茅苍术同源四倍体离体诱导与鉴定及其遗传变异研究

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1、学号—＾诲嗦泉違义參硕±学位论文茅苍术同源四倍体离体诱导与鉴定及其遗传变异研究王紅娟指导教师向增化副教授专业名称中药举研究方向药用植物种质懲源评价与创新，答辩日期二〇—巧年巿月ＩＮＶＩＴＲＯＩＮＤＵＣＴＩＯＮＡＮＤＩＤＥＮＴＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦＡＵＴＯＴＥＴＲＡＰＬＯＩＤＡＮＤＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＧＥＮＥＴＩＣＶＡＲＩＡＴＩＯＮ０￥ＡＴＲＡＣＴＹＬＯＩＤＥＳＬＡＮＣＥＡＴＨＵＮＢ．（）ＤＣ．ＢｙＷａｎｇＨｏｎ－ｕａｎｇｊＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＸｉａｎＺｅｎ

2、ｘｕｇｇＡｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｓｕｂｍｉｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅ民ｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓＦｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＮａｎｉｎ２１００％Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａｊｇ，，ＣｏｍｌｅｔｅｄｉｎＪｕｎｅ２０１５ｐ，原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明弓，Ｉ用的内容外本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作

3、品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名心巧＞修年Ｓ月日学位论文版权使用授权书、使用学位论文的规定本学位论文作者完全了解学校有关保留，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。，允许论文被査阅和借阅本人授ｉ权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进斤检索，可［ｉｌ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者■＾哈（需亲

4、笔）签名：＾終梢年！＾月：＞日＾导师／【王１（需亲笔）签名：柏Ｊ＾年王月日ｆ勺鴻＾目录目录ｍＨＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ缩略词表Ｖ引言ＶＩＩ一第Ｓ文献综述１１苍术的基原植物及其资源分布１１２茅苍术的研巧现状２．１化学成分１２．２药理作用２２．３内生菌２２．４茅苍术致生资源分布现状２２．５茅苍术遗传机理研巧进展３２乂茅苍术組织培养技术研巧现状３３组织快篆技术在药用植物中的应用３４植物多倍体育种的主要途径３４．１化学方法诱导多倍体３４．２物理方法诱导多倍体５４．３生物方法诱

5、导多倍体５５常见多倍体的鉴定手段６５．１外观形态鉴定６５：６．２叶片解剖鉴定６５．３根尖染色体制片法鉴定５６．４分子水平的鉴定５．５逆境胁迫鉴定６６药用植物多倍体在生产上的应用７７二倍体亲本及其同源四倍体的巧传差异性研巧７７．１同源四倍体与二倍体亲本的表观遗传差异７７．２二倍体及其同源四倍体的ＩＳＳＲ分析８第二章药用植物茅苍术组织快繁关键技术研究９Ｉ材料与方法１０１０１．１试验材料？１．２培养条件１０茅签术同源四倍体离体诱导与签定及其遗传变异研巧１０１．３试验方２结Ｍ１１２．１不同

6、消毒方法对茅苍术种子发芽率的影响ｎ２１２．２快繁及生根培养基的优化２１．３不同基质对茅苍术试管苗生长的影响４；３Ｗ论１５３．１外植体消毒１５３５．２增殖分化１３１６．３生根第Ｈ章茅苍术同源四倍体离体诱导与鉴定１７１材料与方法１８１．１试验欄１８１．２试验方＾＊１８．１１．２同源四倍体离体诱导１８１．２．２同源四倍体鉴定１８２淵与分析１９２．１秋水仙素的诱导结果１９２．２同源四倍体的鉴定２０３讨论与结论２３３巧．１茅苍术诱导方法的选择３２４．２茅苍术鉴定方法的选择第四章二倍体

7、与同源四倍体茅苍术基因组ＤＮＡ甲基化水平与模式的ＭＳＡＰ分析２５１材料与方法２６１．１材料２６１．２茅苍术四倍体株系的再鉴定％１．３总ＤＮＡ提取２７１．４酶切、连接反应２７１．５预扩增与选择性扩增２８１．６变性电泳２８１２８．７条带统计及数据分析２结果与分析巧２１二２８．倍体和四倍体茅苍术染色体数２．２二倍体和同源四倍体茅苍术基因组