克隆猪部分组织病理学及生理生化指标分析

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1、学校代码：10264研究生学号：M090104228上海海洋大学硕士学位论文克隆猪部分组织病理学及生理生化指标题目：分析AnalysisofHistopathologyandSome英文题目：HematologicalIndexesinClonedPigs专业：临床兽医学研究方向：胚胎工程姓名：陈会兰指导教师：张德福研究员二O一二年四月二日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本

2、论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于

3、不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日本研究由国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08006-014B;2008ZX08006-005)上海市科委科技成果转化项目（103919N1800）上海市农业遗传育种重点实验室开放课题（Shagb2008-03）提供资助上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注李家乐上海海洋大学教授主席宋祥甫上海市农业科学院研究员委员黄剑华上海市农业科学院研究员委员唐雪明上海市农业科学院研究员委员蒋杰贤上海市农业科学院研究员委员薄天岳上海

4、市农业科学院研究员委员杨建军上海市农业科学院助研秘书答辩地点上海市农业科学院答辩日期2012-5-22克隆猪部分组织病理学及生理生化指标分析摘要尽管体细胞克隆在许多动物上都获得了成功，但同时也出现了一些问题。人们发现在获得体细胞克隆动物的同时，克隆动物的出生率比正常受精动物的出生率低很多。而且在出生的克隆动物中，会发现一些异常的生理表型，其中包括出生时体重过重、胎盘过大、围产期高死亡率、心肺功能不全、早衰等。因而克隆动物的健康安全性逐渐受到人们的普遍关注。相比于牛、羊，猪克隆技术难度大，其健康安全性研究也相对较少，目

5、前，涵盖的研究内容主要包括生长性能、繁殖性能、遗传学、产肉性能以及再克隆性等方面，而病理学和血液学方面的研究却鲜见报道。应用成纤维细胞进行核移植生产体细胞克隆动物具有许多优势。本研究利用巴马小型猪的胎儿成纤维细胞和成年枫泾猪的耳成纤维细胞作为供体核生产体细胞克隆猪，并对体细胞克隆巴马小型猪的病理学和部分血液学展开分析探讨，以期为克隆猪今后在医学上可能的应用提供参考依据，研究结果主要包括以下几个方面：（1）分别采用“电激活”和“电激活+化学激活”的方法对重构胚进行融合，并比较对其发育的影响。结果表明：在融合率上，巴马小

6、型猪重构胚要略高于枫泾猪重构胚，但差异不显著。两种融合方法对重构胚的发育率没有影响。无论是小型猪重构胚还是枫泾猪重构胚，“电激活+化学激活”组的融合率、卵裂率和囊胚率均要高于“电激活”组，但差异不显著。（2）胚胎移植结果有2头代孕母猪中途流产；2头代孕母猪返情；1头代孕母猪妊娠到期后产出1头枫泾猪死胎；3头代孕母猪共产下3头健康克隆小型猪，1头健康枫泾猪和1头小型猪木乃伊死胎。怀孕率达到75%，产仔率达到50%。（3）对3头先后死亡的克隆猪进行尸体解剖，发现某些克隆猪的心肺存在严重异常。主要表现为心脏肥大，外观发育异

7、常；肺脏水肿坏死，有严重化脓性炎症外观。（4）对克隆猪的主要器官心、肝、脾、肺、肾进行常规石蜡组织切片观察，分析其病理学变化，发现克隆猪的5种组织均有不同程度的发育异常。（5）以相同饲养条件下的体细胞克隆巴马小型猪为实验对象，对其血液生理、生化指标进行了测定，并与普通巴马小型猪进行比较，结果发现体细胞克隆巴马I小型猪生理、生化指标和同期普通巴马小型猪无显著差异。关键词：体细胞克隆，巴马小型猪，病理学，血液学，生理生化指标IIAnalysisofHistopathologyandSomeHematologicalInd

8、exesinClonedPigsAbstractSomaticcellcloninghasbeensucceededinsomespecies，butsomeproblemarisedatthesametime.Itwasfoundinsomaticclonedanimalsthatthebirthrateofclonedanimalswasl