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时间:2019-03-07
《灵芝(ganoderma lucidum)漆酶发酵参数优化及其在改善馒头品质方面的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、IⅣⅢROVEN距NTOFLACCASEPRODUCTIONFROM(谢ⅣpDE足勉4三U(卫D(厂MHSD06BANDTHEAPPLICATIONOFIN伊ROVINGTHEQU.ALITYOFCHINESESTEAⅣ匝DBREADADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByLIUYufengSupervisor:Prof.WangHaileiMay,2014摘要在本论文中,
2、作者从河南省太行山上一株野生灵芝中分离到纯灵芝菌种。其形态学特征为:菌盖软木质,呈肾性,红褐色,表面漆样光亮,有浅褶皱纹;菌肉厚约1cm,有白色管孔;菌柄偏生,红栗褐色;菌丝呈丝状,有分支,菌丝直径为1.7.3.9gm;担孢子褐色,卵圆形,双层壁,外壁光滑,担孢子大小为5.1.6.3gm×7.9.9.4岬。应用真菌ITS特异引物对该菌株ITS序列进行PCR扩增,获得一段长度614bp的序列,经测序并登录GenBank进行BlastLE对,并使用MEGA3.1软件的邻近相邻法构建系统发育树,发现该菌株和Ganodermalucidum(EU520247.1)的ITS序列相似性是100%。结合其形
3、态特征和分子生物学鉴定,确定该菌种是Ganodermalucidum,命名为G.1ucidumHSD06B。将该菌株ITS序列提交GenBank,登录号为KC3511557。对菌株G.1ucidumHSD06B产漆酶的液态发酵培养基和发酵条件进行了优化。单因素法和响应面法相结合确定其最适液态发酵培养基组成为:葡萄糖38.5g/L,蛋白胨15.0g/L,麸皮21.】g/L,藜芦醇0.8mM/L,多抗霉素0.02g/L,KH2P041.0g/L,MgS04‘7H20O.5g/L。单因素法确定其最佳的发酵条件为:接种量10%,初始pH5.4,转速180r/min,温度28℃。以优化后的发酵培养基在最
4、佳的培养条件下发酵7d,菌株G.1ucidumHSD06B产漆酶酶活达至IJ50153U/L,比优化前(5082U/L)提高了约9.7倍。灵芝漆酶粗酶液活性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验表明G.1ucidumHSD06B漆酶包含三种同工酶,分别为Lacl、Lac2、Lac3,其中Lacl和Lac2漆酶蛋白的含量LLLac3高。菌株G.1ucidumHSD06B粗酶液通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析两步分离纯化后,得到三种漆酶复合物,纯化倍数4.6,回收率为38%。G.1ucidumHSD06B漆酶同工酶的分子量分别为:Lacl:62.6kDa;Lac2:64.5kDa;Lac3:65.9kDa。初步研究了
5、灵芝漆酶对馒头品质的影响和阐述其改善馒头品质的机理。灵芝漆酶能增加馒头比容,随着漆酶添加量的增加,馒头比容逐渐增大,当漆酶添加量为2.0u/g时,馒头的比容增加11%。馒头感官品质评估结果指出,适量的漆酶能显著改善馒头的感官品质,但馒头感官得分随着酶浓度的增大而降低,在灵芝漆酶添加量为0.5U/g面粉时,馒头感官得分最高(88.5分),这比对照组(76.3分)高出12.2分。此外,和对照组比起来,当漆酶添加量为0.5U/g,馒头气孔更小、更加均匀和有规则,但是,当漆酶浓度>0.5U/g时,馒头气孔明显变大且不规则。馒头质构分析表明漆酶能增加馒头的硬度和咀嚼性,但是对弹性和回复性的影响很小。馒头
6、显微结构分析指出,漆酶可以催化小麦蛋白的交联,改善面筋网络结构,同时伴随着淀粉颗粒的膨大和聚集。SDS.PAGE电泳实验进一步证实漆酶能催化小麦蛋白的交联。以上结果说明漆酶能明显改善馒头的品质,作为一种食品添加剂,具有很广阔的应用前景。关键词:灵芝,漆酶,发酵优化,馒头品质ABSTRACTInthisthesis,awhiterotfungus,strainHSD06B,wasisolatedfromatreefullofrotinthepinehurstofTaihangMountaininHenanProvince.Themorphologicalcharactersofthefungus
7、weFeexaminedanddescribedasfollows:Pileus:1.0cmthick;reniformtosubcircular;uppersurfaceyellowishbrowntolaccatewithradialfurrowsandconcentricallysulcatezones.Pore:3-5permm;suborbicuar;white.Stipe:cylind
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