核盘菌转录因子ss-nsd1和ss-foxe1的差异蛋白质组解析

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1、核盘菌转录因子Ss-Nsd1和Ss-FoxE1的差异蛋白质组解析DifferentialproteomicanalysisofthetranscriptionfactorSs-Nsd1andSs-FoxE1inSclerotiniasclerotiorum作者姓名：李乐专业名称：植物病理学指导教师：潘洪玉教授学位类别：农学硕士论文答辩时间：2015年6月1日中文摘要核盘菌转录因子Ss-Nsd1和Ss-FoxE1的差异蛋白质组解析核盘菌（Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary）是一种寄主广

2、泛的植物病原真菌，引起多种作物的菌核病，给农业生产造成严重威胁。核盘菌有性生殖产生的子实体决定着菌核病的初侵染及流行程度，其中菌核在核盘菌的整个生活史中扮演着非常重要的角色，是最主要的初侵染来源，菌核能萌发形成子囊盘或菌丝，当子囊盘发育成熟时释放大量的子囊孢子开始新的侵染循环，为核盘菌的远距离传播提供了可能，也是目前菌核病防控的难点所在。因此，本研究从差异蛋白质组水平对核盘菌转录因子敲除菌株及其野生型菌株进行分析，探讨转录因子在核盘菌子囊盘形成过程中蛋白的差异表达，为有效防治核盘菌病害提供理论依据。本课题组通过PEG介

3、导的遗传转化方法获得Ss-nsd1基因的完全敲除菌株，Ss-nsd1基因的敲除影响了菌核结构发育的完整性及萌发过程中产囊体的形成，从而导致菌核不能萌发形成子囊盘。在前期工作基础上，本研究通过双向电泳对核盘菌Ss-nsd1基因敲除菌株和野生型菌株菌丝全蛋白质组进行比较分析，发现蛋白质的丰度变化在3倍以上且有较好的重复性的差异表达点有43个。43个差异点中有18%和能量代谢相关，7%和新陈代谢相关，5%和命运蛋白相关，4%和压力反应相关，2%和细胞的生长和分裂相关，以及2%与细胞组织相关，剩余的蛋白则是预测蛋白和假想蛋白。

4、这其中18%的蛋白与能量代谢相关，说明Ss-Nsd1转录因子显著影响能量代谢从而影响子囊盘的形成。课题组前期研究表明，Ss-FoxE1是与核盘菌有性发育相关的转录因子，Ss-foxE1影响子囊盘的正常形成，通过双向电泳对核盘菌Ss-foxE1基因敲除菌株和野生型菌株菌丝全蛋白质组进行比较分析，结果表明，蛋白质的丰度变化在3倍以上且有较好的重复性的差异表达点有42个，42个差异点中有21%的蛋白和能量代谢相关，15%和细胞组织相关，9%和新陈代谢相关，9%和命运蛋白相关，6%和细胞生长和分裂相关，6%和压力反应相关，剩余

5、的蛋白则是预测蛋白和假想蛋白。上述结果表明，转录因子Ss-FoxE1对能量代谢的影响最显著，从而也直接或间接的影响了子囊盘的正常形成。I本研究首次从蛋白功能的角度对核盘菌转录因子Ss-Nsd1和Ss-FoxE1进行分析，为这两个转录因子在子囊盘形成差异表达的基因和分子机制的解析提供了重要依据，为深入揭示核盘菌子囊盘形成方面的相关蛋白的研究奠定了基础。关键词：核盘菌；转录因子；Ss-Nsd1；Ss-FoxE1；蛋白质组IIAbstractDifferentialproteomicanalysisofthetranscri

6、ptionfactorSs-Nsd1andSs-FoxE1inSclerotiniasclerotiorumSclerotiniasclerotiorum(Lib)deBaryisadevastatingfungalpathogenwhichinfectsvariousofeconomiccrops.Sclerotiumthatproducedduringthesexualreproductionimposesevereyieldlossestocropindustryandalsodeterminestheincid

7、enceofitsepidemicsclerotiumwhichisthemainsourceoftheprimaryinfection,sclerotiumplaysthecentralroleinthewholelifecycleofS.sclerotiorum,sclerotiumgerminatesformingsclerotiumormycelia,whichtogetherdevelopintothematuresclerotium,fromwhichcountlessascosporesarereleas

8、edtoinitiatethereinfection.Thesufficientascosporesallowsalong-distancedistributionandalsoraisesthedifficultiesfordiseasecontrol.Therefore,thisresearchengagedtoanalysi