绞股蓝和黄芪中黄酮类活性物质的提取、纯化及体外活性研究

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1、分类号密级UDC单位代码10435硕士专业学位论文绞股蓝和黄芪中黄酮类活性物质的提取、纯化及体外活性研究StudyonExtraction,PurificationandInVitroActivityofFlavonoidsfromGynostemmapentaphyllumandAstragalusMembranaceus研究生姓名潘从蕾指导教师吕海涛教授学位种类农业推广硕士专业领域植物保护中国·青岛2018年6月QingdaoAgriculturalUniversityTheThesisofProfessionalMasterStudyonExtraction,Purifica

2、tionandInVitroActivityofFlavonoidsfromGynostemmapentaphyllumandAstragalusMembranaceusGraduatewithProfessionalMasterDegree：PanCongleiMentor:Prof.LüHai-taoTypeofProfessionalDegree：MasterofAgriculturalExtensionAcademicfield：PlantProtectionQingdao.ChinaJune,2018独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的

3、研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生

4、签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日青岛农业大学硕士专业学位论文摘要绞股蓝和黄芪中黄酮类活性物质的提取、纯化及体外活性研究摘要槲皮素、商陆素和山奈素是绞股蓝中的主要活性物质，毛蕊异黄酮和芒柄花素是黄芪中的主要活性物质，它们都是黄酮类化合物，具有较多的药理作用。本文主要由六部分组成。第一部分：绞股蓝中槲皮素、商陆素和山奈素的提取工艺优化建立高效液相色谱检测绞股蓝中三种物质含量的方法，采用加热回流法，以甲醇为溶剂，利用盐酸把芦丁、商陆苷、和山奈苷分别水解为槲皮素、商陆素和山奈素。通过单因素实验和正交试验优化提取条件，得到最佳提取条件为甲醇浓度100%，盐酸浓度1.5mol/L，料液

5、比1:30(g/mL)，提取1.5h，提取1次。槲皮素、商陆素和山奈素的提取量分别为14.78、0.074和0.051mg/g。第二部：槲皮素、商陆素和山奈素的纯化及结构确认利用高速逆流色谱法分离纯化绞股蓝粗提物中的槲皮素、商陆素和山奈素。仪器条件为：转速850r/min，流速2mL/min，检测波长280nm，柱温20℃。纯化槲皮素的双相溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（4:5:4:5,v/v），从164.7mg粗品中获得90.6mg槲皮素（纯度为99.23%，回收率为92.74%）。纯化商陆素和山奈素的双相溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（8:2:5:5,v/v），从5

6、0mg粗品中获得0.4mg商陆素（纯度为95.46%，回收率为75.32%）和1.1mg山奈素（纯度为98.78%，回收率为83.59%）。纯化后的提取物经HPLC、UV、熔点测定和红外光谱确认结构。第三部：槲皮素、商陆素和山奈素纯品的体外活性研究研究槲皮素、商陆素和山奈素纯品对DPPH自由基和羟自由基的清除作用。结果表明槲皮素对DPPH自由基和羟自由基的清除能力最强，EC50为6.03和6.27µg/mg，商陆素和山奈素的清除效果稍差，EC50分别为11.38和28.25µg/mg与14.45和24.45µg/mg。用96孔板法研究三种物质对金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、大肠杆菌

7、三种细菌及苹果轮纹、棉花枯萎、柑橘炭疽和小麦全蚀四种真菌的抑菌作用，结果表明，在实验浓度范围内，这三种物质抑菌效果不明显。第四部：黄芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素的提取工艺建立高效液相色谱检测黄芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的方法，采用加热回流法以乙醇为溶剂，利用盐酸把毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷分别水解为毛蕊异黄酮和芒柄花素。1青岛农业大学硕士专业学位论文摘要通过单因素实验和正交试验，得到最佳提取条件为：乙醇浓度100%，盐酸浓度2.5mol/L，料液比1:40(g/mL)，提取