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时间:2019-03-13
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1、ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine(眼科学院)二〇一八届硕士研究生学位论文益气活血养阴中药对氧诱导小鼠视网膜新生血管生长抑制作用的研究StudyontheinhibitoryeffectofbenefitingqiforactivatingbloodcirculationandnourishingyinChineseherbalmedicineonthegrowthofretinalneovascularizationinmiceinduc
2、edbyoxygen研究生姓名:张启燕指导教师:张富文教授学科专业:中医五官科学二〇一八年五月1学位论文益气活血养阴中药对氧诱导小鼠视网膜新生血管生长抑制作用的研究StudyontheinhibitoryeffectofbenefitingqiforactivatingbloodcirculationandnourishingyinChineseherbalmedicineonthegrowthofretinalneovascularizationinmiceinducedbyoxygen学生姓
3、名:张启燕指导教师:张富文申请学位级别:硕士专业名称:中医临床五官科学论文提交时间:2018年4月论文答辩时间:2018年5月二〇一八年五月1中文摘要目的:本实验选用益气活血养阴中药芪灯明目胶囊提取物,探讨其对氧诱导的小鼠视网膜新生血管的影响及相关机制,为临床应用中医药治疗视网膜新生血管性疾病提供实验依据和新的研究思路。方法:将53只出生7天的C57BL/6J小鼠(雌雄不分),采用高氧诱导视网膜新生血管小鼠模型的方法,将小鼠分为模型组和正常对照组。模型组小鼠置于氧气浓度(75±2%)环境中饲养5
4、天,返回正常空气中再饲养5天;正常对照组小鼠放于正常空气中饲养。在鼠龄17天时,两组各取7只小鼠分别行小鼠视网膜病理切片、视网膜血管造影及视网膜铺片,观察两组小鼠视网膜新生血管突破内界膜的情况及视网膜血管的形态变化。模型建造成功后,将31只视网膜新生血管模型小鼠随机分为模型组、芪灯明目胶囊取物低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组各6只,阿帕替尼组7只,芪灯明目胶囊取物低、中、高剂量组在小鼠17天时用中药芪灯明目胶囊取物灌胃,剂量分别为低(200mg/kg)、中(400mg/kg)、高剂量组(800
5、mg/kg),阿帕替尼组在小鼠17天用抑制新生血管药阿帕替尼灌胃(70mg/kg)。除正常对照组和模型组外,其余各组小鼠连续灌胃1周,1周后处死各组小鼠,免疫组织化学法分别对各组小鼠视网膜组织中神经纤毛蛋白1(NRP-1)、内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的表达进行检测;Westernblot法分析视网膜视网膜组织中半乳凝集素1(GAL-1)蛋白的表达。检测结果进行统计分析。结果:视网膜血管造影及铺片结果显示模型组小鼠视网膜血管迂曲扩张、荧光素渗漏、视网膜中央呈无灌注区,对正常对照组小鼠视网
6、膜血管分布均匀,未见荧光素渗漏和无灌注区;视网膜组织病理切片结果可见模型组小鼠突破内界膜的血管内皮细胞核数为15.6000±5.9414个,正常对照组为5.6000±2.3022个,两组具有显著差异(P<0.01);免疫组化结果显示:与正常组对照组相比,模型组小鼠视网膜组织NRP-1、VEGFR-2蛋白含量明显升高,具有显著的统计学意义(P<0.01),与模型组相比,阿帕替尼组、芪灯明目胶囊提取物高剂量组、中剂量组小鼠视网膜组织中NRP-1蛋白含量明显降低,具有显著统计学意义(P<0.01);与
7、模型组相比,阿帕替尼组、芪灯明目胶囊提取物高剂量组小鼠视1网膜组织中VEGFR-2蛋白含量降低,具有统计学意义(P<0.05);Westernblot检测GAL-1结果显示,与正常对照组相比,模型组小鼠视网膜组织中GAL-1蛋白表达升高,差异极其显著(P<0.01);与模型组相比,阿帕替尼组小鼠视网膜组织中GAL-1蛋白表达降低,差异极其显著(P<0.01);芪灯明目胶囊提取物高剂量组小鼠视网膜组织中GAL-1蛋白表达降低,具有差异性(P<0.05)。结论:益气活血养阴中药芪灯明目胶囊提取物可以
8、调节高氧诱导的小鼠视网膜新生血管生长因子的表达,改善视网膜结构和功能。推测其对视网膜新生血管性疾病患者的视功能具有一定的保护作用。关键词:益气活血养阴中药;芪灯明目胶囊;视网膜新生血管;NRP-1;VEGFR-2;GAL-1;2AbstractObjective:TochoosetheextractofQiDengMingmucapsule,thetraditionalChinesemedicineofbenefitingqiforactivatingbloodcirculationandnou
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