富氢水对大鼠脑缺血再灌注损伤时p38mapk表达的影响

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1、10459201212443419公开硕士学位论文富氢水对大鼠脑缺血再灌注损伤时p38MAPK表达的影响作者姓名：李达导师姓名：艾艳秋教授学科门类:临床医学专业名称:麻醉学培养院系：郑州大学第一完成时间：2015年5月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：日期：上年学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑

2、州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。日期：、丨上年上〃月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterEffectsofHydrogen-richsalineonexpress

3、ionofp38MAPKduringcerebralischemia-reperfusioninratsByDaLiSupervisor:Prof.YanqiuAiDepartmentofAnesthesiologyTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay,2015摘要富氢水对大鼠脑缺血再灌注损伤时P38MAPK表达的影响硕士研究生李达硕士生导师艾艳秋教授郑州大学第一附属医院麻醉科中国郑州450052摘要背景及目的缺血性脑血管病以其极高的致死率、致残率成为世界范围内导致病人死亡的第二大因素。脑缺血后氧供、能量供应不足导致脑细胞死亡

4、和相应的功能障碍，严重影响着人们的生活质量，全球每年因脑血管病死亡患者约600万。脑血管病的临床及动物基础实验研究一直是人们关注的热点，模拟并干预脑组织损伤的病理变化，为临床治疗提供重要的科学基础，大鼠脑缺血再灌注损伤模型成功模拟了脑血管阻塞及再通的病理过程，凋亡在脑缺血再灌注损伤中扮演着重要角色。富氢水（SaturatedHydrogenSaline,HS）是高纯氢气置于生理盐水中，加压使氢气溶于生理盐水达到饱和状态。富氢水在多种动物模型中发挥抗炎、抗氧化、抗凋亡作用，从而发挥组织保护作用。其相关受体Gsk-3β在机体中分布广泛，脑组织中也有该受体表达，可以较好模拟人体中相关生理过程。本

5、实验拟建立大鼠脑缺血再灌注模型，观察富氢水对大鼠脑缺血再灌注损伤时P38MAPK表达的影响，探讨富氢水对脑组织凋亡调节的作用。材料与方法实验分为三组，假手术组（Sham）、缺血再灌注组（I/R）、富氢水干预组（HS）。建立大鼠暂时性局灶性脑缺血再灌注模型（tMCAO）,于造模前3天及再灌注即刻腹腔注射富氢水（0.6mmmol/L）5ml或等量盐水，评价试验动物后12h、24h神经功能，Longa评分标准：0分为无明显神经功能缺陷，1分为提尾巴时I摘要动物左前肢屈曲不能伸直（轻度），2分为向单侧转圈，静息状态下可维持平衡（中度），3分为静息时姿势不稳倒向对侧（重度），4分为无可见活动（极重度

6、），为确保每组动物数量相等，剔除死亡或蛛网膜下腔出血的动物；迅速断头取脑，滤纸吸去脑组织水分，称湿重（WetWeight,WW），置于120℃烤箱中烘烤2h至恒重，取出脑组织称干重（dryweight,DW）。计算缺血24h后脑组织含水量＝（WW－DW）/WW×100﹪；HE染色后在普通光镜下观察脑组织的病理变化并拍照；TTC染色观察再灌注后24h大鼠脑组织梗死面积变化；TUNEL染色法观察大鼠脑组织凋亡情况；免疫组化观察脑组织P38MAPK、P-p38MAPK表达变化；应用Western-blot分析P38MAPK、P-p38MAPK蛋白表达，阐明富氢水在大鼠脑缺血再灌注损伤中发挥脑保护

7、的可能机制。结果1神经功能学评分所有大鼠均在麻醉后30~60min苏醒，假手术组（Sham组）未发现明显的神经功能缺损症状。I/R组和富氢水（HS组）的大鼠有不同程度的左前肢肢体偏瘫症状。术后24h,I/R组和HS组神经功能缺损症状较Sham组均明显增加（p﹤0.01）；HS组神经功能缺损评分较IR组显著降低（p﹤0.01）。2.脑组织病理学改变光镜下，Sham组大鼠脑组织神经细胞结构排列整齐，胞核边界清晰。I/R组皮层