低剂量饮酒与sd大鼠核酸氧化损伤的相关性研究

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1、温州医学院硕士学位论文答辩委员会主席：答辩委员会委员：温州医学院硕士学位论文目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．2ABSTRACT⋯．．⋯．．⋯．⋯．．．．⋯．．．．⋯．．．⋯⋯．．．．．⋯．．4第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．7第二章材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯．9第三章实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．26第四章分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．36第五章结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39参考

2、文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．40附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46综述⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．47独创性声明⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯59温州医学院硕士学位论文温州医学院硕士学位论文低剂量饮酒与sD大鼠核酸氧化损伤的相关性研究中文摘要目的：本研究通过检测低剂量饮酒大鼠各组织脏器、血浆、尿液的DNA氧化标志物8．羟基脱氧鸟苷(8．OXO．dGsn)和RNA氧化标志物8．羟基鸟苷(8-oxo．Gsn)的水

3、平，探讨低剂量饮酒与大鼠各组织脏器、血浆、尿液核酸氧化的关系；并从抗氧化物酶系统的角度进一步研究低剂量饮酒对酒精的主要代谢器官——肝脏的核酸氧化的影响。方法：四月龄的健康雄。[生Sprague—Dawley(SD)大鼠48只，随机分为对照组和饮酒组，饮酒组灌胃56。二锅头酒按照每公斤体重1克(19／kg)，每天两次，每周七天连续进行。每天早晨9：00开始进行第一次灌胃，7个小时后进行第二次灌胃。对照组按照同样的方法灌胃同等体积的生理盐水。在灌胃4周(4w)、8周(8w)、12周(12w)时，用同

4、位素稀释高效液相．串联质谱(ID．LC．MS／MS)方法检测大鼠各组织脏器、血浆、尿液中的DNA氧化标志物8．OXO．dGsn和RNA氧化标志物8．OXO．Gsn的含量。另外，我们还用分光光度法测定肝脏组织的还原型谷胱甘肽(GSH)含量，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力，抗羟自由基能力(anti．OH·)和抗超氧阴离子(anti．02·)能力以进一步评估肝脏的抗氧化能力。结果：1、体重及肝体比结果：低剂量饮酒后，各组SD大鼠的体重均比同周期的对照组体重要低，差异有统计学意义(P<0．01)

5、；低剂量饮酒组大鼠肝脏与对照组相比无显著性差异(P>0．05)；低剂量饮酒组大鼠肝／体比显著大于同周期的对照组大鼠(P0．05)，而TBIL含量在饮酒12w后要低于对照组(P<0．05)。3、脏器中的核酸氧化结果：低剂量饮酒后，肝脏中的8．OXO．dGsn和8．OXO．Gsn的水平均比对照组显著下降(P<0．05)，心和’肾中的8。OXO．d

6、Gsn矛N8．OXO．Gsn在饮酒4w，8w时与对照组相比并无显著性差异，而在饮酒12w后核酸氧化分别出现下降和上升趋势(P<0．05)，其他脏器像睾丸，附睾，脑，胰腺其核酸氧化程度与对照组相比均无显著性差异。4、肝脏中的抗氧化物质和清除自由基能力检测结果：温州医学院硕士学位论文低剂量饮酒4w、8w、12w后的大鼠肝组织，其anti．OH·能力，anti．02-能力，GSH．PX活性均增强，与对照组相比差异有统计学意义(P<0．05)，GSH含量与对照组相比均无显著性差异(P>O．05)。5、血

7、浆和尿液中的核酸氧化结果：(1)低剂量饮酒后，各个周期的大鼠血浆和尿液中的8．OXO．dGsn和8-oxo．Gsn均有上升的趋势，但是尿中的8．OXO．dGsn和8．OXO．Gsn增加的趋势更加显著，其8．OXO．dGsn和8．OXO．Gsn数据在饮酒4w后与对照组相比就有统计学差异，而血浆中的8一OXO—dGsn和8．OXO．Gsn数据直到饮酒12w后才有统计学差异；(2)无论是血浆还是尿液，其中的8-OXO．Gsn的含量均显著高于8．OXO．dGsn(P

8、远大于血浆中的。结论：①低剂量饮酒后，大鼠不同脏器的核酸氧化程度不同，主要体现为肝脏中的8-oxo．dGsn，800XO．Gsn水平比对照组显著下降，这可能与肝脏中的GSH．PX活性，anti．OH·能力，anti．02"能力增强有关。②低剂量饮酒后，血浆与尿液的核酸氧化均有不同程度的增高，特别是尿液中的氧化的核酸，来源于细胞DNA中降解的8．OXO．dGsn和RNA中降解的8．OXO．Gsn，代表着机体核酸氧化的总体水平，表明Ij,N量饮酒后机体的核酸氧化水平仍旧是升高的。③血浆与尿液中8-O