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《不同激素浓度及培养基对烟草愈伤组织分化的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第14卷第4期云南农业大学学报Vo1114No141999年12月JournalofYunnanAgriculturalUniversityDec.1999不同激素浓度及培养基对烟草3愈伤组织分化的影响王荔杨艳琼杨德李本逊(云南农业大学农业科学技术学院,昆明650201)摘要以烟草愈伤组织为材料,研究不同激素浓度配比、不同培养基对愈伤组织绿苗分化的影响,试验结果表明,在MS+IAA015mg/L+KT210mg/L培养基上可获得较高的绿苗分化率,在分化培养基中,除必需的大量元素外,一些有机物质,维生素及微量元素也对烟草愈伤组织的分化起重要作用.关键词烟草;愈伤组
2、织;激素;诱导;分化;培养基中图分类号S572利用植物细胞培养及其产生的愈伤组织进行各种抗性变异系的诱变及筛选,是植物细〔1〕胞工程的重要研究内容之一,建立愈伤组织最适分化条件,则是这一工作的基础.激素是植物组织培养的关键因素,调节激素水平和配比,已成为提高组织分化频率的有效手〔2,3,4〕〔2,5,6〕段人们利用植物愈伤组织研究激素调节工作已有许多报道.但在具体试验中,激素的种类、浓度和配比,十分错综复杂.其原因之一是对培养物的内源激素状况不了〔7,4〕解;二是外源激素的供应会影响多种内源激素的水平因此,在实际试验中需对培养条件进行筛选,以求得最适激素种类、浓
3、度和配比.本文则在研究最适激素配比和水平的同时,通过两种不同培养基培养,改变激素浓度从而建立一种更有利于烟草愈伤组织分化的培养系统.1材料与方法111材料来源烟草品种K326,取K326幼嫩叶片,表面消毒后将其切成210cm×210cm大小的块状,然后将其接种到含有214-D210mg/L的诱导培基上培养.待叶片边缘长出愈伤组织后,再将乳白色或淡黄色的愈伤组织移瓶继代培养(备用).112愈伤组织分化的培养方法将上述获得的生长旺盛.结构致密的胚性愈伤组织,分切成017cm×017cm小块,接种到分化培养基上,置于26°C恒温箱中培养.待愈伤组织表面有茎芽突起形成时
4、,转移到每天12h光照(光强1500Lx)条件下进行培养.以MS,T为基本培养基,附加激素分别为IAA(生长素)KT(激动素)MS培养基分31999-03-10收稿云南省应用基金课题372云南农业大学学报第14卷3个激素浓度处理:(1)IAA015mg/L+KT210mg/L,(2)IAA015mg/L+KT110mg/L;(3)IAA115mg/L+KT210mg/L.T培养基分3个激素浓度处理:(1)IAA015mg/L+KT210mg/L;(2)IAA015mg/L+KT110mg/L;(3)IAA115mg/L+KT210mg/L.对照(CK)在基本培养
5、基上不加任何激素.每个浓度处理接种10瓶,每个三角瓶内接6块愈伤组织.2试验结果与分析表1试验结果及处理Tab11Theresultoftestandthedifferenttreatment培养基及浓度12345678910TABⅠ86928384849088878288866Ⅱ65636664656163686764646MSⅢ60576256586054535857575CK00000000000Ⅰ28262424262923242830262Ⅱ20181922212120192324207TⅢ12151618161317171412150CK000000
6、00000Tr2712712702682722742652682722752706211愈伤组织分化的形态发生愈伤组织在分化培养基上培养10d,即可见愈伤组织明显增大,培养到第20d,观察发现愈伤组织变紧表层有茎芽小突起,其中,MS培养基上的愈伤组织上有的小起又变淡绿色,光照培养后,愈伤组织形成大量的“绿岛”(即愈伤组织内外形成大量的茎芽突起)T培养基上培养的愈伤组织“绿岛”较少.第30d转移愈伤组织于新鲜培养基上.培养基及激素浓度不变.第35d后长出绿芽点,绿芽点继续发育成绿色不定芽及芽丛.第45d后绿芽长出短轴茎而形成无根苗.212不同IAA,KT浓度,培养
7、基对愈伤表2培养基(A)与激素浓度(B)两项表组织分化的影响MS,T培养基以及生长Tab12Thetableoftwofactorstreatmentof素(IAA)和激动素(KT)不同浓度的配medium(A)andhormoneconcentration(B)比,可不同程度诱导愈伤组织绿苗分化.项目B1B2B3TA试验结果及处理(见表1)1A1866646575208721211试验发现,激素对愈伤组织的分A2262207150619TB11288537252706化起重要关键的作用,在不含任何激素的的注:A1为MS培养基;A2为T培养基;MS和T培养基(对
8、照)上培养的愈伤B1为处
