cck-8对甲基苯丙胺致神经损伤的保护作用及氧化应激机制研究

《cck-8对甲基苯丙胺致神经损伤的保护作用及氧化应激机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、授予单位代码10089学号或申请号20122637HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位CCK-8对甲基苯丙胺致神经损伤的保护作用及氧化应激机制研究研究生：安美玲导师：马春玲教授专业：法医学二级学院：基础医学院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报

2、的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：麼导师签章二级学院领导盖章：年孑月义日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：每h导师签章:年i月•日目录中文摘要………………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………5英文缩写…………………………………………………………

3、…………9研究论文CCK-8对甲基苯丙胺致神经损伤的保护作用及氧化应激机制研究前言……………………………………………………………………10材料与方法……………………………………………………………11结果……………………………………………………………………24附图……………………………………………………………………27附表……………………………………………………………………40讨论……………………………………………………………………47结论……………………………………………………………………50参考文献……………………………………………………………

4、…51综述苯丙胺类药物毒性机制研究进展…………………………………55致谢…………………………………………………………………………67个人简历……………………………………………………………………68中 文 摘 要 CCK-8对甲基苯丙胺致神经损伤的保护作用及氧化应激机制研究摘要目的：毒品滥用，尤其是新型的化学合成毒品冰毒、摇头丸等苯丙胺类毒品的滥用是目前世界各国亟待解决的医学及社会问题之一。甲基苯丙胺（methamphetamine，METH），是苯丙胺类精神兴奋剂，其盐酸盐为无色透明的晶体，因此俗称“冰毒”。其在近年来成为全球滥用的毒品，超过了传

5、统海洛因等毒品。METH分子是脂溶性，极易透过血脑屏障，造成中枢神经系统损伤。长期滥用METH可导致明显的行为、精神及认知功能障碍，如躁狂、幻听、幻视、焦虑、亢奋、精神分裂症等，且滥用者大多以青少年为主，社会危害极其严重。但是，目前关于METH的成瘾性和神经毒性机制研究仍不明确，尚无有效防治药物。目前认为METH可通过氧化应激、氨基酸兴奋性毒性及线粒体功能紊乱机制等经典途径导致神经毒性损伤。许多研究指出，METH引起纹状体多巴胺末梢神经毒性，表现为纹状体的多巴胺递质、多巴胺转运体（DAT）及多巴胺受体水平的降低。胆囊收缩素（cholecystok

6、inin,CCK）是由33个氨基酸组成的多肽并通过与CCK1，CCK2受体结合发挥作用。CCK有多种生物分子形式，其中以CCK-8在脑中存在最为丰富。CCK-8可以参与调节饮食、痛觉、学习记忆、焦虑及精神疾病，也参与调节DA、GABA等神经递质的释放，另外CCK-8在其他研究领域研究中发现具有抗氧化应激、抗炎功能，并且CCK-8在神经损伤模型中发挥神经保护作用。这些研究表明，CCK-8对METH引起的神经毒性可能具有保护作用。基于以上研究背景，本实验将研究甲基苯丙胺对PC12细胞（大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株，可作为神经细胞模型）的损伤作用，观

7、察氧化应激在损伤中是否发挥了作用，以及CCK-8对这种损伤作用的影响及机制，为CCK-8对神经细胞损伤的保护机制研究提供新思路。方法：1应用RT-PCR及琼脂糖电泳方法鉴定PC12细胞表面CCK1R（CCK1receptor）和CCK2R（CCK2receptor）的存在。1中 文 摘 要 2METH及CCK-8作用对PC12细胞的影响。应用MTT法观察0.1、0.5、1、2、4mMMETH分别作用24h对PC12细胞存活率的影响；0.1、0.5、1μMCCK-8单独或与2mMMETH共同作用对PC12细胞存活率的影响。3METH与CCK-8对敲

8、低CCK1R和CCK2R的PC12细胞存活率的影响。应用RNAi转染技术分别敲减PC12细胞CCK1R和CCK2R，并通过RT-PCR及