大鼠脑内星形胶质细胞和神经元在正常或模拟失重状态下对血压变化的反应及其相互关系的形态学研究

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1、第四军医大学博士学位论文大鼠脑内星形胶质细胞和神经元在正常或模拟失重状态下对血压变化的反应及其相互关系的形态学研究姓名：宿长军申请学位级别：博士专业：神经生物学指导教师：饶志仁2000.6.1第四军医大学博士学位论文博士论文摘要大鼠脑内星形胶质细胞和神经元在正常或模拟失重状态下对血压变化的反应及其相互关系的形态学研究研究生宿长军导师饶志仁．第四军医大学全军神经科学研究所，专叉芸留、两拼I、锚嘛．第一部分，f已知孤束核(NTS)、延髓腹外侧区(VLM)、A5区、结合臂旁核(PB)、兰斑(LC)、中脑导水管中央灰质(PAG)、下丘脑室旁核(PVN)、视上核(SON)、杏仁

2、中央核(Ce)以及边缘皮质等结构参与心血管调节，但哪些结构对血压变化反应敏锐，在高、低血压时有何不同，哪些结构参与压力感受器反射报道不一。抗Fos蛋白的免疫组织化学方法是目前常用的机能形态学方法之一，用以了解与某机能相关的神经元在中枢神经系统内的分布。星形胶质细胞(As)被认为是对神经元起支持、营养和保护功能，但随着研究技术和方法的不断进步，越来越多的证据表明，AS并非惰性细胞，而是与周围神经元之间存在双向通讯，可通过改变细胞外空间神经活性物质的浓度或通过控制神经元的微环境来调制神经元的活动。广——一一一本研究利用静脉注射硝普钠或苯肾上腺素制作瞬间低血压和高血压模型，

3、用免疫组织化学的方法系统观察了大鼠脑内Fos蛋白表达的情况，以及与TH阳性神经元的关系，从整体水平了解中枢参与血压反射性调控部位的全貌：同时观察GFAP表达的变化，并结合与抗Fos和抗酪氨酸羟化酶(TH)三第四军医大学博士学位论文重标记方法，观察Fos、GFAP、TH三者之间的关系，探讨As和神经元暂称为复合体对血压刺激的敏感性。使用顺行追踪(BDA为追踪剂)、迷走神经顺行性溃变与抗GFAP免疫反应结合的方法，观察星形胶质细胞与传入纤维终末的关系。f{结果发现，①无论高血压或低血压，在延髓内脏带(∽z)及上位中枢均t对该刺激起反应，表现为这些区域集中分布的Fos表达，

4、高血压时出现于内脏带的背内侧区和腹外侧区，中间带较少，主要分布于带的内侧，上位中枢包括臂旁外侧核、导水管中央灰质、下丘脑的视上核和室旁核、杏仁中央核和终纹床核：低血压时除上述部位外，还有延髓头端腹外侧区、蓝斑、A5区、视交叉上核等，这些部位上的差异说明中枢对高、低血压整合和信号传出具有对应关系。另外本文发现位于NTS内的A2细胞群和VLM内的Al细胞群在低血压时分别有37．63％和54．25％的儿茶酚胺能神经元表达Fos蛋白，在高血压时VLM内仅有10．26％的儿茶酚胺能神经元表达Fos蛋白，而在DMM的比例与低血压相似，说明延髓儿茶酚胺能神经元参与了血压调控；②三重

5、标记结果显示，GFAP的表达部位与Fos表达部位非常相似，在一些区域即无Fos亦无GFAP。⑨对刺激起反应的As和神经元相互紧密结合，形成神经元——As复合体(N—ASC)。可观察到下列复合体类型：I、三种都阳性，表现为包含一黑色胞核(Fos阳性)、棕色胞浆(TH阳性)的神经元和黑色的AS(GFAP阳性)，在MVZ、LC和其它部位；II、TH阴性(神经元为非儿茶酚胺能)、Fos和GFAP阳性，可以在所有对刺激起反应的核团中发现；ⅡI、在MVZ可见到TH和GFAP阳性而Fos阴性复合体；IV、GFAP阳性As与神经元的胞体或树突的不同部位接触。④光镜下观察到复合体内As

6、与传入轴突终末相接触：电镜下发现As不仅与神经元的树突和胞体接触，也与轴突终末相接触(包括迷走神经初级传入纤维)，在接触部位的AS胞膜和相对应的神经元胞体、树突与轴突胞膜部分第四军医大学博士学位论文II片段增厚，电子密度增高。上述结果提示AS可能从传入纤维接受信息，并且通过功能活性点与神经元相互作用。暗示N-ASC在神经信息的处理中起重要的作用，上述提到的三种可作为确定复合体功能状态的一种标志，它们的活性点可能具有复杂的空间立、体定位。厂7’／第二部分，厂f失重是航天员无法消除的因素，当返回地球表面lG重力环境时普遍出现心血管功能失调，严重影响运动能力与立位耐力，此种

7、障碍也直接威胁航天员返回再入大气层时的安全、着陆后(或登上其它天体)即刻的应急离舱能力，以及返回地球表面重力环境的再适应能力。张立藩等近年就循环系统两个主要效应器——心肌和动脉血管平滑肌进行了较深入系统研究，在失重时发生适应性结构和功能变化，认为是导致飞行后心血管失调的重要原因之一，并提出了“外周效应器机制”学说。此外中枢心血管调控是参与其中的一个因素，但有r百关此方面的研究只有少数报道。)本研究利用免疫组织化学及追踪技术，功能形态学的方法，观察在模拟失重下大鼠脑内包括MVZ及PVN神经元的活动(Fos表达)和星形胶质细胞的变化(GFAP表达)，并利