新型第二信使c-di-amp在伯氏疏螺旋体中的作用及其调控机制研究

《新型第二信使c-di-amp在伯氏疏螺旋体中的作用及其调控机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据万方数据温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．：2第一章：引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．1c．di．AMP的功能进展⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯41．2Borreliaburgdorferi及其信号传导机制⋯⋯⋯⋯．．51．2．1B．burgdorferi中的二元信号传递系统⋯⋯⋯⋯71．2．2c．di．GMP在B．burgdorferi中的功能及其作用机制．71．3本研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯lO第二

2、章：材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．1菌株及培养方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．122．2常规分子生物学操作方法⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯122．3B．burgdorferi基因的敲除、转化⋯⋯⋯⋯．．．⋯142．4实时荧光定量PCR(RealtimePCR,qRT-PCR)．．⋯142．5蛋白免疫印迹(WesternBlot)．．．．．⋯．⋯．．⋯⋯152．6双层固体平板进行B．burgdorferi单菌落分离鉴定⋯．152．7B．burgdorferi内源性质粒的鉴定⋯．⋯⋯．．．⋯．．152．8DhhP(BB0619)蛋白表达、纯化⋯⋯⋯⋯⋯．⋯162．9Dh

3、hP酶活性测定⋯⋯⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯．．．．．172．10B．burgdorferi细胞内c-di-AMP浓度测定⋯⋯⋯．172．11B．burgdorferi抗生素敏感性测定．．．⋯⋯⋯．．⋯172．12B．burgdorferi大鼠透析膜室(DMC)生长实验．⋯⋯182．13B．burgdorferi小鼠感染实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18万方数据温州医科大学硕士学位论文第三章：B．burgdorferi中c．di．AMP合成酶及水解酶的生物信息学分析及生化特性研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯193．1B．burgdorferi中c．di．AMP合成酶及水解酶的生物信息学分析

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．193．2B．burgdorferi中c．di．AMP水解酶的体外表达⋯⋯．．203．3c．di．AMP水解酶的酶学测定及功能验证⋯⋯⋯⋯2l3．4c．di．AMP水解酶的酶学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．22第四章：c．di．AMP水解酶基因(dhhP)的基因敲除及其在日．burgdorferi中的功能研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯234．1c．di．AMP水解酶基因(dhhP)的敲除及其验证⋯．⋯．．234．2B．burgdorferi中c．di．AMP水解酶的体内酶活验证⋯．244．3dhhP的敲除导致细胞生长障碍⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．254．4c

5、．di．AMP对B．burgdorferi细胞壁结构及功能的影响．．274．5幽舻敲除菌主要毒力因子OspC表达缺陷⋯⋯⋯．．284．6dhhP敲除菌感染力消失⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．304．7dhhP敲除菌对抗生素更为敏感⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．30第五章：c．di．AMP环化酶(BB0008)的基因敲除及其在B．burgdorferi中的功能研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．325．1bb0008基因的敲除和互补⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．325．2bb0008基因敲除菌的生理学特性⋯⋯．．⋯⋯⋯．345．3bb0008基因敲除菌对小鼠无致病性⋯⋯⋯⋯⋯．365．4BB0104为c．di．

6、AMP的潜在靶标⋯．．．⋯⋯⋯．．．37第六章：分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯．．386．1c．di．AMP是B．burgdorferi感染小鼠必需的毒力因子．．386．2c．di．AMP在细菌中作用机制的多样性．．⋯⋯．．⋯．39万方数据温州医科大学硕士学位论文6．3B．burgdorferi中c．di—AMP水解酶为不典型GdpP家族．396．4c．di．AMP在B．burgdorferi中的作用机制．．⋯⋯⋯．406．5B．burgdorferi中的c—di—AMP和合成酶(880008)．⋯．．406．6B．burgdorferi分子遗传学操作方法的改

7、进⋯⋯⋯．．416．7c．di．AMP的作用靶标及调控机理的探讨⋯⋯⋯⋯42第七章：小结与进一步工作设想⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯447．1小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯447．2进一步的工作设想⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45参考文献．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．46研究生期间发表论文及专利申请⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．52致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．54综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯55独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯67万方数据温州医科大学硕士学位论文中文摘要环二腺嘌呤核苷酸(c-di—AMP)是最新发现的一种细菌第二信使，广泛存在于细菌和古生菌中

8、，可能是微