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时间:2019-03-15
《针刺大肠俞募穴对功能性便秘小鼠egc细胞形态学及gdnf表达影响的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、成都中医药大学(针灸推拿学膀)二—0五居硕壬研究生学位论文针刺大巧俞募穴对功能性便秘小鼠EGC细胞形态学及邮NF表达影响的研究AstudyoferoacunctureonEGCceillectpumorphologyandGDNFexpressioninfunctionalconstipationmice研巧生姓名:刘丽莎指导教师:李琪教授学科专化:针灸推拿学二〇—五年五月学位论文针刺大肠俞菜穴对功能性便化小氣EGC细胞形态学及GDNF表达影响的研究刘丽莎
2、指导教师姓名;李谈申请学位级别:硕±专业名称:针灸推拿学论文提交时间:2015年4月论义答辩时间;2015年5月二〇—五年五月中文摘要目的:本研究拟W功能性便秘为研究对象,从,W功能性便秘动物模型为研巧载体影响胃肠动力的关键环节EGC、GDNF入手,探讨大肠俞募配穴治疗功能性便秘的效应及其外周作用机制。方法:.SP的剛小鼠,,针采用64只F级别,雌雄各半,随机分为空白对照组模型姐一一。,刺组,EGC组4个组,每组16只小鼠妒冶疗时间周为个疗程每姐动物浪一一二据治疗时长各分为周和二周两
3、个亚组,每个亚姐8只,分别于接受周和周’的针刺后取标本检测。空白对照组给予0.9%生理盐水化lOmg/kgd的剂量进行灌胃,灌胃容量为O.lml/lOg,持续1化模型組、针刺组和EGC组采用复方地芬诺’OOm/kd.lmin14d。脂混悬液lUlgg的剂量进行灌胃,灌胃容量为^,持续造模结一,针刺沮和EGC组周和二周的针束后,空白对照组和模型组只固定不针刺接受刺治疗EGC。治疗结束,其中组在接受针刺治疗之前须进行EGC抑制剂腹腔注射、后取动物标本,经固定切片和染色后采用光镜和电镜观察EGC细胞形态学和结EGC肠组织
4、病理改变情况,yrUNEL染色法检测细胞调亡情况,W及使用免疫组化技术与原位杂交技术对结肠组织中GDNF蛋白及m民NA的含量进行检测,比较组间差异。结果:1.组织形态学结果:光镜和电镜下可见空白对照组结肠组织神经丛丰富、EGC细胞形态正常。模型狙,针刺组,EGC组结肠组织均有不同程度的病理性形态学改、变,如EGC细胞变性或细胞结构不完整黏膜神经丛水肿、炎性细胞浸润集其中针刺組病理改变最轻。,2.TUNEL细胞调亡检测结果:经过对调亡细胞阳性率进行统计学分析针刺一一f<〇EGC组周、二周组与模型周、二周组差
5、异有统汁学意义(.〇5),与模型组1EGC细一相比胞调亡率有所下降,定差距但与针刺组相比仍有。3.GDNF蛋白表达结裝模型组结肠组织中GDNF蛋白表达水平显著降低(与空白对照组比较尸<0.01)。计刺大肠俞募穴可提高结肠组织中GDNF蛋白及其mRNA一<—的表达水平(针刺周0.05)。EGC、二周组及EGC二周组与模型组比较均戶周>>组湿示结肠组织中GDNF蛋白表达与模型组比较无差异(i0.05),与针刺组比较<显著降低(f0.05)。4.GDNFmRNA表达结黑模型组结肠细织中GDNFmRNA蛋白表达水平
6、相比<空白对照组显著降低(戶0.01)。针刺大肠俞募穴可提高结肠中GDNFmRNA的表达水平(针刺组、EGC组与模型组比较均f<0.05)。EGC组GDNFmRNA的表达水<0,与针刺组比较其表达水平较低。平高于模型组.05)结论:1GC.针刺大肠俞募穴能改善功能性便秘小鼠结肠组织和E细胞形态学,促进EGC细胞分泌GDNF,修复受损结肠上皮组织。2EGCDNF的.破坏细胞后,G表达下降,电针刺激对提高GDNF的表达水平作用不明显,结肠上皮细胞修复减慢。3.针刺时间长短对模型动物结肠组织及EGC形态学改变无显
7、著差异,对GDNF及mRNA表达的影响无显著差异。关健词:电针俞募穴功能性便秘GDNFEGC2ABSTRACTObective:jAsthe^searchi打te打ded化usethefimctio打alconstiationanimalmodelsasthep--carrierToexlore化emechanismofelectroacuunctureBackshuandFrontmuoints,pppfbrtreatingfunctionalconstipa
8、tionbyEGCandGDNF,Whichare化ekeysin化eproce巧ofastronesna.gittilMethods
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