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时间:2019-03-13
《乙型脑炎病毒的分离鉴定及其在microrna水平上与pk-15细胞的相互作用研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、855320123501分类号S.学号S、,yV四川巧化大学■-ri>硕dr学位论文乙型脑炎病毒的分离鉴定及其在microRNA水平上与PK-15细胞的相互作用研究、,、‘、片蔡雨函'■‘.V'>—,、'’叩指导教师徐志文教授J'C:7....二;、一*学科专业预防兽医学V研巧方向动物传染病病原分子生物学.-、'■'一■-衣■一:A'.??义、*’,.?A、.、\..V、.*I"??'-?-^K/-'
2、\‘\、;"V20巧年>\6月、。??:>、二?>’\/’,公■■-、?.'—"■’'-/'音‘尸是’-—-?>-.'-一Tb、产.,,声/‘/V■■、>乂.S.■.'.'-.‘.,于.J,.CategoryS855.3NumberS20123501Sichuan乂riculturalUniversitgy,MastersDegreeDissertationIsolationandidenti贷cationofJapane
3、seencephalitisvirusandthereseachof-interactionwithPK15cellsatthemicroRNALevelBy:CaiYuhanDirectedby:Prof.ZhiwenXuMaoriPreventiveVeterinarmedicinejyChengduSichuanJune2015,论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加W标注和致谢的地方外,学位论文中不包含其他个人或集体
4、已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川农业大学一或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。"研巧生签名:速於(5年^月5曰絮吊)1(关于论文使用援巧的声明、,本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定即:学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业,可W采用影印大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。\:论文不保密;。a本论文保密,在年解密后
5、适用本授权。(3(__""(请在上□内划V)■研巧生签名;雨击从5年i月化曰絮导师签名:月^日中文摘要一流行性乙型脑炎病毒(JEV)是种危害严重的人畜共患病病原,属于黄病毒。,科黄病毒属该病毒严重威胁人类健康感染人后入侵中枢神经系統,造成死亡或者留下严重的神经系统盾遗症。同时它可W感染猪群,造成种猪繁殖障碍,严一重制约养猪业的发展,也造成巨大的经济损失。microRNAmiRNA作为种在()转录后水平发挥基因调控功能的非编码小分子RNA,在细胞生长、分化、调亡和代谢等生命过程中发挥着不可替代的作用,并且在病毒感染入侵及宿主细胞的-抗病毒方
6、面起着重要的调节作用。而目前对于JEV在miRNA水平上与PK15细胞相互作用的研究暂无报道,相关研巧对于深入了解祀V的致病机制及JEV的防控十分重要。本研巧具体内容如下;通过观察细胞病变(CPE)情况及PCR检测-21,利用BHK细胞从四川流-3---产死猪胎样品中成功分离出株JEV,分别命名为JEVSC1株、圧VSC2株与JEV-SC-3株,基因分型研究显示3株病毒株均为基因田型,其TC肛50分别为-w-5i2"。--10V0.025ml、10/0.025ml及I(H/〇.〇25ml选取JEVSC1株为代表株分别--1VPK5感染BHK2、er
7、o和1细胞后,观察CPE及利用本研究建立的巧光定量一HPC民方法分别绘制其在这H种细胞中的歩生长曲线。结果显示,JEV在这E-种细胞中均能增殖且能产生不同程度的CP:JEV感染BHK21细胞后3化开始ero--出现C距,而感染V、PK15细胞后48h开始出现CPE;JEV感染BHK21 ̄ ̄?细胞后〇h24h増长缓慢,24h4化呈对数増长,48h72h增长速度减缓,60h达e ̄ ̄到最大值,随后病毒含量逐步下降;感染Vro细
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