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1、第26卷第3期海洋学报Vol.26,NO.32004年5月ACTAOCEANOLOGICASINICAMay2004牙鲆养殖群体遗传结构的研究1,2黎中宝(1集美大学水产学院,福建厦门361021;2厦门大学海洋与环境学院,福建厦门361005)摘要:应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了牙鲆养殖群体(F1代)的遗传结构.结果表明,牙鲆养殖群体具有较高的遗传多样性水平.牙鲆群体平均每位点等位基因数的变化为119(011)~124(010).多态位点百分数的变化为1429%~2381%.期望杂合度的变化为0056(
2、0036)~0057(0033).观察杂合度的变化为0099(0065)~0104(0065).牙鲆群体间遗传分化较低,群体间分化度为0005,表明总的遗传变异中有995%来自群体内,有05%来自群体间.群体间遗传距离和遗传一致度均值分别为0001和0999.群体间基因流很大,等于4975.关键词:牙鲆;等位酶;遗传结构;遗传多样性;遗传分化中图分类号:Q346文献标识码:A文章编号:0253-4192(2004)03-0102-071引言牙鲆[Paralichthysolivaceus(T.etS.)
3、],隶属于脊椎动物门、硬骨鱼纲、鲽形目、鲽亚目、鲆科、牙鲆亚科、牙鲆属.牙鲆属的鱼类多分布在南、北美洲东西两岸有近20种.在亚洲沿岸只有牙鲆一种,主要分布于渤海、黄海、东海和南海.近年来过度的捕捞已经使其资源量严重衰减,其增养殖业的迅猛发展,对牙鲆自然群体的遗传本质、种质资源和遗传多样性产生了不可低估的影响.牙鲆的养殖与生态学等方面的研究较多,但牙鲆生化遗传学的研究不系[1~3][4]统.笔者应用等位酶电泳技术,在对牙鲆的组织特异性研究及等位酶的生化遗传分[5]析的基础上,进一步研究了牙鲆养殖群体遗传结构,它包括遗传多样性的度量[平均每位
4、点等位基因数(A)、多态位点百分数(P)、期望杂合度(He)、观察杂合度(Ho)]和群体间遗传分化的度量[群体间分化度(Fst),基因流(Nm),遗传距离(D)和遗传一致度(I)]等.以期为牙鲆种质资源的保护、合理利用和遗传育种等方面的研究提供可靠依据.收稿日期:2003-05-20;修订日期:2003-08-25.基金项目:福建省重点科技攻关资助项目(2002N020).作者简介:黎中宝(1966),男,河南省固始县人,副教授,博士,从事种群遗传学、保护生物学、污染生态学研究.E-mail:zhongbaoli@hotmail.com
5、3期黎中宝:牙鲆养殖群体遗传结构的研究1032材料和方法2002年5月在福建省东山取牙鲆群体1(F1代),共48尾,其中9尾为白化个体,39尾为正常个体,平均长度为68cm,宽度为3cm,在青岛购买牙鲆群体1的28尾亲鱼群体(野生).2003年4月在福建省东山取牙鲆群体2(F1代),共24尾,其中12尾为白化个体,12尾为正常个体,平均长度为66cm,宽度为28cm,在威海购买牙鲆群体2的30尾亲鱼群体(野生).牙鲆群体1和群体2的样本活体当天被带回实验室,做活体解剖,取肌肉组织样品305g加入约2~3倍体积的Tris-HCl
6、组织缓冲液(001mol/dm,pH=70)冰浴研成匀浆,在4离心15min,12000r/min,弃去沉淀,取上清液备用.电泳采用垂直板型不连续聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳.实验共检测18个酶系统,其中[6][7]图片清晰可供分析的有10个酶(表1).电泳条件参照莽克强等、朱蓝菲的方法,染色方[8][9][10][11]法参照Harris等、曾呈奎等和王中仁的方法,等位酶的缩写参照Shaklee等的方[10][12]法,酶谱判译参照王中仁的方法.数据处理采用BIOSYS-1软件.表1牙鲆群体研究所用酶系统、E.C.代码、位点数
7、目和等位基因数目酶系统缩写E.C.代码位点数目等位基因数目天冬氨酸转氨酶AATE.C.2.6.1.125酯酶ESTE.C.3.1.1-46乙醇脱氢酶ADHE.C.1.1.1.123苹果酸酶MEE.C.1.1.1.4011苹果酸脱氢酶MDHE.C.1.1.1.3711超氧化物歧化酶SODE.C.1.15.1.122乳酸脱氢酶LDHE.C.1.1.1.2711山梨醇脱氢酶SDHE.C.1.1.1.1434淀粉酶AMYE.C.3.2.1.133异柠檬酸脱氢酶IDHE.C.1.1.1.42223结果231牙鲆群体多态位点等位基因频率和Har
8、dy-Weinberg平衡检验牙鲆群体多态位点等位基因频率见表2,牙鲆群体具有多态位点的酶系统(见图1~4).22Hardy-Weinberg平衡检验见表3.根据Hardy-Weinber
