氯霉素残留的胶体金免疫层析法的研究

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1、密级:论文编号:中国农业科学院学位论文氯霉素残留的胶体金免疫层析法的研究Researchoncolloidalgoldstripofchloramphenicol硕士研究生：穆阳指导教师：陈刚研究员申请学位类别：农业推广硕士专业领域名称：食品加工与安全培养单位：中国农业科学院研究生院2014年11月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationResearchoncolloidalgoldstripofchloramphenicolM.S.Candidate

2、：MuYangSupervisor：ChenGangDegree：MasterofAgriculturalExtensionSpecialty:FoodProcessingandSafetyNov2014摘要氯霉素曾作为广谱抗菌素应用于畜牧业和水产养殖业，由于其严重的毒副作用而被美国FDA、欧盟、中国等相关标准规定为不得检出。因其稳定的抗菌性好、价格低廉，违法添加的现象屡见不鲜。胶体金技术是利用抗原抗体的特异性结合，放大反应结果，使结果通过直接观察即可判定的检测技术。通过对胶体金免疫层析法制备及性能，超高效液相色谱-串联质谱仪的

3、验证等进行研究。主要研究结果如下：1、确定以柠檬酸三钠为还原剂，制备出直径约为20nm的胶体金颗粒。用氯霉素多抗进行标记，最佳标记量为300μg/mL。2、成功研制出氯霉素胶体金免疫层析试纸条，优化工艺条件，选择Millipore135s的硝酸纤维素膜为反应载体，用以0.5%吐温的磷酸盐缓冲液处理的全血滤膜为样品垫，使本试纸条的灵敏度达到1ppb。3、确定了试纸条检测生牛乳、蜂蜜和鸡蛋的检测限分别是2ng/mL，5ng/g，3ng/g，并用超高效液相色谱-串联质谱仪验证了试纸条的测定结果，达到了用一种试纸条检测不同种类样品的研究

4、目的。关键词：氯霉素，检测，胶体金免疫层析技术IAbstractChloramphenicolisbelongstobroad-spectrumantibiotichasbeenusedinanimalhusbandryandaquaculturewidely.Duetoitsstrongtoxicandsideeffects,chloramphenicolhasbeenforbidbyFDA,EUandChina.Becauseofitsstableantibacterialpropertyandlowprice,thephe

5、nomenonofillegallyaddedisstillcommon.Colloidalgoldimmunochromatographytechniqueisbasedonthespecificitycombinedofantigensandantibodies,aimedtoenlargetheeffectofreactionandgettheresultoftestingwithhumaneye.Themainpurposeistogetstudyonthepreparationandqualityofcolloidal

6、goldstripandconfirmedbyUPLC-MS/MS.1.Thecolloidalgoldwith20nmwaspreparedwithareductionofchloroauricacidbysodiumcitrate.TheimmunogoldwaspreparedwithPcAB,whichtheconcentrationwas300μg/mL.2.Themanufacturingprocessofcolloidalgoldteststripofchloramphenicolwasconsummated.Th

7、enitrocellulosemembranewhichis135swasproductionofMillipore,andthewholebloodfiltermembranewhichwastreatedwith0.5%tweenwatersolutionwasusedassamplepad.3.Thesensitivityfordetectionofchloramphenicolwas1ng/mL,5ng/g,3ng/gbyeyeinrawmilk,honeyandchickeneggs.Thesensitivityoft

8、heteststripwasconfirmedbyUPLC-MS/MSaswell.Thegoaloftestingdifferentkindsofsamplesbyonekindofteststriphasbeenachieved.Keyword:chlora