人参皂苷Rg1预处理对脂多糖诱导大鼠心肌细胞损伤的影响.pdf

《人参皂苷Rg1预处理对脂多糖诱导大鼠心肌细胞损伤的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、山东医药２０１４年第５４卷第１７期人参皂苷Ｒｇ１预处理对脂多糖诱导大鼠心肌细胞损伤的影响１２３严广华，刘倩，刘玉良（１枣庄市立医院，山东枣庄２７７１００；２枣庄市第二医院；３枣矿集团中心医院）摘要：目的探讨不同剂量人参皂苷Ｒｇ１预处理对培养乳鼠心肌细胞脂多糖（ＬＰＳ）损伤的影响。方法取ＳＤ新生大鼠６０只，分离心肌细胞培养，培养第４天随机分为４组（每次取１２只，每组重复５次）：对照组、ＬＰＳ组、低剂量人参皂苷Ｒｇ１（Ｒｇ１１０μｍｏｌ／Ｌ）＋ＬＰＳ组、高剂量人参皂苷Ｒｇ１（Ｒｇ１４０μｍｏｌ／Ｌ）＋ＬＰＳ组，分别观察各组心肌细胞搏动频率、细

2、胞存活率和培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性、ＴＮＦα水平。结果①细胞搏动频率、细胞存活率：ＬＰＳ组较对照组明显降低（P＜０．０１），人参皂苷Ｒｇ１＋ＬＰＳ组较ＬＰＳ组显著增高（P＜０．０１），高剂量人参皂苷Ｒｇ１组比低剂量组增高（P＜０．０１）。②ＬＤＨ活性：ＬＰＳ组较对照组明显升高（P＜０．０１），人参皂苷Ｒｇ１＋ＬＰＳ组与ＬＰＳ组相比ＬＤＨ明显降低（P＜０．０１），高剂量人参皂苷Ｒｇ１组较低剂量组低（P＜０．０１）。③ＴＮＦα水平：与对照组相比，ＬＰＳ组细胞悬液中ＴＮＦα增加（P＜０．０１），人参皂苷Ｒｇ１＋ＬＰＳ组较ＬＰＳ组明显减低

3、（P＜０．０１）；人参皂苷Ｒｇ１高剂量组较低剂量组低（P＜０．０１）。结论人参皂苷Ｒｇ１对心肌细胞ＬＰＳ损伤具有保护作用。关键词：人参皂苷Ｒｇ１；心肌脂多糖；心肌细胞；大鼠doi：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２-２６６Ｘ．２０１４．１７．０１１中图分类号：Ｒ２８５文献标志码：Ａ文章编号：１００２-２６６Ｘ（２０１４）１７-００２８-０３人参皂苷Ｒｇ１具有促进海马神经发生、提高神仪器厂）、ＰＨＳ-２５型ｐＨ计（上海精密科学仪器有限经可塑性、增强记忆力、抗衰老、抗疲劳、提高免疫公司）、６５２-酶联免疫检测仪（Ｌａｂｓｔｓｔｅｍｓ，芬兰

4、）、超［１～６］力、辅助抗肿瘤等作用。脂多糖（ＬＰＳ）是革兰低温冰箱（Ｓａｎｙｏ，日本）。阴性菌细胞壁的主要成分，是引起休克和炎症反应１．２方法的关键性介质之一，常引起全身炎症反应并可导致１．２．１心肌细胞的培养与分组参照Ｓｐｅｃｔｏｒ等方多器官功能衰竭、心脏受累、心功能损害。以往临床法略加改进，取１～３ｄ龄ＳＤ大鼠心脏剪碎，按胰酶实践证实，人参皂苷Ｒｇ１对缺血再灌注心肌及肥大消化法进行原代培养，培养液为含１５％胎牛血清的心肌有保护作用，且能保护ＬＰＳ损伤神经元细胞ＭＥＭ。相差显微镜下观察细胞生长状态，隔天换［７～１０］。２０１２年１０月

5、～２０１３年７月，我们通过多次液，待心肌细胞搏动良好，可在实验前２４ｈ换用无心肌细胞离体培养，以观察人参皂苷Ｒｇ１能否对血清的培养基，使细胞处于静止状态。６０只大鼠随ＬＰＳ感染心肌有保护作用。机平分为四组：对照组、ＬＰＳ组（ＬＰＳ１ｍｇ／Ｌ培养６1材料与方法ｈ）、低人参皂苷Ｒｇ１＋ＬＰＳ组（Ｒｇ１１０μｍｏｌ／Ｌ培养１．１材料实验动物：ＳＤ新生大鼠，雌雄不拘，由１２ｈ；ＬＰＳ１ｍｇ／Ｌ培养６ｈ）、高人参皂苷Ｒｇ１＋ＬＰＳ枣庄卫生学校动物部提供。ＭＥＭ培养基购自Ｇｉｂｃｏ组（Ｒｇ１４０μｍｏｌ／Ｌ培养１２ｈ；ＬＰＳ１ｍｇ／Ｌ培养６公司；胎牛

6、血清购自杭州四季青生物工程材料有限ｈ）。每次取１２只，每组重复５次。培养过程中观测公司；脂多糖、胰酶、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）均购自美心肌细胞搏动情况。国Ｓｉｇｍａ公司；人参皂苷Ｒｇ１由枣庄药品检定所提１．２．２心肌细胞存活率检测采用ＭＴＴ比色法，供；噻唑兰（ＭＴＴ）为上海普飞生物科技公司产品；培养于９６孔培养板的心肌细胞，接种密度为１×４ＴＮＦαＥＬＩＳＡ试剂盒购自广州蕊特生物科技公司。１０／孔，每孔液体２００μＬ。处理后，各组每孔加入另有二氧化碳培养箱（长沙长锦应用技术研究所）、ＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍＬ）２０μＬ，孵育４ｈ；去培养液，然

7、倒置显微镜（ＯＬＹＭＰＵＳ，日本）、超净工作台（苏州后各组每孔加入１５０μＬＤＭＳＯ振荡１０ｍｉｎ，选择净化设备厂）、全自动生化分析仪（美国Ｂｅｃｋｍａｎ公４９２ｎｍ波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔吸收司）、ＭＤ-２００-３型电子天平（上海第三分析仪器值。设不加细胞只加孵育液为空白对照，记录结果。厂）、ＴＧＬ-１６Ｇ高速台式冷冻离心机（上海安亭科学细胞存活率＝（试验组光吸收值／对照组光吸收值）２８山东医药２０１４年第５４卷第１７期×１００％。量资料以x珋±s表示，组间比较采用多因素方差分１．２．３ＬＤＨ活性、ＴＮＦα水平检测心肌细胞经过析

8、。P≤０．０５为差异有统计学意义。无血清ＭＥＭ培养液培养２４ｈ后，人参皂苷Ｒｇ１预2结果处理组分别加入人参皂苷Ｒｇ１１０、４０μｍｏｌ／Ｌ处理２．１各组心肌细胞搏动频率、存活率、ＬＤＨ活性比１