雷公藤多苷联合人参皂苷对胶原诱导关节炎大鼠cd4+cd25+foxp3+调节性t细胞的影响及骨免疫学机制探讨

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1、河北医科大学硕士学位论文雷公藤多苷联合人参皂苷对胶原诱导关节炎大鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响及骨免疫学机制探讨姓名：张秋媛申请学位级别：硕士专业：中西医结合临床指导教师：李振彬201203中文摘要雷公藤多苷联合人参皂苷对胶原诱导关节炎大鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响及骨免疫学机制探讨摘要目的：类风湿关宵炎(Rheumatoidarthi‘itis，RA)是一种慢性炎症性疾病，其病因及发病机制尚不明确，主要侵犯滑膜组织，可导致进行一陛关节破坏。以TNF—Q抑制剂为代表的生物制剂足近年来RA治疗学的重要进展，为RA的治疗提供了新的靶向治疗选择。但生物制剂

2、并个-一zH匕al-',完全控制RA病情进展，临床缓解率仍不理想。同iiq‘，由于价格昂贵及可能出现严重不良事件，临床应用受到一定限制。近年研究提刁：植物药有效成分可能对I乇A7目’破坏有治疗作用。习<课题拟通过建立胶原诱导关仃炎(collagen．inducedarthi‘iris，CIA)模HIJ，采州流式细胞分析术检测外J剞魄CI)4-．}‘CI)25+roxp3+调。77。rPl．细胞(Rcgulatol’)’rI’cells，’greg)，Ell，ISA／-22检测m消白介素一10(Intcrleukin一10，儿一10)、转化生K凶子一13l(，J’ransforminggl’o

3、wthfactorDl，’FGF．t31)、白介．索一17(Intcl’leukin一17，IL．17)含：量，免疫组彩：化学法检测关：霄组纵II，一10、"I'GF—131与MMP3表达，探讨RA，J月il’破坏的部分骨免疫学机制，同Jig‘观缨憾物约甫公藤多：行加人参皂苷酉L伍对实验性关节炎炎症评分及骨破坏相关因素的影响，为传统中药有效成分配伍治疗I之八提供依据。方法：选择体重l50—l809的Wistar大鼠，蚺堆符半。电子称重，测量双侧足爪厚度，随机分为正常埘JW,,宝-N．和CIA造模纰(实验组)。实验组大鼠。T-J-俐i，．K2u芷Ij、右足跖及i峰-．g卸tAt,，多处歧I山注

4、射鸡lI型r,l⋯H，，X—h．．1一_-I-t0．2ml／)-l，笫14d加强免疫建立CIA模型。正常对照组川}司样方法注入等量生理怂水。造模后笫21d将成模大鼠随机分为模．il*j)r三ll组、酋公藤多’￡I：组(7I'G)、TG+人参皂：曲：纰(GS)、q．I氨蝶呤组(MTX)，每组8，}I。正常对照组和模型组予生理盐水灌胃，其他组分别给予，l、G、TG+GS、M71’X灌胃治疗，共21d。造模后第42d测量各组大鼠体重、足爪厚度及关节炎指数：然后眼眶采血，抗凝，分离外周血单个核细胞，采刖流式细胞分析术检测Treg。lo％7J<合氯醛睃腔麻醉，腹主动JT,7}

5、酶联免疫I吸附(ELISA)法中文摘要检测血清TGF．131、IL—lO、IL。17水平。同时取双侧踩关节，经固定、脱钙、常规梯度脱水、浸蜡、包埋、切片。HE染色后光镜下观察组织切片-I病理改变；免疫组化法检测踝关节滑膜组织TGF．B1、IL．10、MMP一3的表达并进行半定量分析。统计学处理：所行数据均采用SPSS13．0软件包进行统计学处王坠，所得结果以均数±标准差(-、‘±S)表示。各组间均数比较采用单吲索方差分析(one。wayANOVA)，采用LSI)法进行组间两两比较。相关性分析采用Pearson：目关检验。均以P<0．05认为有统计学意义。结柴：1．各组大鼠一般悄i况的观察比较

6、造模前各组体重差异无统计学意义(P>O．05)。造模后第21灭，符组人鼠体煎(g)分别为正常组】86．88=5．87、模互!组175．63-*5．48、TG绀175．64+6．30、7l’G+GS组l80．00土6．41、M，I．x细176．88±7。94；横耍!组、7I'G组、’l、(》(IS绀、M’J’X组大鼠体重明显低丁．一常纰，差异宵统计学意义(P<0．05)；健模型绀、TG组、TG+GS组、M’l‘X组约jf固体嚷比较尤统计学差芹(P>0．05)。给约3周后，各组犬鼠体。最(g)分别为jF常组207．88+6．98、模型组181．88士4．76、7l’G纽l85．88±5．1l、T

7、G+GS组l99．50±5．40、MTX组l88．25+7．36；模型组、’FG组、7FG+GS组、MTX组的大鼠体重低于正常组，差异有显著性(P<0．01)。与模型组相比，丁G+GS细_不f=

8、M，J'X纽大鼠体重差异有统计学意义(P<0．05)：但TG+GS组体重明土曼高于M，l、x组，差异有显著性(P<0．01)。造模后第2l天，与正常组大鼠体最增力u值‘g)23．5()士8．12相比，模型组13．50