灰葡萄孢蛋白激发子bcspl1诱导番茄抗病机制研究

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院学位论文灰葡萄孢蛋白激发子BcSpll诱导番茄抗病机制研究StudyonMechanismofBotrytisElicitorBcSpll-InducedDiseaseResistanceinTomato硕士研究生：张易指导教师：杨秀芬研究员申请学位类别：理学硕士专业：生物化学与分子生物学研究方向：微生物分子生物学与基因工程培养单位：植物保护研究所中国农业科学院研究生院提交日期2015年4月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果。尽我所知，除/文中特别加以标注和致谢的地方外，

2、论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它:教育机构的学位或证书而使用过的材料a与我•-同工作的同志对本研宂所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间：2015年6月1曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，B卩：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:时间••201S年

3、6月1日导师签名:时间：2015年6月1曰中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表..................................——I论文题HBcSpll提高番茄抗病的免疫调控机制微生物分子生物化学与论文作者张易专业研宄方向生物学与基分子生物学因工程业科学院植物r/'，t*tT&、中国指导教师杨秀芬培养单位（研究所）^护研究所硕（博）姓名职称单位专业.签名」导师------------------------1-评张国珍教授屮国农业人学植物病理学博导阅中国农业科学院作物生物化学与潘映红研究员人博导科学研究所分子生物

4、学—答辩王琦教授博导中国农、丨k大学植物病理学主席李兴红研究员博导北京市农林科学院植物病理学W中国农业科学院植物蒋细良研宂M博导生物防治学L保护研究所答中国农业科学院植物邱德文研究员博导生物防治学h规保护研究所辩中国农业科学院植物何晨阳研究员博导植物病理学保护研究所委中国农、丨k科学院植物李世东研究员博导生物防治学—保护研宄所员—1i%会议记录（秘书）袁京京屮国农业科学院中日屮心30〗会议室卜.午9:00论文答辩时间地点密级:论文编号:中国农业科学院学位论文灰葡萄孢蛋白激发子BcSpl1诱导番茄抗病机制研究StudyonMechanismofIn

5、ducingDiseaseResistanceinTomatoofProteinElicitorBcSpl1fromBotrytiscinerea硕士研究生：张易指导教师：杨秀芬研究员申请学位类别：理学硕士专业：生物化学与分子生物学研究方向：微生物分子生物学与基因工程培养单位：植物保护研究所中国农业科学院研究生院提交日期2015年4月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationStudyonMechanismofInducingDiseaseResistanceinToma

6、toofProteinElicitorBcSpl1fromBotrytiscinereaM.S.Candidate：ZhangYiAdvisor：Prof.YangXiufenMajor：BiochemistryandMolecularBiologySpecialty：MicrobialPesticideEngineeringApril2015摘要BcSpl1是从灰霉菌（Botrytiscinerea）分泌蛋白质组中发现的一个蛋白激发子，该蛋白属于cerato-platanin家族成员之一，能引起番茄、烟草叶片快速强烈的坏死反应。为明确BcSpl

7、1激发番茄免疫反应的分子机制，本文用毕赤酵母和大肠杆菌表达获得了BcSpl1重组表达蛋白，重组蛋白渗入番茄植株叶片能引起快速坏死枯斑，并能诱导产生局部和系统诱导抗性；BcSpl1激发子能诱导抗病相关基因和蛋白激酶基因转录的上调表达，引起磷酸化蛋白表达谱的变化，通过生物信息学分析了番茄体内磷酸化蛋白组的结构特点并获得了BcSpl1诱导表达的特异蛋白激酶和抗病蛋白，具体研究结果如下：1.通过毕赤酵母真核表达体系和大肠杆菌原核表达体系获得了BcSpl1重组蛋白，质谱鉴定证明两种表达系统获得的重组蛋白为同一蛋白。两种重组蛋白BcSpl1均能引起番茄叶片快

8、速的坏死反应，并具有诱导番茄植株抗病性的功能。重组蛋白注射番茄叶片后，1h即能观察到坏死斑，24h枯斑更明显。真核表达蛋白和原核表达蛋白