bpi蛋白在雄性小鼠生殖系统的表达特性及其在精卵融合过程中的功能

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1、上海交通大学硕士学位论文上海交通大学医学院2010级硕士研究生学位论文BPI蛋白在雄性小鼠生殖系统的表达特性及其在精卵融合过程中的功能ExpressionofBPIinMaleMouseReproductiveSystemandItsFunctiononSperm-oocyteFusion学校代码：10248学科代码：100101学科专业：人体解剖与组织胚胎学作者姓名：李堃学号：1107109024指导老师：徐晨教授答辩日期：2013年5月I万方数据上海交通大学硕士学位论文BPI蛋白在雄性小鼠生殖系统的表达特性及其在精卵融合过程中的功能ExpressionofBPIinMaleMouseRe

2、productiveSystemandItsFunctiononSperm-oocyteFusion学科专业：人体解剖与组织胚胎学研究方向：生殖生物学指导老师：徐晨教授导师组成员：冯京生副教授胡燕琴主管技师伍静文讲师作者姓名：李堃学号：1107109024申请学位级别：硕士培养单位：上海交通大学医学院基础医学院论文答辩时间：2013年5月关键词：杀菌渗透增强蛋白(Bactericidal/permeability-increasingprotein,BPI)，抗菌肽，睾丸，附睾，睾酮，精-卵融合II万方数据上海交通大学硕士学位论文ExpressionofBPIinMaleMouseRepro

3、ductiveSystemandItsFunctiononSperm-oocyteFusionDiscipline:HumanAnatomy&HistologyandEmbryologyResearchorientation:BiologyofreproductionAdviser:ProfessorChenXuTutorgroupmembership:AssociateprofessorJingshengFengTechnicianinchargeYanqinHuLecturerJingwenWuAuthor:KunLiStudentID:1107109024DegreeExpected:

4、MasterDegreeInstitute:CollegeofBasicMedicineThesisDefenseDate:May2013Keywords:BPI(Bactericidal/permeability-increasingprotein),antibacterialpeptide,testis,epididymis,testosterone,sperm-oocytefusionIII万方数据万方数据万方数据上海交通大学硕士学位论文BPI蛋白在雄性小鼠生殖系统的表达特性及其在精卵融合过程中的功能摘要杀菌渗透增强蛋白(Bactericidalpermeabilityincreasi

5、ngprotein，BPI)是一种有很强抗革兰阴性菌(GNB)活性的阳离子蛋白，具有防御感染的作用。BPI最早从人中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒分离。BPI抑制或者杀死革兰阴性菌主要通过以下两条途径：（1）与细菌细胞壁上脂多糖的脂质A特异结合，从而改变细胞壁的通透性；（2）中和细菌内毒素。在正常情况下，小鼠睾丸与附睾被检测到高水平的BPI表达，提示BPI除了抗菌作用外，亦有可能在生殖活动中扮演某种角色。本研究旨在揭示BPI在小鼠睾丸与附睾的表达特性。利用制备的抗BPI-C多克隆抗体，重点观察BPI在附睾表达的区域特异性。在了解BPI表达规律的基础上，进一步探讨其表达的调控机制，及其在生殖活动中的可

6、能作用。首先，RT-PCR发现BPI的mRNA在小鼠睾丸与附睾呈高水平表达，并且，BPI的转录子(transcripts)在附睾中只表达于附睾头部，而在前列腺、精囊腺和凝固腺未见表达。其次，我们经原核重组表达、亲和层析纯化了BPI-C端蛋白，并获得抗BPI-C兔多克隆抗体。以该抗体为一抗，经免疫免疫荧光化学法染色后发现，BPI表达在睾丸晚期生精细胞、精子、VI万方数据上海交通大学硕士学位论文间质细胞(Leydigcells)、附睾头部上皮及管腔、睾丸输出小管，并可附着在附睾精子头部顶体区质膜及顶体内。雄激素调控BPI表达的体内、外实验结果显示，BPI的转录与翻译表达水平都与雄激素具有显著相关

7、性。最后，我们进行了小鼠体外穿卵实验，结果提示小鼠精子顶体内的BPI可能直接或间接参与了精卵融合。以上研究结果为阐明BPI在男性生殖与精卵融合中所起的作用提供了一定的理论基础。VII万方数据上海交通大学硕士学位论文ExpressionofBPIinMaleMouseReproductiveSystemandItsFunctiononSperm-oocyteFusionAbstractBactericidalp