熊果酸对人早幼粒白血病细胞的增殖抑制_周期阻滞及凋亡诱导作用_杨邵华

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1、第23卷第1期甘肃科学学报Vol．23No．12011年3月JournalofGansuSciencesMar．2011熊果酸对人早幼粒白血病细胞的增殖抑制、周期阻滞及凋亡诱导作用*杨邵华，侯茜，张琼，刘国安，丁兰(西北师范大学生命科学学院，甘肃兰州730070)摘要:利用台盼蓝排染法、AO/EB双染检测法和流式细胞术检测了熊果酸对人早幼粒白血病细胞HL-60的增殖、细胞凋亡和细胞周期的作用．结果表明，低浓度(15～20μmol/L)时药物对HL-60细胞的生长表现为抑制作用，随浓度升高(20～35μmol/L)

2、出现致死效应，并呈现剂量依赖和时间依赖性;AO/EB双染分析表明，药物能够诱导细胞凋亡，随着药物浓度增加和处理时间延长，细胞凋亡率上升，并且伴有少量细胞坏死;流式细胞术检测表明，在20μmol/L时，熊果酸可引起明显的HL-60细胞S期阻滞，随着浓度升高，周期阻滞作用明显加强．细胞周期阻滞可能是药物抑制细胞增殖进而引起凋亡的原因．关键词:熊果酸;生长抑制;周期阻滞;凋亡中图分类号:Q946;Q255文献标志码:A文章编号:1004-0366(2011)01-0067-05UrsolicAcidInducedGro

3、wthInhibition，CellCycleArrestandApoptosisinHumanPromyelocyticLeukemiaCellLineHL-60Cells*YANGShao-hua，HOUQian，ZHANGQiong，LIUGuo-an，DINGLan(CollegeofLifeScience，NortwestNormalUniversity，Lanzhou730070，China)Abstract:Theeffectsofursolicacidonproliferation，apoptos

4、isandcellcycleonhumanpromyelocyticleukemiaHL-60cellswerestudiedusingtypanblueexelusionmethod，AO/EBstainassayandcelllabquanta．Theresultsshowedthatursolicacidinhibitedcellgrowthinlowconcentration(15～20μmol/L)andlethaleffectinhighcon-centration(20～35μmol/L)andpr

5、esentedindose-dependentandtime-dependentrelations．Thecellsshowedmor-phologicalcharacteristicsofapoptosisaftertreatedwiththechemicalwhenstainedwithAO/EB．Theapoptosisintimeanddose-dependentpatternsandfewnecrosiscellsareobservedatthesametime．Theresultofflowcytom

6、etryexhibitesursolicacidinducedSphrasearrestcellinHL-60cells．Thecellcyclearrestresultedfromthechemicalmaybethereasonthatcausingcellgrowthinhibitionandapoptosis．Keywords:ursolicacid;growthinhibition;cellcyclearrest;apoptosis熊果酸为乌苏烷型五环三萜类化合物，是许多性尤为受到广泛的关注，熊果酸能够

7、较强地抑制多［8-10］中草药的主要有效成分，并广泛分布于植物的次生种类型的瘤株细胞的生长，抑制癌变的启动以［1，2］［11］代谢产物中．目前，已有较多的文献研究表明，及抗致癌物诱发的基因突变，同时还具有诱导肿［3］［4］［5］［12-14］熊果酸具有良好的抗HIV、抗炎、抗氧化、保瘤细胞分化和抗血管生成作用．［6］［7］护肝损伤等作用．而其抗肿瘤作用和它的低毒唇形科香茶菜属植物中含大量的乌苏烷类三萜收稿日期:2011-01-27基金项目:西北师范大学知识与科技创新工程项目(NWNU-KJCXGC-03-65)*

8、通讯联系人．E-mail:dinglan@nwnu．edu．cn68甘肃科学学报2011年第1期4化合物，熊果酸是其中产率较高的一种．课题组从甘的影响浓度为5×10个/mL的细胞接种于24孔肃产蓝萼香茶菜和总序香茶菜中分离得到该化合板中，培养24h后加入药物，终浓度分别为0、［15］物．在此基础上研究熊果酸对人早幼粒白血病细15μmol/L、20μmol/L、25μmol