家兔半膜肌两型肌纤维全基因达谱差异的实验研究

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1、遵义医学院硕士学位论文家兔半膜肌两型肌纤维全基因达谱差异的实验研究姓名：朱光琼申请学位级别：硕士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：周播江201205遵义医学院硕士学位论文家兔半膜肌两型肌纤维全基因表达谱差异的实验研究中文摘要目的：运用基因芯片技术对家兔半膜肌的固有亚部和副半膜肌背侧亚部的全基因表达谱进行筛选，分析其表达变化的差异基因，以期了解骨骼肌两型肌纤维之间的基因表达情况，为进一步研究两型肌纤维的区别和肌纤维类型转换的相关机制奠定基础。方法：实验以10只成年家兔为研究对象，雌雄不限，其中5只用于基因芯片实验，5只用于大体解剖和RT—P

2、CR实验。取家兔后肢右侧半膜肌的固有半膜肌亚部和副半膜肌背侧亚部进行实验，运用基因芯片技术筛选两个亚部全基因表达谱的差异基因以及采用反转录聚合酶链式反应(ImPCR)分析MttC各亚型以及CaN、CaMKll0【、AMPK等基因在两亚部中的表达差异。结果：1、基因芯片检测家兔半膜肌两亚部中有4710条基因表达差异，其中去除未知基因名及其基因名相同的4423条基因，还剩下287条已知基因，其中168条上调，119条下调。2、家兔半膜肌两个亚部中，固有半膜肌亚部只含有慢肌，表达MHCI型，副半膜肌背侧亚部为快肌，表达MHCIIb、MHCIIX、

3、少量MHCIIa，同时两亚部都表达CaN、CaMKll0【、AMPK基因，但副半膜肌背侧亚部的表达量明显高于固有半膜肌亚部。结论：1、骨骼肌快肌纤维与慢肌纤维之间有4710条基因差异，去除未知名基因及基因名相同的4423条差异基因，共有287条已知基因差异表达，其中168条基因上调，119条基因下调。这些基因涉及骨骼肌细胞的生物学过程、细胞组分、分子功能、物质代谢等。2、MHC在骨骼肌两型肌纤维中表现出分子结构不同，故将MHC作为划分骨骼肌纤维类型分型的分子标志的观点是可以被接受的。3、CaN、CaMKIIa和AMPK三个基因均与骨骼肌肌纤

4、维类型的转换有关，它们在MHCII(快肌纤维)中表达量高，MHCI(慢肌纤维)中表达量较少。有利于促进骨骼肌MHCII(快肌纤维)向MHCI(慢肌纤维)的转变。关键词：半膜肌亚部肌球蛋白重链钙调磷酸酶钙调蛋白激酶腺苷酸活化蛋白激酶4遵义医学院硕士学位论文家兔半膜肌两型肌纤维全基因表达谱差异的实验研究ExperimentalstudiesonthedifferencegenesoftwomusclefibertypesinrabbitsemimembranosusAbstractobjective：Inordertostudydifferen

5、ceandconversionmechanismbetweentwomusclefibertypesindepth，thisstudydetectexpressiondifferencegenesbetweentwomusclefibertypesofrabbitsemimembranosusbyuseinggenechipstechnology．Methods：Semimembranosussampleswerecolletedfrom10adultrabbitseithermaleorfemale，5Semimembranosussam

6、plesusedforgenechiptest，and5SemimembranosussamplesusedformRNAexpressionanalysisofCaN、CaMK110L、AMPKgenesandMHCisoformsbyRT。PCRtest．Results：1．Therewere4710differencegenesbetweenfastandslowfibertypeoftheskeletalmuscle．Removal4423differencegenesoftheunknowgenesnameandthesamena

7、megenes，therewere287differencegenes，ofwhich168geneswereupregulatedand19genesdownregulated．2．Inthetwocompartmentsofrabbitsemimembranosus，theinherentsemimembranosuscontainedslowmuscle(typeIfiber)only，expressedMHCItypegene；Butvice．semimembranosusdorsalcompartmentscontainedfas

8、tmuscle(typeIIfibers)only，expressedMHCIIx．MHCIIbandasmallamountofMHCIIagene．Twocompartmen