤｅｇｒｅｅｏｆＦｕｉａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｙｙＲｅｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳＲＢＳＤＶｉｎｒｉｃｅｒｏｔｏｌａｓｔｓｐｐＳｕｂｅｃｔＣａｔｅｇｏｒｙ：ＡｒｏｎｏｍｊｇｙＰｒｉｍａｒｙＳｕｂｅｃｔ：ＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎｊＳｅｃｏｎｄａ

3、ｒＳｕｂｅｃｔ：ＰｈｙｔｏａｔｈｏｌｏｙｊｐｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＤｉｒｅｃｔｉｏｎ：ＰｌａｎｔＶｉｏｌｏａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｇｙＳｔｕｄｅｎｔ：ＷｕＪｉｎｈｏｎｇＡｄｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＷｕＺｕｉａｎｊＤｏｃ．ＺｈａｎｇＪｉｅＳｕｂｍｉｔｔｅｄＴｉｍｅ：Ａｐｒ．２０１５独创性声明本人声明，，所呈交的学位（毕业）论文是本人在指导教师的指导下。独立完成的研究成果，并且是自己撰写的尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成一果。与我同对本研

4、究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。、７１意日期口学位（毕业）论文作者亲笔签名：：１賴论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。口＾不保密，本论文属于不保密。０＇学位（毕业＞论文作者亲笔签名：？曰期７：Ｉ＾钱丨名Ｉ口指导教师亲笔签名：日期：福建农林大学

5、硕士学位论文目录觀ＩＡｂｓｔｒａｃｔＩＩ１前１１１１．南方水稻黑条矮缩病毒的研究情况１１１１．．症状特征及病害流行情况１．１．２传播介体及寄主范围２２１．１．３病害发生的原因分析１１．．４防治措施３１１５３．．病毒粒体形态及分类地位１１４．．６基因组及蛋白功能的研究１２水稻原生质体系研究情况６．１．３免疫焚光技术７１．４实时定量ＰＣＲ技术７１４１ＰＣＲ．．ｑ的原理７１４２ＰＣＲ８．．的种类ｑ１４３ＰＣＲ的定量方法８．．ｑ１．４．４ＰＣＲ技术的应用前景９

6、ｑ１．５本研究的目的及意义９２１１１．棚２１１Ｖ１１．．ＳＲＢＳＤ水稻毒株与白背飞風２１２１１．．载体和菌株２１３１１．．实验室试剂２２１２．施２１１．２．原核表达引物的设计．．２２．２．２植物总ＲＮＡ的提取１２２－．２．３ＲＴＰＣＲ１３２１．２．３．１ＲＴ３２２３２ＰＣＲ１３．．．２．２．４回收ＰＣＲ产物１４２２５Ｇａ５．．ｔｅｗａｙ入门载体构建１２２１．．６热激法转化大肠杆菌５２２７ＰＣＲ鉴１５．．菌落定－２２－－２１Ｐ９１、ＤＯＮＲ２２１Ｐ１０６．２．８提取质粒

7、获得ＰＤＯＮＲｐ载体１－－ＤＥＳＴ－ＤＥＳＴ１７Ｐ９１１７Ｐ１０１７２．２．９ＬＲ反应获得表达载体Ｐ、ｐ２．２．１０Ｒｏｓｅｔｔａ感受态细胞的制备１７－２１Ｂ０．２．１ＳＲＳＤＶＰ９ＫＰ１蛋白的原核表达１７２２－１ＲＢＤＶＰ９１Ｐ１１．．２ＳＳ、０重组蛋白的多抗血清的制备８２２１１８．．３植物总蛋白的提取２２１４Ｗｓｅ１．．ｅｔｒｎｂｌｏｔ检测抗体的特异性９１ＩＡ２．２．５间接ＥＬＳ法测抗体效价１９福建农林大学硕士学位论文