rrsv在水稻原生质体内的复制与表达

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1、分类号：Ｓ４３５．１１１．４９单位代码：１０３８９２０２０４００４密级：学号：１１福建农林大学顿士学位论文ＲＲＳＶ在水稻原生质体内的复制与表达’？学科门类：农学一级学科名称：植物保护二级学科名称：植物病理学研究方向：植物病毒与分子生物学研究生姓名：陈晓敏指导教师：吴祖建研究员张洁讲师二？一五年四月完成时间：ｔ、．分类号：Ｓ４３５１１４９１０３８．１．单位代码：９１１２密级：学号：０２０４００４福建农林大学项士学位论文ＲＲＳＶ在水稻原生质体内的复制与表达学科门类：农学一级学科名称：植物保炉二级学科名

2、称：植物病理学研究方向：植物病毒与分子生物学＾研究生姓名：陈晓敏指导教师：吴祖建研究员张洁讲师完成时间二０—：五年四月＇ＴｈｅＴｈｅｓｉｓｏｆＦＡＦＵｓＭａｓｔｅｒＳｔｕｄｅｎｔＴｈｅｒｅｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＲｉｃｅｒａｇｅｄｐｐｇｓｔｕｎｔｖｉｒｕｓＲＲＳＶｉｎｒｉｃｅｒｏｔｏｌａｓｔ（）ｐｐＤｅｒｅｅｃａｔｅｏｒ：ＡｒｏｎｏｍｇｇｙｇｙＴｈｅｎａｍｅｏｆｄｉｓｃｉｐｌｉｎｅ：ＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＴｈｅｎａｍｅｏｆｍａｏｒ：ＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｊｇｙ

3、Ｒｅｓｅａｒｃｈｆｉｅｌｄ：ＰｌａｎｔＶｉｏｌｏａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｇｙＳｔｕｄｅｎｔｎａｍｅ：ＣｈｅｎＸｉａｏｍｉｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＷｕＺｕｊｉａｎＤｏｃ．ＺｈａｎＪｉｅｇＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｉｍｅ：Ａｐｒ，２０１５ＦｕｉａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒＵｎｉｖｅｒｓｉｔＦＡＦＵｊｇｙｙ（）独创性声明本人声明，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的，。尽我所知除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外一，论文中不包含其他人发表或

4、撰写过的研究成果。与我同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位（毕业）论文作者亲笔签名：日期：；、论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或。部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。学位（毕业）论文作者亲笔签名：命叙日期：丄傅；、指导教师亲笔签名＞日期：福建农林大学硕士学位论文

5、目录搬ＩＩＩＡｂｓｔｒａｃｔ一第章前言１１１．１水稻齿叶矮缩病毒的研究概况１１１．１．水稻齿叶矮缩病的发生及危害１１１．．２水稻齿叶矮缩病的传播及症状１．１．３水稻齿叶矮缩病毒的粒子特性２２１．１４ＲＲＳＶ的基因组结构．ＲＳＶ２１．１．５Ｒ编码蛋白的功能１４．２植物病毒侵染原生质体的研究概况１４．２．１原生质体在植物病毒研究中的作用１．２．２植物病毒复制组装的研究４５１．２．３植物病毒在原生质体内的复制和表达研究１．３本研究的目的和意义６第二章ＲＲＳＶ非结构蛋白及外壳蛋白的原核表达及其抗血清

6、的制备７２７．１＃１４７２１供试材料．１．２．１．２酶和试剂７２１．．３菌种７、载体２２．方法７２２１７．．引物设计２２２感染ＲＲＳＶ的水稻总ＲＮＡ的提取８．．２．２．３目的基因的扩增９２２ＲＲＳＶ目的Ｇａｔ入门载体的构建１．．４基因ｅｗａｙ０２２５ＲＲＳＶ１１．．目的基因原核表达载体的构建２２６目的蛋白的诱１２．．导表达及检测２．２７抗血清的制备１２．福建农林大学硕士学位论文２２Ｗｔｅｒｔ１３．．８ｅｓｎｂｌｏ和间接ＥＬＩＳＡ检测１４２．２．９提纯抗体免疫球蛋白Ｇ２．２．

7、１０劳光抗体的交联１４２．３结果１４２．３．１原核表达载体的构建１４２．３．２目的蛋白的原核诱导表达１６２．３．３多克隆抗体特异性检测１６２．３．４多克隆抗体效价检测１７２．４讨论１９第三章ＲＲＳＶ在水稻原生质体内的表达动态２０３．１材料２０３．１．１供试材料２０３１２．．酶和化学试剂２０３．２２０３１．２．水稻日本晴品种无菌苗培育２０３２２