乌司他丁对人结肠癌lovo细胞增殖,侵袭,凋亡及hmgb1的影响

《乌司他丁对人结肠癌lovo细胞增殖,侵袭,凋亡及hmgb1的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南方医科大学2011级硕士学位论文乌司他丁对人结肠癌lovo细胞增殖，侵袭，凋亡及HMGBl的影响Ulinastatininhumancoloncarcinomalovocellsinvitro：Effectoncellproliferation，invasion，apoptosis，andHMGB1课题来源：广东省医学科学技术研究基金(A2012366)南方医科大学南方医院院长基金(2118007)专业名称学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员论文评阅人麻醉学王云花秦再生副教授杨承祥教授施冲教授肖晓山教授马武华教授陈仲清副教

2、授赵国栋教授肖金仿副教授2014年4月27日广州硕士学位论文乌司他丁对人结肠癌lovo细胞增殖，侵袭，凋亡及HMGB1的影响硕士研究生：王云花指导老师：秦再生摘要1111111IlllllllllIIIIIIIIlY2618175结肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，已经仅次于肺癌，胃癌，位居第三位，而且发病率和死亡率逐年升高，威胁着人类的生命。结肠癌的治疗方法以手术为主，但是肿瘤转移及术后复发仍然会造成结肠癌患者的死亡。肿瘤的生长和转移是一个复杂过程，包含了多个基因的失衡。分子靶向治疗带来新的机遇，因此对于肿瘤分子靶向治疗的分子学和细胞学

3、的研究成为热点。近年来研究发现HMGBl是一种与肿瘤的生长、浸润、转移及血管生成有密切关系的染色质蛋白。30年前，研究者因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移速度快而被命名为高迁移率族蛋白(HMG)。人的HMGBl基因位于染色体13q12，相对分子量为30×103，总共由215个氨基酸组成。HMGBl被翻译成蛋白后经糖基化，酰基化，甲基化，磷酸化等修饰加工。而只有经过酰基化和磷酸化的HMGBl才能从胞核转移到细胞质内。HMGBl可以与DNA非特异性结合，具有高度保守性，由A盒，B盒及一个高度重复并富含酸性氨基酸的C末端3个结构组成。A盒能取代

4、全长HMGBl与受体结合但不发挥生物学作用，B盒是引起炎症反应的特异性结构，同时A盒能够拮抗B盒的作用，C端主要调节与DNA的亲和力。HMGBl广泛存在于淋巴组织，脑，肝，肺，心，脾和肾等组织。不同器官组织中的HMGBl的分布不同，在肝和脑组织中主要分布于胞浆，而其他组织大多存在于胞核。摘要近年来发现，HMGBl在各种肿瘤组织中呈现高表达现象。在肝癌，胃癌，结直肠癌，前列腺癌，胰腺癌，膀胱癌，口腔癌，鼻咽癌及乳腺癌中均出现了高表达。在正常结肠组织中，HMGBl不表达，而在结肠癌旁组织中，HMGBl呈弱阳性表达，在结肠癌组织中，呈强阳性

5、表达，差异具有统计学意义。同时体外培养结肠癌细胞系(SW480，SW620，LOVO，DLD．1，HCT-116，HT-29)发现，同样也出现了HMGBl高表达现象。另有研究证明HMGBl可以增强肿瘤细胞的增殖，侵袭迁移，逃避凋亡等，促进了肿瘤的发生发展。同时研究证明敲除H】ⅥGBl之后，肿瘤细胞的增殖，侵袭迁移能力下降，凋亡增多。证明了HMGBl可能成为一个抗癌的靶基因。主要的机制可能是HMGBl与受体RAGE结合后，激活P38，．INK，ERKl／2等通路，继而激活基质金属蛋白酶9(MMP一9>、基质金属蛋白酶2(MMP～2)。H

6、MGBl与受体RAGE的相互作用可激活NF．KB，调节相关凋亡因子，使肿瘤细胞逃避凋亡。HMGBl还可以作为一种促血管生长因子，通过与受体RAGE，TLR2，TLR4结合，上调白细胞黏附分子，从而诱导内皮细胞和造血细胞促进血管内皮生长因子(VEGF)的分泌维持血管生成。HMGBl可以促进内皮细胞的活化，免疫细胞的激活，诱导炎症因子的释放。大量的研究表明HMGBl参与肿瘤细胞的发生发展，侵袭和转移，HMGBl可能成为肿瘤诊断新的分子标志物和肿瘤治疗的潜在靶点。乌司他丁(UTI)是～种尿胰蛋白酶抑制剂，可以抑制多种蛋白酶的活性，能够抑制胰

7、蛋白酶，透明质酸酶，弹性蛋白酶，血浆酶，尿激酶型纤溶酶原激活物，基质金属蛋白酶等，从而能够抑制肿瘤恶化，乌司他丁在肿瘤治疗中的作用得到重视。目前的研究主要是针对乌司他丁对UPA(纤维蛋白酶激活因子)，CD44，MMP．9，MMP．2，VEGF等的作用。RyoTanaka发现乌司他丁能够在炎症过程中抑制HMGBI的产生。目前国内外尚未有乌司他丁对结肠癌的影响的研究。本研究采用了乌司他丁作用于体外培养的人结肠癌lovo细胞，并对以下两方面进行研究：1．探讨乌司他丁对人结肠癌lovo细胞增殖，侵袭，凋亡方面的影响；2．探讨乌司他丁对人结肠癌

8、lovo细胞HMGBl，NF．KB的表达和HMGBl分布的影响。硕士学位论文实验方法1．实验分组将人结肠癌lovo细胞分为4组，对照组即不给于任何处理，乌司他丁低剂量组U1(400U／m1)，乌司他丁中剂量组U2(800