异甘草素对自发性高血压大鼠脑基底动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用

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1、分类号：密级：学号：2010109120单位代码：10759石河子大学硕士学位论文异甘草素对自发性高血压大鼠脑基底动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用学位申请人田伟伟指导教师司军强申请学位门类级别理学硕士学科、专业名称生理学研究方向神经生理与血管生理所在学院医学院中国·新疆·石河子2015年05月TheeffectofIsoliquiritigeninonLargeconductance2++Ca-activatedKchannelofBasilarArterySmoothMuscleCellsinSpontaneouslyHypertensiveRatADisserta

2、tionSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByTIANWei-wei(Physiology)DissertationSupervisors:Prof.SIJun-qiangMay,2015石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡

3、献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。摘要目的:研究异甘草素(Isoliquiritigenin,ISL)对自发性高血压大鼠(Spontaneouslyhypertensionrats,SHR)脑基底动脉血管平滑肌细胞(Vascularsmoothmuscle

4、cell,VSMC)2++大电导钙激活钾通道(LargeconductanceCa-activatedKchannel,BKCa)的调节作用。-5方法:在使用异甘草素干预处理前后，用尾动脉测压仪观察SHR血压变化；依次用10-5-4-5mol/L苯肾上腺素(phenylephrine,PE)、10mol/L苯肾上腺素和10mol/L异甘草素、10mol/L苯肾上腺素分别对SHR脑基底动脉灌流后，脑基底动脉的直径应用压力型小动脉仪进行测量；用全细胞膜片钳技术研究SHR脑基底动脉平滑肌细胞（VSMC）BKCa通道电流的变化；用ELISA技术观察SHR脑基底动脉内cGMP水平变化

5、。结果：(1)ISL干预前SHR血压是(218.3±1.6)mmHg，与WKY血压(119±2.1)mmHg相比，两者具有显著统计学差异(p<0.01,n=6)。与ISL干预前相比，ISL灌胃(12mg/kg.d)14天后SHR血压降至(119.2±1.9)mmHg(p<0.01,n=6)，但与WKY血压没有明显差异；-5(2)含有PE(10mol/L)的PSS液体在压力型小动脉测量仪水浴槽内持续对血管段进行-4-5灌流，待血管段收缩状态稳定后，再用含有ISL(10mol/L)和PE(10mol/L)的PSS液-5体持续灌流冲洗，血管舒张达到稳定状态后，给予含PE(10mo

6、l/L)的PSS液体再次持续灌流冲洗，记录血管直径分别为:(235.6±26)μm、(309.2±25)μm和(241.1±27)μm，提示ISL舒张SHR脑基底动脉(n=6，p<0.01)；(3)单个脑基底动脉平滑肌细胞钳制电压在-40mV，外向电流在刺激电压-40~-20mV-4区间内无显著变化，10mol/LISL在0-60mV区间内可以呈电压依赖性增强脑基底动脉平滑肌细胞外向电流(n=6,p<0.05)；-7-6-5-4-4(4)在0、10、10、10、10和3×10mol/L异甘草素作用下，平滑肌细胞+60mV时的外向电流分别是（144±25）pA、（156±24

7、）pA、（173±24）pA、（211±21）pA、（252±21）-7pA和（262±20）pA。除10mol/L异甘草素组和对照组没有明显差异外，其余各组均呈浓度依赖性增强外向电流，提示ISL呈浓度依赖性增强脑基底动脉平滑肌细胞外向电流(n=6，p<0.05)，且增强平滑肌细胞外向电流的EC50为9.5μmol/L；(5)异甘草素干预后的SHR平滑肌细胞外向电流（+60mV）从(212.1±32)pA增加到-3(283.2±28)pA(p<0.01,n=6)，用10mol/L四乙胺(TEA，BKCa通道阻断剂）