针刺大肠俞募穴对功能性便秘小鼠egc细胞形态学及gdnf表达影响的研究

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1、成都中医药大学（针灸推拿学膀）二—０五居硕壬研究生学位论文针刺大巧俞募穴对功能性便秘小鼠ＥＧＣ细胞形态学及邮ＮＦ表达影响的研究ＡｓｔｕｄｙｏｆｅｒｏａｃｕｎｃｔｕｒｅｏｎＥＧＣｃｅｉｌｌｅｃｔｐｕｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄＧＤＮＦｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｎｓｔｉｐａｔｉｏｎｍｉｃｅ研巧生姓名：刘丽莎指导教师：李琪教授学科专化：针灸推拿学二〇—五年五月学位论文针刺大肠俞菜穴对功能性便化小氣ＥＧＣ细胞形态学及ＧＤＮＦ表达影响的研究刘丽莎

2、指导教师姓名；李谈申请学位级别：硕±专业名称：针灸推拿学论文提交时间：２０１５年４月论义答辩时间；２０１５年５月二〇—五年五月中文摘要目的：本研究拟Ｗ功能性便秘为研究对象，从，Ｗ功能性便秘动物模型为研巧载体影响胃肠动力的关键环节ＥＧＣ、ＧＤＮＦ入手，探讨大肠俞募配穴治疗功能性便秘的效应及其外周作用机制。方法：．ＳＰ的剛小鼠，，针采用６４只Ｆ级别，雌雄各半，随机分为空白对照组模型姐一一。，刺组，ＥＧＣ组４个组，每组１６只小鼠妒冶疗时间周为个疗程每姐动物浪一一二据治疗时长各分为周和二周两

3、个亚组，每个亚姐８只，分别于接受周和周’的针刺后取标本检测。空白对照组给予０．９％生理盐水化ｌＯｍｇ／ｋｇｄ的剂量进行灌胃，灌胃容量为Ｏ．ｌｍｌ／ｌＯｇ，持续１化模型組、针刺组和ＥＧＣ组采用复方地芬诺’ＯＯｍ／ｋｄ．ｌｍｉｎ１４ｄ。脂混悬液ｌＵｌｇｇ的剂量进行灌胃，灌胃容量为＾，持续造模结一，针刺沮和ＥＧＣ组周和二周的针束后，空白对照组和模型组只固定不针刺接受刺治疗ＥＧＣ。治疗结束，其中组在接受针刺治疗之前须进行ＥＧＣ抑制剂腹腔注射、后取动物标本，经固定切片和染色后采用光镜和电镜观察ＥＧＣ细胞形态学和结ＥＧＣ肠组织

4、病理改变情况，ｙｒＵＮＥＬ染色法检测细胞调亡情况，Ｗ及使用免疫组化技术与原位杂交技术对结肠组织中ＧＤＮＦ蛋白及ｍ民ＮＡ的含量进行检测，比较组间差异。结果：１．组织形态学结果：光镜和电镜下可见空白对照组结肠组织神经丛丰富、ＥＧＣ细胞形态正常。模型狙，针刺组，ＥＧＣ组结肠组织均有不同程度的病理性形态学改、变，如ＥＧＣ细胞变性或细胞结构不完整黏膜神经丛水肿、炎性细胞浸润集其中针刺組病理改变最轻。，２．ＴＵＮＥＬ细胞调亡检测结果：经过对调亡细胞阳性率进行统计学分析针刺一一ｆ＜〇ＥＧＣ组周、二周组与模型周、二周组差

5、异有统汁学意义（．〇５），与模型组１ＥＧＣ细一相比胞调亡率有所下降，定差距但与针刺组相比仍有。３．ＧＤＮＦ蛋白表达结裝模型组结肠组织中ＧＤＮＦ蛋白表达水平显著降低（与空白对照组比较尸＜０．０１）。计刺大肠俞募穴可提高结肠组织中ＧＤＮＦ蛋白及其ｍＲＮＡ一＜—的表达水平（针刺周０．０５）。ＥＧＣ、二周组及ＥＧＣ二周组与模型组比较均戶周＞＞组湿示结肠组织中ＧＤＮＦ蛋白表达与模型组比较无差异（ｉ０．０５），与针刺组比较＜显著降低（ｆ０．０５）。４．ＧＤＮＦｍＲＮＡ表达结黑模型组结肠细织中ＧＤＮＦｍＲＮＡ蛋白表达水平

6、相比＜空白对照组显著降低（戶０．０１）。针刺大肠俞募穴可提高结肠中ＧＤＮＦｍＲＮＡ的表达水平（针刺组、ＥＧＣ组与模型组比较均ｆ＜０．０５）。ＥＧＣ组ＧＤＮＦｍＲＮＡ的表达水＜０，与针刺组比较其表达水平较低。平高于模型组．０５）结论：１ＧＣ．针刺大肠俞募穴能改善功能性便秘小鼠结肠组织和Ｅ细胞形态学，促进ＥＧＣ细胞分泌ＧＤＮＦ，修复受损结肠上皮组织。２ＥＧＣＤＮＦ的．破坏细胞后，Ｇ表达下降，电针刺激对提高ＧＤＮＦ的表达水平作用不明显，结肠上皮细胞修复减慢。３．针刺时间长短对模型动物结肠组织及ＥＧＣ形态学改变无显

7、著差异，对ＧＤＮＦ及ｍＲＮＡ表达的影响无显著差异。关健词：电针俞募穴功能性便秘ＧＤＮＦＥＧＣ２ＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｅｃｔｉｖｅ：ｊＡｓｔｈｅ＾ｓｅａｒｃｈｉ打ｔｅ打ｄｅｄ化ｕｓｅｔｈｅｆｉｍｃｔｉｏ打ａｌｃｏｎｓｔｉａｔｉｏｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓａｓｔｈｅｐ－－ｃａｒｒｉｅｒＴｏｅｘｌｏｒｅ化ｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｕｎｃｔｕｒｅＢａｃｋｓｈｕａｎｄＦｒｏｎｔｍｕｏｉｎｔｓ，ｐｐｐｆｂｒｔｒｅａｔｉｎｇｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｎｓｔｉｐａ

8、ｔｉｏｎｂｙＥＧＣａｎｄＧＤＮＦ，Ｗｈｉｃｈａｒｅ化ｅｋｅｙｓｉｎ化ｅｐｒｏｃｅ巧ｏｆａｓｔｒｏｎｅｓｎａ．ｇｉｔｔｉｌＭｅｔｈｏｄｓ