艾灸对ad大鼠学习记忆、gsk-3β和磷酸化tau蛋白影响的研究

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1、１０１６０分类号民２４６．６单位代码：学号：２０１２２００９２？ｆｆ審该硕：ｔ学位论文－题目；义灸对ＡＤ大鼠学习记忆、ＧＳＫ３Ｐ和雜酸化ｔａｕ蛋白影晌的研究Ｅｆｆｅｃｔｏｆｍｏｘｓｍｅ－ｔｎｏｎＡｈｅｓｉｂｕｉｏｌｚｉｒＤｉ’ｔｓｒｎｎａｎｄｍｅｍｏ－ｒ￣—ｅａｓｅｍｏｄｅｌｒａｌｅａｉｇｙ，－ａｎｄａａｕ－ｒｔｅＧＳＫＳｈｏｓｈｏｒｉｎｐｐｐｙｌｔｅｄＴｐｏ研究生：王静蓉导师；许建阳＾合临床学科专业：中西医结２０１３１２一论文课题起止时间：年月２０１５年３月日２日１５ｉ

2、它文完成寸间：年４月．．，．ｆ．＇＇：？－：．’＇．－Ａ；；－Ｌ三．ｆ‘／．＇，’：八‘＾＇Ｗ满的；？■一－．■．＇’：■．．成＾，辽宁医学院研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ义标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机拘的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。一论申请学位论

3、文与资料若有不实乏处，本人承担切相关责任。文作者签名：＾職日期：ｋ＇？ｉｌ宁医学院研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解巧宁医学院有关保护知识产权的规定，即：研究证生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属迂宁医学院。本人保毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为巧宁医学院，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署葦为迂宁医学院。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复审件和禮盘，允许论文被查阅和借阅。学校可Ｌ乂公布学位论文的全部或部分内容（保密巧容除外），Ｌ乂采用影巧、缩巧论或文其他手段保存论文。作者签名：＿主務襄指导教

4、师签養：方8·中文论著摘要·艾灸对AD大鼠学习记忆、GSK-3β和磷酸化tau蛋白影响的研究目的通过建立阿尔茨海默(AD)大鼠模型，观测其学习记忆、海马GSK-3β活性、磷酸化tau蛋白部分位点表达情况等，探讨艾灸在防治AD中可能的作用机制，为早期防治AD提供新思路和理论依据。方法用Morris水迷宫淘汰反应过于迟钝或敏感的大鼠，筛选出60只2月龄雄性SD大鼠，再随机分为假手术组12只、手术组48只。采用双侧侧脑室微量注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立拟AD大鼠模型，假手术组以柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液替代STZ注射。第9天去除术后死亡大鼠，再将手术组剩余36只随机分为模型组、对照

5、组、艾灸组，每组各12只。术后第10天，艾灸组应用艾灸任督脉穴“关元”“长强”“命门”“百会”的方法干预一个月，对照组予西药盐酸多奈哌齐混悬液灌胃，假手术组、模型组不予处理。治疗结束后第2天，用Morris水迷宫测大鼠学习记忆能力，测试结束后第2天取材，用ELISA法、免疫组织化学、Westernblot、超微量ATP酶测试盒以及图像分析技术等手段，分别检测各组大鼠海马区GSK-3β活性及tau蛋白磷酸化位点（Ser396/Thr231）的含量和表达水平，额叶ATP酶活力变化以及光镜下观察大鼠海马CA1区形态学的改变。1结果1、Morris水迷宫检测结果示模型组大鼠学习记忆能力明显

6、受损,主要表现在前4天平均潜伏期明显延长，前4天平均游过的路径距离与总路程百分比（距离百分比）明显下降，空间探索实验中穿台次数减少，120s内平台象限停留时间短，差异具统计学意义（均P<0.05）,而艾灸与西药盐酸多奈哌齐对术后大鼠的学习记忆能力有一定改善作用,主要表现在前4天平均游泳距离百分比较模型组上升，尤其是第3天、第4天距离百分上升，120秒停留时间较模型组延长，且象限转换次数增多（均P<0.05），且两种治疗效果差别不大（P>0.05）。此外，比较各组大鼠空间探索轨迹与策略有明显不同：假手术组轨迹集中在平台附近，搜索灵活反应快，但模型组搜索范围大，轨迹呈随机式或转圈式；艾

7、灸组虽不如假手术组搜索集中且靠近平台，但较之模型组轨迹呈现出大鼠在较小的范围内不断变换方式搜索，说明艾灸能部分抑制学习记忆的损伤，效果与盐酸多奈哌齐差异无统计意义。2、ELISA检测大鼠海马GSK-3β活性结果示：造模后大鼠海马GSK-3β活性明显升高，而两种治疗方法对GSK-3β活性升高均有抑制作用；且盐酸多奈哌齐抑制作用大于艾灸，差异均具有统计意义。（均P<0.05）3、免疫印迹定量检测结果显示：模型组tau[pT231]、tau[pS396]相对表达量高于艾灸组