真菌毒素多残留胶体金免疫层析试纸条的研制

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1、万方数据2．2．12胶体金免疫层析试纸条稳定性实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．293．1伏马毒素胶体金免疫层析试纸条⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯293．1．1抗体的纯化与浓度测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．293．1．2包被原的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．293．1．3胶体金质量鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．293．1．4胶体金标记抗体蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、．313．1．5伏马毒素胶体金免疫层析试纸条工作条件的优化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．323．1．6伏马毒素胶体金免疫层析试纸条检测限的确定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．353．1．7伏马毒素胶体金免疫层析试纸条特异性的确定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．363．1．8伏马毒素胶体金免疫层析试纸条实际样品检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．363．1．9伏马毒素胶体金免疫层析试纸条稳定性实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．363．2黄曲霉毒素试纸条⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯373．2．1抗体的纯化与浓度测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、．373．2．2胶体金标记抗体蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．373．2．3黄曲霉毒素胶体金免疫层析试纸条工作条件的优化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．373．2．4黄曲霉毒素胶体金免疫层析试纸条检测限的确定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．393．2．5黄曲霉毒素胶体金免疫层析试纸条实际样品检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．403．2．6黄曲霉毒素胶体金免疫层析试纸条稳定性实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．403．3真菌毒素多残留胶体金免疫层析试纸条⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯403．3．1多残留胶体金免疫层析试纸条金标抗体连接方式的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、．403．3．2多残留胶体金免疫层析试纸条划线顺序的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．413．3．3多残留胶体金免疫层析样品垫处理液的优化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．413．3．4多残留胶体金免疫层析试纸条检测限的确定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．423．3．5多残留胶体金免疫层析试纸条实际样品检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．433．3．6多残留胶体金免疫层析试纸条稳定性实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．433．4商业化试剂盒验证试纸条方法的有效性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯434结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯475展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯486参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯497攻读硕士学位期间发表论文情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯558致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯56万方数据天津科技大学硕士学位论文．．iL-J—l刖舌1．1真菌毒素概述真菌毒素也称霉菌毒素，是某些真菌在食品或饲料里生长产生且并对人和动物都有害的代谢产物。其化学性质稳定，耐热、抗紫外线

6、，耐酸但不耐碱，是一种小分子化合物。具有极强的毒性和致癌、致畸和致突变作用。主要包括黄曲霉毒素(AF)、伏马毒素(FB)、赭曲霉毒素(OT)、展青霉素(PTL)和镰刀真菌毒素(ML)等【lJ。当食用了被真菌毒素所污染的粮食作物或畜产品时，或者通过呼吸道及皮肤接触到真菌毒素时，可能导致人体或动物的中毒，严重危害人类及动物健康。目前真菌毒素常用的检测方法有生物鉴定法、仪器分析法和免疫学法等[21。为了更好地监测和控制粮食谷物以及中药材等真菌的污染，保障人们的身体健康，高效、快速、精确、简捷和经济的检测方法已经成为一种必然趋势。1

7、．1．1伏马毒素伏马菌素(FumoIlisillS)是20世纪80年代末发现的主要由串珠镰刀菌(Fusariummonilifo衄e)、多育镰刀菌(Fus撕岫proliferatum)等产生的一类真菌毒素，广泛存在于玉米和以玉米为原料的产品中【3l。伏马菌素衍生物虽然有20多种，其中B族伏马菌素最为普遍、且毒性最强，其中FBl是污染玉米伏马菌素的主要组分，也是导致伏马菌素毒性作用的主要原因。伏马菌素是一种对人、畜健康造成威胁较大的真菌毒素，国际上把它归属于2B类致癌物质，与人类食管癌的高发率有关，它可引起马脑白质软化症(EL

8、EM)、猪肺水肿症候群fPPE)等动物疾病，且许多动物实验证明伏马毒素具有致癌活性，并可引起实验动物的肝、肾损伤【4J。因此，其在食品卫生领域中愈加地到人们的重视，是一种具有重大卫生学意义的真菌毒素。1．1．1．1伏马毒素结构与性质伏马菌素是一组结构类似的化合物，其主链骨架结构如图1．1，