携带il-24基因的条件增殖型腺病毒联合紫杉醇诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

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1、徐州医学院硕士学位论文携带IL--24基因的条件增殖型腺病毒联合紫杉醇诱导乳腺癌细胞凋亡的研究姓名：戚迎冬申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：郑骏年2012-03徐州医学院硕士学位论文携带IL一24基因的条件增殖型腺病毒联合紫杉醇诱导乳腺癌细胞凋亡的研究中文摘要目的研究携带IL．24基因的条件增殖型腺病毒ZD55．IL．24联合化疗药物紫杉醇对乳腺癌MDA—MB一231及Bcap一37细胞增殖和凋亡的影响。方法腺病毒大规模转染低代HElQ93细胞，大量扩增，测定滴度。将PBS、ZD55．EGFP、PTX、ZD55．IL．24

2、、ZD55一EGFP联合PTX、ZD55．IL．24：联合PTX分别作用于乳腺癌MDA．MB一231及Bcap．37细胞。CCK8法检测细胞增殖；山mexinV-FITC／PI法及Hochest33258法检测细胞凋亡情况；WestemBlot法检测腺病毒IL一24蛋白及Bax、Bcl—XL、Mcl．1、Caspase-3、Caspase-7、Caspase．9、PARP凋亡相关蛋白的表达情况。结果腺病毒zD55一IL．24、zD55一EGFP的滴度分别为6．5×108p矗l／ml，8．2×108pfu／m1；CCK8结果表明Z

3、D55．IL一24联合PTx对MDA．MB．231及Bcap一37细胞有明显的抑制增殖的作用；ArulexinV-FITC／PI及Hochest33258结果表明zD55．IL．24联合PTX作用的MDA．MB一231及Bcap一37细胞发生了明显的凋亡；WestemB10t结果表明ZD55一IL一24联合PTX作用的MDA．MB．231及Bcap．37细胞能高效表达IL一24，同时Bax的表达量增加，PARP、Md一1、Bcl一xL的表达量均降低，Caspase一3、Caspase．7、Caspase一9发生了明显剪切。结论携

4、带IL．24基因的条件增殖型腺病毒zD55．IL一24联合化疗药物PTX有明显的协同抑制乳腺癌细胞增殖，促进其凋亡的作用。这种肿瘤的化学药物一靶向基因一病毒联合模式的疗效优于单独化疗或单独病毒基因治疗。关键词乳腺癌；IL．24基凶；条件增殖腺病毒；紫杉醇徐州医学院硕士学位论文EnhancedantitumoractiVitybyaconditionallyreplicatingadenoviruscarryin2Interleukin．24combinin2withaden0VlrUSCarrVln2Interleukin—Z4

5、C0mbiningwithpaclitaxelfbrbreasttumorcelllinesviainductionofapoptosis．AbstractobjectiVeToinVestigatethetefIfectsofthecombineduseofconditionallyr印licatingadenoViruscarr如ngIL一24(ZD55一IL一24)incombinationwithPTXonthe黟。叭ha11dapoptosisofbreastcancercelllinesMDA—MB-231andBc

6、ap-37．Methods‘TlleVimswerepropagatedin10wpassageHEK293cells．TllemnctionalPFUtitersweredetemlinedbyplaqueassayonlowpassageHEK293cells．MDA—MB一231andBcap-37cellsweretreatedwithPBS，ZD55一EGFP，PTX，ZD55一IL-24，ZD55·EGFPplusPTXandZD55-IL-24plusPTXrespectively．TheihhibitionofM

7、DA-MB-231andBcap一37cellpr01iferationwasdetenninedbyCCK8assay．Thec”otoxicef．fectsweredetectedbyHoechst33258andAnnexinV-FITC／PI．Furthenllore，IL一24，Bax，Bcl一XL，PARP’Mcl一1，Caspase一3，Caspase一7，Caspase．9proteinsweredeteminedbyWestemB10t．ResultsThe如nctionalPFUtitersofZD55一IL

8、一24．ZD55一EGFPwere6．5×108p如／m1，8．2×106pn_l／m1．CCK8assayshowedZD55一IL．24plusPTXcouldinduceobViouslygrowthinhibitionofMDA—MB一231andBca