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时间:2019-03-02
《gper抑制ptx对雌激素作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、AthesissubmittedtoZhengzhouUnversityforthedegreeofMasterEffectofGprotein—coupledreceptorinhibitoron17p-·estradiol·-inducedproliferationandpoptosis。IshikandHEC.1AcellapoptosisinIsllikawaandcellsH-ByXiuyingMaSupervisor:Prof.YuhuanQiaoSupervisor:Prof.YuhuanQiaotiynaec
2、ologyandobs仃ics一’_,一ThefirstAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversityApril2013原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下,独立进行研究所取得的成果。除中文中已经注明引用的内容外,本人不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式表明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:弓秀莨日期:力B年岁月.;1日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产
3、权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅:本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:弓秀踅日期:纠锌r月了1日摘要GPER抑制剂PTX对雌激素作用下子宫内膜癌细胞增曼凋亡的影响多百函复一玖,7/,一一、-一
4、一—、~。研究生马秀英背景与目的:子宫内膜癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,长期高水平雌激素刺激而缺乏孕激素拮抗的机体患子宫内膜癌的几率增加,高水平雌激素诱发子宫内膜癌的作用机理包括经典的核转录效应和非核效应。雌激素的非核效应是近年来国内外研究的热点,经研究发现介导该效应的物质分子可能是一种新型雌激素受体,曾被命名为G蛋白偶联受体30(GPR30),因其介导雌激素的非核效应,现又被称为G蛋白偶联雌激素受体(Gprotein-coupledestrogenreceptor,GPER)。Kanda等研究发现,雌激素作用于GPER
5、受体,促进凋亡蛋白Bcl.2的表达,抑制氧化应激诱导的细胞凋亡,增加细胞周期蛋白D的表达,促进细胞生长发育。Vivacqua等研究发现,雌激素通过与GPER结合可促进子宫内膜癌细胞和甲状腺癌细胞增殖,减少其凋亡,与癌发生发展密切相关。本课题组其他人员在前期研究中发现,雌激素作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞和HEC.1A细胞后,GPER表达与AKT表达相一致,提示GPER极可能介导了P13K/AKT通路活化,促进了子宫内膜癌的发生。上述研究表明,GPER可能介导了雌激素促子宫内膜癌细胞增殖过程,但阻断GPER介导的信号传导
6、通路,对子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响国内外报道极少。本实验应用体外培养的子宫内膜癌Ishikawa和HEC.1A细胞,采用MTT法和流式细胞技术,通过观察GPER抑制剂百日咳毒素(pertussistoxin,PTX)对雌激素作用下子宫内膜癌细胞增殖凋亡和细胞周期的影响,探讨阻断GPER介导的信号通路治疗子宫内膜癌的可能性。实验方法:1.体外培养子宫内膜癌细胞系Ishkaw瘌HEC2.MTT法测定细胞生长。3.流式细胞仪测定子宫内膜癌细胞周期。4.AnnexinV-FITC流式细胞术检测细胞凋亡lA。实验结果:1.MTT实验
7、结果:1713一E2具有促进Ishikawa细胞增殖的作用,随作用时间延长和浓度升高,细胞增值率均增加,且不同时间点和不同浓度间细胞增值率差异具有统计学意义,即1713.E2对Ishikawa细胞的促增殖作用呈时间依赖性(F_212.132,P<0.001)和浓度依赖性(F=128.954,P<0.001)特点;而对HEC.1A细胞促增殖作用不显著(F_o.955,P=0.393),且5个浓度问细胞增值率差异均无统计学意义(F=1.978,P=0.137)。在lX10。6mol/L1713一E2作用下,PTX对Ishikaw
8、a和HEC.1A细胞增殖抑制作用在不同时间点和不同浓度间的差异均有统计学意义,即PTX对两种细胞增殖的抑制作用呈时间依赖性(F=47.428,P<0.001;F=123.395,P<0.001)和浓度依赖性(F=495.437,P<0.001;F=424.561,P<0.001)特点。2.
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